鈉牛磺膽酸共轉運多肽缺陷病的臨床特點及分子遺傳特征的研究進展

陳蕊 王美芬

摘要：鈉牛磺膽酸共轉運多肽缺陷病是由于SLC10A1基因變異，導致膽汁酸代謝障礙的疾病。臨床表現主要以兒童期持續、頑固的高膽汁酸為主，部分患兒早期伴有膽紅素升高、膽汁淤積癥。NTCP鑒定為人類肝癌細胞中乙肝病毒感染的關鍵受體，為建立該病毒的新型培養系統及抗病毒開辟了一條新途徑。本文對該病的臨床特點、分子特征研究進展及乙肝病毒感染的關系進行綜述。

關鍵詞：鈉牛磺膽酸共轉運多肽，乙肝病毒，分子特征，研究進展

【中圖分類號】R633 【文獻標識碼】A 【文章編號】1673-9026（2021）04-306-02

一、臨床表現及疾病歷史

鈉牛磺膽酸共轉運多肽（Sodium taurocholate cotranSPorting PolyPePtide，NTCP）缺陷病是因基因SLC10A1變異導致膽汁酸代謝障礙的一種近年來新發現疾病。主要臨床表現為顯著、持續性高膽汁酸，膽汁酸升高的程度與其他肝功能指標不匹配。

SLC10A1基因于1994年被克隆[1]，國際上報道的首例NTCP缺陷病，是荷蘭學者Vaz等[2]在2015年報道的。報道的患兒是一名5歲阿富汗裔女孩，1歲前出現的持續而顯著的高膽烷血癥（hyPercholanemia）為主要實驗室表現，血清總膽汁酸水平峰值高達1531umol/L，但沒有肝酶、直接膽紅素升高，伴有輕微肌張力減低和生長發育落后;SLC10A1 基因測序發現患兒系突變c.755G>A（P.R252H）的復合雜合子。2016年，我國兒科界報道了國際第2例NTCP缺陷病患兒[3]。該患兒也以顯著且持續的高膽汁酸血癥（峰值達738.7umol/L）為突出特征，嬰兒早期出現過膽汁淤積性黃疸。中文文獻中首例NTCP缺陷病患兒報道于2017年，患兒以新生兒期早發性、遷延性、頑固性黃疸為主要臨床特征，血生化符合肝內膽汁淤積癥特點[4]，黃疸消退后高膽汁酸血癥仍持續存在，但無瘙癢癥狀。

二、分子特征

NTCP是一種在肝細胞基側膜表達的轉運蛋白，是一種作為參與膽汁酸腸肝循環的重要載體，能從血漿中的結合膽汁酸鹽攝取入肝細胞[5-6]，SLC10A1基因突變，導致NTCP從血漿中攝取膽汁酸鹽障礙，膽汁酸淤積，形成顯著、持續的高膽汁酸血癥。NTCP依賴鈉轉運通道，能從血漿中攝取結合型膽汁酸進入肝細胞，但是也能通過代償機制轉運膽汁酸。其代償機制包括了以非鈉依賴性方式通過肝細胞基側膜有機陰離子轉運蛋白異二聚體OATP1B1/1B3轉運膽汁，在肝細胞膜表達的異二聚體OSTα/OSTβ，也可以攝取膽汁酸[7]。二聚體OATP1B1/1B3隨著年齡的增長其表達量增多，使兒童期患NTCP缺陷病患兒的高膽汁酸隨著年齡的增長而逐步下降，甚至逐漸恢復正常。由于存在代償機制，使NTCP缺陷病患兒短期臨床結局良好，尚無肝硬化甚至致死病例的報道。

