祛風止癢湯對濕熱下注型肛周濕疹患者Treg/Th17免疫平衡的影響研究

李曉燕 李月英 王良 馬國安 王鵬程 王君敬（衡水市人民醫院皮膚性病科，衡水 053000）

肛周濕疹是常見的一種肛腸炎癥疾病，主要是在肛周部分的真皮淺層、表皮及會陰處出現皮損潮紅、丘疹及丘皰疹的現象，從而引起的強烈瘙癢以及頑固且易復發的肛周濕疹，并且大大降低了患者的生活質量［1‐2］。目前對于肛周濕疹具體發病機制還尚未完全弄清楚，但其中炎癥和免疫參與的變態反應是發病的關鍵［3］。卿勇等［4］的研究提到，Th1、Th2、Th17等細胞亞群以及相關的細胞因子還有IgE、IgM、IgG等抗體均參與了肛周濕疹的發展過程，因此研究患者免疫反應有助于治療患者肛周濕疹。

臨床上對于肛周濕疹治療方案較多，主要是根據患者的癥狀，進行抗炎癥、抗變態反應以及調節免疫等方面的治療［5］。如通過糖皮質激素治療，雖然對于患者的癥狀和療效有效，但容易引起患者出現色素沉著或皮膚萎縮［6‐7］。而對一些療效一直不佳的患者可實施肛周封閉術等方式治療，該手術可在1周后皮損消退，但會留下創面［8‐9］。中醫因濕與熱引起的肌膚失養將肛周濕疹區分為濕熱下注、熱毒壅盛、脾虛濕盛和血虛風燥。中醫認為脾胃運化不靈便會導致濕熱下注，并進一步導致濕熱之邪阻滯經絡，充于腠理并浸淫肌膚，因此治療應按照清熱祛濕和祛風止癢的原則［10］。

本研究通過祛風止癢湯來治療濕熱下注型肛周濕疹，觀察治療的療效情況，并分析患者治療過程中Treg/Th17免疫平衡，來為臨床提供理論基礎和研究方向。

1 資料與方法

1.1 資料

1.1.1 一般資料收集我院收治的200例肛周濕疹患者為本次研究的研究對象，收集時間為2017年7月至2020年6月，對照組100例，其中男60例，女40例，年齡19～63歲，平均年齡（47.7±8.7）歲，觀察組100例，其中男58例，女42例，年齡19～65歲，平均年齡（48.5±9.2）歲，兩組患者臨床資料比較無統計學差異，具有可比性。醫學道德倫理委員會已同意本次研究的進行，受試者均知情同意并且已簽署知情同意書。

1.1.2 入組標準納入標準：①所有患者均被確診為濕熱下注型肛周濕疹，診斷標準參照《實用肛腸病學》［11］；②患者年齡18～65歲；③近2周未使用過免疫抑制劑、糖皮質激素、細胞毒性藥物等；既往無肛腸疾病手術史；④無肛門形態與功能異常；⑤對該研究知情，自愿簽署知情同意書。排除標準：①合并其他皮膚病或肛門疾病，如蕁麻疹、肛周尖銳濕疣等；②感染、滲出嚴重；③合并嚴重心肺肝腎功能不全；④合并血液系統、免疫系統等嚴重原發性疾病；⑤合并精神異常；⑥妊娠期或哺乳期婦女；⑦對研究藥物過敏，或為嚴重過敏體質。剔除標準：①未能堅持治療，依從性差者；②出現嚴重不良反應者；③在治療過程中妊娠的婦女。

1.2 方法

1.2.1 治療方案觀察組采取祛風止癢湯內服治療，方藥組成：地膚子、白鮮皮各30 g，蛇床子15 g，防風、荊芥、當歸、生地、五味子、烏梅各10 g，蟬衣、甘草各5 g。加水1 500 ml煎至300 ml，每日1劑，分早晚2次溫服。將藥物殘渣研末后外敷，每日換藥1次。對照組則予以依巴斯汀片（杭州澳醫保靈藥業，批號170412，規格10 mg/片）口服，每次10 mg，每日1次；曲安奈德益康唑乳膏（福建太平洋制藥，批號170326，規格25 g/支）局部外用，早晚各涂1次。兩組均以7 d為1個療程，連用2個療程后觀察兩組療效。

