189 例新生兒ABO溶血三項試驗結果的分析

朱潔好，葉伙梅

（云浮市人民醫院輸血科，廣東 云浮 527300）

新生兒溶血病（HDN）是指母嬰血型不合而引起的胎兒或新生兒免疫性溶血性疾病。我國新生兒最常發生HDN 的血型系統是ABO 血型系統[1]，而Rh 血型不合引起的HDN 則因為RH 陰性在人群分布占比低而較少發生[2]。ABO-HDN 常見于O型母親所生下的A 型或B 型新生兒，一定數量的胎兒紅細胞進入母體并刺激母體產生相應的抗體，該抗體通過胎盤進入胎兒引起特異性抗原-抗體反應，從而引發溶血病[3]。ABO-HDN 患兒的臨床癥狀主要表現為貧血、水腫、黃疸、肝脾腫大，嚴重者可繼發核黃疸,可導致永久性神經系統發育障礙甚至危及生命[4]。因此，HDN 的預防和早期診斷則非常重要。溶血病三項檢測是診斷HDN 最常用的檢測方法, 其檢測內容包括直接抗人球蛋白試驗（DAT）、血清游離抗體（游離試驗）和紅細胞釋放抗體試驗（釋放試驗）[5]。為了更好地為 HDN 的早診斷早治療提供依據, 本文通過回顧分析2017 年1月-2018 年12 月我院189 例疑似ABO 溶血病的新生兒溶血病三項試驗結果，對其進行統計分析，報告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象 2017 年 1 月-2018 年 12 月云浮市人民醫院疑似ABO 新生兒溶血病的189 例血液標本。

1.2 主要試劑及儀器 微柱凝膠血型卡、微柱凝膠抗人球蛋白卡、ID-Diluent2 稀釋液及ABO 標準紅細胞均由瑞士達亞美公司生產，以上試劑均在有效期內使用。儀器為血型血清學離心機（Centrifuge 12 SⅡ）、孵育器（Incubator 37 SI）、CU600 型電熱恒溫水箱。北京白洋BY-120A 離心機。

1.3 方法

1.3.1 血型鑒定 采用微柱凝膠法，參照《全國臨床檢驗操作規程》[6]進行新生兒ABO 血型鑒定。

1.3.2 溶血病三項試驗 參照 《全國臨床檢驗操作規程》[6]進行溶血病三項試驗。

1.3.3 HDN 診斷標準 當新生兒溶血病三項試驗中的任意兩項陽性或三項均陽性時診斷為HDN陽性, 若只有釋放試驗單獨一項陽性時也診斷為HDN 陽性[7]。

1.3.4 統計學處理 采用 SPSS 26 進行統計分析，計數資料的比較采用χ2檢驗。P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 115例HDN 患兒溶血病三項試驗聯合檢測結果 在189 例疑似HDN 的新生兒標本中,確診為HDN 有 115 例，陽性率為 60.85%。在 115 例 HDN溶血病三項試驗聯合檢測中, 三項均陽性模式為15 例（13.4%）,游離試驗和釋放試驗陽性模式為63例(54.78%),DAT 和釋放試驗陽性模式為2 例(1.74%),單獨釋放試驗陽性模式為 35 例（30.43%）。此外，在 115 例 HDN 中，DAT 陽性 17 例（14.78%），游離試驗陽性78 例（67.82%），釋放試驗陽性115例（100%）。見表1。

2.2 不同出生日齡HDN 檢出率統計結果 HDN 檢出率以出生日齡≤3d 的較高，達 71.01%（98 例）；出生日齡＞3d 的檢出率為 33.3%(17 例)，差異有統計學意義（χ2=25.55, P＜0.0001）,見表2。

表1 115 例HDN患兒溶血三項測定模式結果

表2 不同年齡新生兒溶血病患病率[n(%)]

2.3 不同血型新生兒溶血病發生率 189 例疑似HDN 的血型檢測結果中，A 型患兒 57 例，陽性率為 77.034%，B 型患兒 58 例，陽性率為 50.43%，A型患兒的患病率明顯高于B 型患兒，差異有統計學意義（χ2=13.87,P＜0.0001），見表3。

