高爾基磷酸化蛋白3與結直腸癌臨床病理特征關系的Meta分析

楊自凱 謝長順 鄭繼堯 徐歡 邵夢真 鄭岳

結直腸癌(CRC)是胃腸道中常見的惡性腫瘤，已成為世界上第四大致命的惡性腫瘤，每年有近90萬人死于該病[1]。其早期癥狀不明顯，超過75%的患者確診時已處于中晚期或發生遠處轉移，綜合治療難以取得滿意的療效[2]。因此，確定一種代表性的分子標志物及治療靶標，對結直腸癌早期診斷及治療具有重要的意義。高爾基磷酸化蛋白3(Golgi phosphoprotein 3，GOLPH3)是一種新的癌基因，可激活絲/蘇氨酸蛋白激酶(AKT)，促進癌細胞增殖，抑制細胞凋亡，在高爾基體運輸中起決定性作用[3-5]。先前臨床研究已證實，GOLPH3與很多腫瘤發生、發展有關[6]。有多項研究表明GOLPH3的高表達與結直腸癌的癌變、臨床病理特征密切相關[7-13]。因此，如果將GOLPH3作為判斷結直腸癌的臨床病理特征的檢測指標則具有極大的實用性。目前已發表的研究中結直腸癌患者的臨床特征與GOLPH3的表達之間的相關性仍然是有爭議的。因此，本研究運用Meta分析的方法，了解GOLPH3水平與結直腸癌患者臨床病理特征的相關性，為臨床實踐提供循證醫學依據。

1 資料與方法

1.1 文 獻 檢 索 在PubMed、Web of Science、Medline、萬方數據庫和CNKI中進行了系統的綜合文獻檢索，篩選了GOPLH3表達與結直腸癌臨床病理特征關系的研究。檢索時間從創建數據庫之日截止到2020年5月。醫學主題詞(MeSH)和文獻檢索中檢索詞如下：(“Golgi phosphoprotein 3”or“GPP34 protein”or“GOLPH3”)、(“colorectal cancer”or“colorectal tumor”or“colorectal carcinoma”or“CRC”or“colon cancer”or“rectal cancer”)以及對應的中文檢索詞。

1.2 文獻納入標準 由病理確診為結直腸癌；有臨床病理或組織學數據；應用免疫組織化學方法檢測GOLPH3表達；在放療、化療和其他治療前采集腫瘤組織；文獻出版語言僅限于中文和英文并可查看全文。

1.3 文獻排除標準 存在重復數據的文章；病例報道、綜述、會議摘要；動物試驗；無法獲取所需要的生存資料。

1.4 數據提取及質量評價 兩名獨立的研究人員按照設定的標準從研究中提取數據，包括：發表年份、作者、GOLPH3的評估方法、患者人數、病例數目、性別、年齡和大小、淋巴結轉移[14-15]。質量評估由另外兩位研究人員獨立進行，使用紐卡斯爾-渥太華量表(NOS)來評估納入文獻的質量。總分為9分，文章評分在1～3分、4～6分、7～9分的分別被定義為低、中等或高質量的文章。本分析納入的7篇文獻中，中等質量文獻2篇，高質量文獻5篇。1.5 數據分析 我們計算了納入文獻中的OR和95%CI。采用隨機效應和固定效應模型分析兩種方法對異質性進行了分析。有統計學意義的異質性定義為卡方檢驗P＜0.1或I2＞50%[16]。假如觀察到異質性，我們利用隨機效應模型來減少異質性對結果的影響，反之則使用固定效果模型[17]。使用Egger's檢驗用于評估發表偏倚[18]。使用STATA 16.0軟件進行數據分析。

2 結果

2.1 納入研究的特點 納入文獻的基本特征見表1，文獻篩選流程見圖1。納入文獻均于2014—2018年間在亞洲發表，樣本量在40～148[7-13]；中位隨訪時間為36～67個月。所有研究均為回顧性研究，55%～62.22%的患者為男性。每項研究分數均為NOS量表評分得出，分數都大于6分。

表1 納入文獻的基本特征

圖1 文獻檢索流程圖

2.2 Meta分析

2.2.1 腫瘤、結直腸組織和正常組織中GOLPH3的表達 共6篇文獻[7-9，11-13]報道了GOLPH3在結直腸癌組織和正常組織中的表達。根據隨機效應模型分析，總OR為3.15(95%CI＝2.28～4.35%，P＜0.001)。排除異質性相關研究后，總OR值為5.25(95%CI＝3.60～7.64，P＜0.1)。這些結果表明，GOLPH3在結直腸癌組織中的表達水平顯著提高。