1.2.2 檢測方法收集2組患者治療前與治療后8 ml外周血，其中5 ml置于肝素抗凝管中，加入800 ml的完全培養基，再加入1 ml PMA和1μl Ionomycin，吹打混勻細胞后在5% CO2中培養4 h后，加入PE‐Cy5抗人CD4避光孵育后破膜，加入PE抗人IL‐17A，避光反應30 min后，加入2 ml PBS后，1 000 r/min,離心10 min,去除上清液，上流式細胞儀對CD4+IL‐17A+Th17細胞進行檢測和分析。取上述細胞加入FITC抗人CD25和PE‐Cy5抗人CD4避光孵育后破膜，加入APC抗人Foxp3，避光反應30 min后，加入2 ml PBS，1 000 r/min,離心10 min,去除上清液，上流式細胞儀對CD4+CD25+Foxp3+Treg細胞進行檢測和分析。另外3 ml于促凝管中，立即在4℃下3 000 g離心10 min，對血清中TNF‐α、IL‐6使用ELISA檢測，嚴格按照試劑盒說明進行檢測。

1.2.3 癥狀評估標準主要評估患者瘙癢、皮疹面積與皮疹嚴重程度、生活質量。對患者瘙癢程度進行評分：0分：無瘙癢；1分：偶爾瘙癢，對工作和生活不造成影響，無須用藥；2分：陣發性瘙癢，已經影響到睡眠、工作以及生活，需用藥；3分：劇烈瘙癢，嚴重影響睡眠、工作以及生活，需用藥。對患者的濕疹和皮損嚴重程度以及皮損面積通過濕疹面積及嚴重度指數（EASI）來進行評估，總分為12分，分值越高表示皮損情況越嚴重［12］。采用皮膚病生活質量指數（DLQI）評分對患者生活質量進行評估，總分30分，患者評分越低表明生活質量越高。

1.2.4 療效評估參照《中藥新藥臨床研究指導原則》標準對治療療效進行評估［13］。治愈：皮損消失，肛周瘙癢、潮濕等癥狀完全緩解；顯效：皮損大部分減退，肛周瘙癢、潮濕等癥狀顯著緩解；有效：皮損部分減退，肛周瘙癢、潮濕等癥狀有所緩解；無效：皮損無減退或增加，肛周瘙癢、潮濕等癥狀無緩解或加重。總有效率=（治愈+顯效+有效）/總患者數×100%。

1.2.5 病狀復發情況對所有患者進行半年隨訪，收集并統計所有患者治療后3個月內及6個月內的復發率。

1.2.6 不良反應記錄患者因用藥而出現的副作用（惡心、腸胃不適、頭疼、口干、患處局部皮膚燒灼感或針刺感等癥狀）。

1.3 統計學方法使用SPSS19.0統計分析軟件對所收集到的數據進行統計學分析，對于計數資料使用率（%）表示使用卡方檢驗，以χ2表示，計量資料則采用均±s來進行表示，所有計量資料均符合正態分布，兩組間比較使用獨立樣本t檢驗，兩組內不同時間段比較使用配對樣本t檢驗，以t表示，P＜0.05表示有統計學意義。

2 結果

2.1 患者治療療效通過比較兩組患者治療后的治療療效，觀察組治療總有效率為98.00%，對照組總有效率為85.00%，觀察組療效總有效率顯著高于對照組，見表1。

2.2 治療后患者瘙癢程度、皮損程度及生活質量比較2組患者治療前瘙癢程度評分、EASI評分、DLQI評分治療前無統計學意義，治療后兩組患者的瘙癢程度評分、EASI評分、DLQI評分均顯著降低，且觀察組治療后的瘙癢程度評分、EASI評分、DLQI評分顯著低于對照組，見表2。

2.3 Treg細胞和Th17細胞群比率比較患者治療前后的Treg細胞和Th17細胞群比率，發現2組患者治療后Th17細胞比率均顯著降低，Treg細胞比率均顯著升高，且治療后觀察組的Th17細胞比率顯著低于對照組，Treg細胞比率顯著高于對照組，見表3。

2.4 治療前后炎癥因子水平2組患者治療后炎癥因子IL‐6與TNF‐α均顯著降低，且觀察組患者的IL‐6與TNF‐α水平在治療后顯著低于對照組，見表4。

2.5 治療后患者半年復發狀況統計2組患者治療后半年的疾病復發狀況，觀察組治愈患者治療結束后3、6個月時的復發率分別為5.00%、14.00%，與對照組42.00%、68.00%比較均顯著降低，見表5。

2.6 治療后不良反應100例觀察組共出現3例不良反應，其中2例惡心，1例腸胃不適，100例對照組共8例患者出現不良反應，其中3例頭疼，1例口干，1例嗜睡，2例患處局部皮膚燒灼感，1例惡心，兩組患者不良反應發生率比較無統計學意義（χ2=2.405，P=0.121）。