表3 不同血型新生兒溶血病發生情況[n(%)]

3 討論

ABO-HDN 是由于母嬰ABO 血型不合而發生免疫作用引起的，母體IgG 抗-A 或IgG 抗-B 通過胎盤進入胎兒循環，抗原抗體反應導致紅細胞破壞溶血從而導致HDN 的發生[8]。胎兒紅細胞溶血后可引起一系列病理變化，包括貧血、水腫、膽汁瘀積、含鐵血黃素沉積、出血灶等。溶血病三項試驗是HDN 確診的檢測手段，包括DAT、游離試驗和釋放試驗[6]。DAT 試驗是檢測新生兒紅細胞上是否被不完全抗體致敏。游離試驗可檢測新生兒血清中是否存在能與尚未致敏紅細胞結合的不完全抗體，游離抗體的滴度與母體IgG 抗體進入胎兒體內的量有關，對判斷觀察病情的發展有輔助作用。釋放試驗通過熱放散法把引起紅細胞致敏的表面抗體釋放到鹽水中,再用釋放液與標準紅細胞試劑反應，是HDN 的確診試驗。在本次回顧性分析中，在 115 例 HDN 陽性患兒中，DAT 陽性檢出率（14.78%）較低，表明DAT 陰性不能提示患兒沒有溶血病發生；游離試驗陽性檢出率（67.82%）僅次于釋放試驗（100%），表明游離試驗對于HDN 確診和疾病嚴重程度的判斷有輔助作用[9]。因此，溶血病三項試驗對HDN 的確診和提示疾病嚴重程度有重要作用； 同時由于游離抗體相對高的檢出率提示對妊娠早期夫婦血型檢測和可疑孕婦進行抗體效價檢測可以預防HDN 的發生。

新生兒溶血病的一個特征性癥狀是進行性黃疸增高，在出生后2～5d 出現，易被誤診為生理性黃疸，從而導致HDN 的延誤診斷與治療。本研究發現新生兒的日齡越小，HDN 的檢出率越高，≤3d的新生兒檢出率達到71.01%，該結果提示嬰兒出生3d 內送檢可以提高檢出率，這與趙建萍等[10]報告一致。因此，對于疑似發生HDN 的新生兒，應盡早采集血標本進行溶血病三項檢測。HDN 主要是由O 型母親的IgG 免疫球蛋白引起的，IgG 免疫球蛋白可以針對新生兒紅細胞上攜帶的A 或B 抗原引起不同程度的HDN。ABO 新生兒溶血病的發生及嚴重程度，與新生兒細胞A/B 抗原結合位點的表達量、血型物質、胎盤的屏障作用及IgG 亞類的不同有明顯相關性[11,12]；同時，母親體內IgG 抗-A或IgG 抗-B 滴度與HDN 的發生發展關系密切[13]。本研究發現A 型患兒的發病率77.034%明顯高于B 型患兒的發病率50.43%, 這與吳淑華及Matteocci A 等[14,15]的報告一致。O-A 母嬰模式 HDN 發生率較O-B 母嬰模式高可能與血型抗原結合位點有關，因為在血型系統抗原結構上，A 型紅細胞抗原結合位點0.81～1.17×106比B 型紅細胞抗原結合位點 0.61～0.83×106數量多[16]。因此，需要盡早進行母嬰血型檢測,并根據母親與新生兒的血型做出相應的防治措施，從而避免HDN 的發生。

綜上所述，溶血病三項試驗對HDN 的診斷和治療有重要意義，在O-A 或O-B 母嬰模式中要重視溶血病三項檢查；日齡在3d 內的新生兒陽性檢出率最高，對于疑似HDN 的患兒應盡早進行溶血病三項檢測；O-A 母嬰模式較O-B 母嬰模式HDN發生率高，因此，應及早進行母嬰血型檢測，若O型母親與新生兒血型不相容時,應及早進行溶血病三項檢查并做出相應防治措施,避免延誤診療。