NTCP的編碼基因SLC10A1位于染色體14q24.2，全長約21.9kb，其編碼區由5個外顯子和4個內含子構成，轉錄產物長2049bP，包含一個1050bP的開放讀碼框;非編碼區除了5和3非翻譯區，還包含一個長約1.2kb的啟動子區域，而5′非翻譯區和啟動子區域含多種順式調控元件，其中CEBP-β和HNF3β已經被證實參與人類SLC10A1基因表達的調控[8-9]。目前已經報道的突變位點包括c.800C>T（P.Ser267Phe）[10]、P.Ar9252HiS[5]、c.615-618del（P.Ser206Prof*12）[11]，隨著基因檢測技術的發展，以及研究者對該病研究的不斷加深，發現T（P.Ser267Phe）（S267F，c.800 C> T，rS2296651）在SLC10A1基因變異最為常見，在東南亞國家中，屬于高頻變異。尤其在我國患者中，其基因變異頻率高達95.5%[12，13，14]，在SLC10A1變異譜中占有領先地位。根據千人基因組計劃的研究數據表明，P.Ser267Phe等位基因在非裔、歐裔美國人和西班牙語人群中暫時無發現，而在東南亞人群變異頻率較高，說明該基因變異具有種族差異[15];在我國華南漢族和傣族以及越南人群中，該變異等位基因頻率分別高達8%、12%和11%，NTCP缺陷病我國華南漢族人群中發病率有0.64%，傣族人群有1.44%，越南族人群有1.21%[16]。

三、HBV感染的受體

有研究表明，NTCP被破壞，膽汁酸只能以非鈉依賴性方式，通過肝細胞基側膜的轉運蛋白異二聚體OATP1B1/1B3來維持代謝，但是膽汁酸的攝取率較低[17]。NTCP為人類肝癌細胞中不可缺少的 HBV感染的關鍵受體[18]。NTCP不僅有攝取膽汁酸的作用，也能介導HBV、HDV進入肝細胞[19]。一方面，NTCP可直接與HBV的L蛋白的PreS1區結合感染肝細胞，HBV PreS1區的第2-48個氨基酸是HBV和NTCP的結合位點，NTCP的第84-87和157-165個氨基酸是最主要的結合位點[20]。尤其是存在NTCP表達的肝癌HePG2細胞（HePG2-NTCP）易受 HBV 和 HDV感染[21]。被感染的HePG2 / NTCP細胞比HePG2細胞釋放更多的病毒抗原[22]。在體外實驗中，HePG2 / NTCP細胞也是HBV和 HDV感染受體，為病毒入胞提供了便利的通道[18]。而當肝細胞增值時，在肝細胞基側膜表達的轉運蛋白NTCP表達下調，與HBV的L蛋白結合減少，新生的肝細胞與HBV感染降低，對HBV有一定的抵抗性[23]。另一方面，FXR作為HBV的前病毒因子，可以和膽汁酸結合。FXR被膽汁酸激活后，增強PreS1、PreS2啟動子的活性和HBV核心啟動子的轉錄，增加前基因組RNA合成并促進HBeAg的表達，進而影響病毒復制水平[24，25]。膽汁酸也可以通過持續下調FXR或減少EnhⅡ/CP處FXR的數量，抑制EnhⅡ/CP激活，從而降低cccDNA的轉錄活性，減少病毒基因表達及蛋白質合成[26]。而95%的膽汁酸通過腸肝循環，由NTCP攝取。因此NTCP除了參與HBV前期感染環節，也參與后期HBV轉錄調控環節[27]。

SLC10A1基因有2個突變位點會降低HBV的感染。其中高頻變異P.Ser267Phe不僅能讓NTCP無法攝取膽汁酸，而且消除了HBV感染肝細胞的能力[28]。An P等研究發現Ser267Phe突變者感染HBV的風險降低65%，肝硬化的風險降低85%，但不能阻止肝硬化發展為肝癌[29]。Ser267Phe突變者在感染HBV后有利于成為無癥狀攜帶者，該突變也可能自限性的清除HBV病毒[30]。另一個突變點R252H的變異，NTCP的細胞表面表達降低[5]。

抑制NTCP表達而抗HBV的藥物已有文獻報道，通過維甲酸受體（RAR）抑制NTCP表達減少HBV進入啟動子活性[18]。

四、總結

NTCP缺陷病主要以高膽汁酸為臨床表現，自2015年首次發現，目前已有的病例報道不多，至今未發現肝硬化及死亡的病例報道。研究發現NTCP是HBV的功能蛋白，介導HBV入胞。HBV標志物檢測和SLC10A1基因分析，可以區分HBV攜帶及NTCP缺陷病。早期診斷、早期治療，盡量減少并發癥，改善預后。

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