表1 治療療效表［n（%）］Tab.1 Therapeutic effect table［n（%）］

表2 瘙癢程度、皮損程度及生活質量比較（±s）Tab.2 Comparison of pruritus，skin lesions and quality of life（±s）

表2 瘙癢程度、皮損程度及生活質量比較（±s）Tab.2 Comparison of pruritus，skin lesions and quality of life（±s）

Groups Control Observation t P Pruritus Before treatment 2.35±0.22 2.32±0.24 0.592 0.358 After treatment 1.24±0.28 0.74±0.16 15.504＜0.001 EASI Before treatment 6.37±2.16 6.33±2.13 0.132 0.895 After treatment 3.73±1.52 2.41±1.17 6.882＜0.001 DLQI Before treatment 13.56±3.64 12.82±3.70 1.426 0.156 After treatment 6.46±0.79 4.38±0.53 21.865＜0.001

表3 患者Treg細胞和Th17細胞群比率（%）Tab.3 Ratio of Treg cells and Th17 cell groups in patients（%）

表4 治療前后炎癥因子水平Tab.4 Inflammatory cytokines before and after treatment

表5 患者半年復發狀況比較［n（%）］Tab.5 Comparison of recurrence in half a year［n（%）］

3 討論

肛周濕疹患者屬于變態反應性疾病，其中許多患者均是由過敏所導致的，屬于常見的過敏性炎癥皮膚病，與機體的免疫應答有一定關系，因此具有有效的抗炎及免疫抑制劑糖皮質激素便成為常用的治療藥物，但長期應用會帶來一定的副作用，并且停用則容易復發，而中醫中藥應用往往不良反應較少［14‐16］。

本課題組研究顯示祛風止癢湯治療后，對肛周濕疹患者的治療療效顯著高于對照組的療效。并且對患者的瘙癢程度和皮損嚴重程度進行了比較，發現祛風止癢湯治療的患者其瘙癢程度和皮損嚴重程度改善更加明顯，并且對生活質量的改善也更加顯著。祛風止癢湯成分中含有的地膚子具有清熱利濕、祛風止癢，主治陰癢帶下、風疹、濕疹、皮膚瘙癢，也具有抗過敏的效果。白鮮皮主治風濕痹痛，具有燥濕止帶、祛風止癢之功效。防風則可祛風解表，主治風疹瘙癢，而蛇床子具有殺蟲止癢之功效，可外治濕疹瘙癢，當歸則具有補血活血之功效，而荊芥具有解表散風透疹的功效。各藥合用便可達到殺毒殺蟲，清熱活血，除濕祛風止癢的功效。

過往研究表明患者的免疫細胞及免疫因子往往會參與到患者的局部或者全身性的炎癥中，產生濕疹、過敏性疾病以及身免疫性疾病［17‐18］。地膚子和荊芥在其他的動物實驗研究中均被發現具有較好抗炎的效果，并且地膚子和白鮮皮還具有免疫調節的功效［19‐22］。如XIAO等［23］研究提到地膚子含有黃酮類成分，對變態反應性接觸性皮炎大鼠進行治療，實驗結果表明地膚子的黃酮類成分具有良好的免疫改善及抗炎癥效果。楊旭等［24］探究了白鮮皮在急性濕疹大鼠中的作用，發現白鮮皮可通過抑制PAR‐2/TRPV1來調節Th1/Th2細胞分泌，從而減少細胞因子IL‐31、IL‐4水平，延緩急性濕疹的發展。本課題組對患者的Treg/Th17免疫平衡進行觀察和檢測，Th17細胞與Treg細胞參與了各種自身免疫性疾病以及炎癥疾病，通過釋放抗炎細胞因子來起到抗炎作用［25‐26］。Th17細胞則可通過產生多種促炎癥因子如IL‐6、IL‐17、IL‐21等來參與各種炎癥疾病的發展，因此通過調節Th17/Treg來改善機體免疫紊亂逐漸成為濕疹的一種治療思路［27‐29］。本研究發現2組患者治療后Th17細胞亞群均顯著降低，Treg細胞則顯著升高，且使用祛風止癢湯治療的患者其Th17細胞亞群顯著低于對照組，而Treg細胞則顯著高于對照組。同時對2組患者的炎癥因子IL‐6和TNF‐α進行了檢測，治療后患者的IL‐6和TNF‐α水平均降低，但祛風止癢湯治療的患者IL‐6與TNF‐α的水平顯著低于對照組。這表明祛風止癢湯不僅具有抗炎癥功能，還可調節肛周濕疹失衡。

綜上所述，祛風止癢湯可通過改善肛周濕疹患者的Treg/Th17免疫平衡及炎癥水平治療肛周濕疹。