2.2.2 GOLPH3表達與臨床病理特征的關系 從腫瘤不同臨床階段、分化、淋巴結轉移、性別、年齡、腫瘤大小幾個方面分析GOLPH3表達與結直腸癌臨床病理特征之間的關系，見圖2。由于在不同臨床階段、腫瘤分化和腫瘤大小中存在分歧結果以及只納入晚期結直腸癌患者的研究，有顯著的異質性。在排除這幾項研究后得出結論：GOLPH3高表達與腫瘤不同臨床階段(OR＝3.03，95%CI＝2.04～4.50，P＜0.1)、腫瘤分化(OR＝0.70，95%CI＝0.44～1.10，P＝0.121)有顯著相關性，與腫瘤大小無相關性(OR＝1.20，95%CI＝0.76～1.90，P＝0.442)。在GOLPH3與淋巴結轉移、性別、年齡相關性分析中，觀察到顯著的異質性，為了明確異質性來源，按照樣本量大小、年齡界限進行亞組分析，亞組分析結果表明，樣本量≥100(OR＝0.25，95%CI＝0.14～0.43，P＜0.1)。樣本量＜100(OR＝3.90，95%CI＝2.42～6.30，P＜0.1)，GOPLH3表達與淋巴結轉移差異有統計學意義。GOLPH3的表達與性別相關具有高異質性，在按照樣本分層的亞組分析中得出結論，GOLPH3的高表達與性別無關(OR＝1.112，95%CI＝0.777～1.592，P＝0.561，I2＝0%)。年齡＝60(OR＝0.924，95CI＝0.599～1.426，P＝0.772)，年齡＝65(OR＝0.731，95%CI＝0.382～1.40，P＝0.345)，GOLPH3表達與性別和年齡差異無統計學意義。

圖2 GOLPH3表達與結直腸癌臨床病理特征關系研究的森林圖

2.2.3 敏感性分析和發表偏倚 為了檢查OS分析中合并HR的穩定性，我們進行了敏感性分析。結果表明，排除任何單獨的研究并不能改變總體結果，本分析所得出的結論是可靠的。我們使用Egger's分析來檢測發表偏倚，在該Meta分析中未觀察到任何發表偏倚，見圖3。

圖3 GOLPH3表達與OS關系的(A)偏倚及(B)敏感度分析圖

續圖3 GOLPH3表達與OS關系的(A)偏倚及(B)敏感度分析圖

3 討論

結直腸癌的發生是基因和環境相互作用后產生的結果，原癌基因的激活被認為是促發結直腸癌的關鍵機制。在惡性腫瘤的增生過程中，某些原癌基因的激活或抑癌基因的失活導致了腫瘤細胞中特定蛋白的異常表達[19]，因此，探索特定蛋白在腫瘤發生、發展過程中表達變化，對于腫瘤的診斷意義重大。

GOLPH3基因是一種分子量約為34 kD的高爾基體復合物相關蛋白，最初是通過高爾基體的蛋白質組學表征鑒定的，主要發揮蛋白質的轉運作用。是高爾基體中一種高度保守的蛋白質和磷脂酰肌醇-4單磷酸酯(PI4P)的效應物[20]。GOLPH3相對應的編碼基因位于第5p13號染色體，是腫瘤中一個頻繁擴增的區域[21-22]。在細胞分裂、線粒體質量和DNA損傷中起著重要的作用。另外，Scott等人還發現，GOLPH3激活了雷帕霉素的哺乳動物靶標mTOR途徑[23]。GOLPH3過表達時細胞內mTOR信號通路的兩個關鍵蛋白核糖體S6K蛋白激酶和蛋白激酶B明顯升高，PI3K/Akt/mTOR信號通路的異常活躍在腫瘤的發生、發展中起著重要的作用，所以GOLPH3對mTOR信號通路的調節作用尤為重要[5]。可增強表皮生長因子(EGF)，進一步加速蛋白合成，促進細胞分裂增生。這對于調節生長和細胞增生非常重要。

盡管我們努力進行全面而精確的Meta分析，但必須承認其存在局限性，所納入的研究均為回顧性研究，樣本量有限且只限于亞洲，可能導致潛在的選擇偏倚。其次，在納入的研究中使用了不同的GOLPH3表達臨界值，可能對結果也有一定影響。盡管存在一些不可避免的缺陷，但本Meta分析的結論還是有意義的。

綜上所述，GOLPH3的高表達與結直腸癌組織臨床分期、腫瘤分化、淋巴結轉移密切相關，可能促進結直腸細胞的癌變及癌細胞的轉移。因此我們推測，GOLPH3有可能成為預測臨床中結直腸癌早期癌變的根據。