滅蠅胺和啶蟲脒對(duì)豇豆?fàn)I養(yǎng)品質(zhì)的影響

陳 楓，符篤韓，王 萌，黃少華，章玉蘋

（1.安徽省化工研究院，安徽合肥230041；2.海南大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，海南海口570228；3.農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估實(shí)驗(yàn)室（海口），海南海口570228；4.廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所/廣東省植物保護(hù)新技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東廣州510640）

豇豆（vigna unguiculata.）主要分布于我國(guó)華南地區(qū)的福建、廣東、廣西、海南和云南省。豇豆含有廉價(jià)的植物蛋白、植物化學(xué)抗氧化劑和其他營(yíng)養(yǎng)成分，因此不僅可作蔬菜食品，而且對(duì)人類健康特別有益，例如降低血壓和動(dòng)脈粥樣硬化，清除自由基并促進(jìn)心血管健康。

在豇豆生長(zhǎng)過程中，可能會(huì)受到昆蟲和疾病侵害，例如細(xì)菌性疫病、葉銹病、花薊馬、根腐病、黑葉霉菌和病毒病等。為了防治病害發(fā)生，在豇豆上施用各種農(nóng)藥，但是，施用農(nóng)藥會(huì)對(duì)農(nóng)產(chǎn)品營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)造成一定的影響。Watanabe等發(fā)現(xiàn)在番茄上施用氟啶脲和百菌清會(huì)減少番茄的糖度，而番茄微量元素中的鉀和鎂略微增加。Egbekunle等研究發(fā)現(xiàn)，秋葵內(nèi)的礦物質(zhì)與所施用的殺蟲劑有著緊密的關(guān)系，其中植物殺蟲劑比化學(xué)合成的藥物作用更好。高效氯氰菊酯和甲胺磷對(duì)小白菜的維生素C、可溶性蛋白和葡萄糖含量提升都有一定促進(jìn)作用，并且隨用藥的濃度變化，小白菜的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)也會(huì)發(fā)生變化。大量的研究表明，農(nóng)藥會(huì)對(duì)農(nóng)產(chǎn)品營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)造成一定的影響，如果濫用農(nóng)藥會(huì)造成嚴(yán)重紅葉谷，例如在海南2010年和2013年發(fā)生的大規(guī)模豇豆污染事件；同時(shí)對(duì)豇豆的品質(zhì)也會(huì)造成很大的影響。

“2017年全國(guó)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估專項(xiàng)報(bào)告”中報(bào)道，滅蠅胺和啶蟲脒在豇豆上使用的范圍最廣，檢出頻率最高，因此選用這兩種農(nóng)藥進(jìn)行試驗(yàn)。探究滅蠅胺和啶蟲脒單獨(dú)施用和混合施用對(duì)豇豆?fàn)I養(yǎng)品質(zhì)的影響，并研究施藥次數(shù)對(duì)豇豆品質(zhì)的影響，從而為這兩種農(nóng)藥在豇豆上的合理施用提供理論依據(jù)，為蔬菜在施藥后品質(zhì)變化情況提供相關(guān)基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，同時(shí)，為兩種農(nóng)藥在蔬菜上的合理施用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

長(zhǎng)豇豆，無病蟲害，表面光滑無傷，無缺損，成熟度相近，當(dāng)日采摘，海南南繁種子基地有限公司。

1.2 儀器設(shè)備（表1）

1.3 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)于2018年在儋州市兩院基地進(jìn)行，依據(jù)“2017年全國(guó)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告”，全國(guó)范圍內(nèi)，滅蠅胺和啶蟲脒檢出率最高和已購買商品藥推薦噴施量，設(shè)噴施滅蠅胺、啶蟲脒、滅蠅胺和啶蟲脒混合施用和不施農(nóng)藥（噴清水）4個(gè)處理，分別命名為T1、T2、T3和CK處理，每個(gè)處理分別有噴施1、2、3次農(nóng)藥處理。將滅蠅胺、啶蟲脒、滅蠅胺、啶蟲脒（混合）和清水噴施（600倍稀釋液），施藥間隔為7 d，于最后一次施藥后5 d、7 d和14 d采樣，小區(qū)面積30 m，隨機(jī)排列，3次重復(fù)。

表1 主要儀器設(shè)備

1.4 品質(zhì)測(cè)定

取6只具塞試管，將維生素C、可溶性蛋白和還原糖的標(biāo)準(zhǔn)溶液分別稀釋為0μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、150μg/mL、200μg/mL、250μg/mL；0μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL、80μg/mL、100μg/mL和0 mg/mL、0.2 mg/mL、0.4 mg/mL、0.6 mg/mL、0.8 mg/mL、1.0 mg/mL、1.2 mg/mL含量的稀釋液；每個(gè)濃度3次重復(fù)，取均值，制得標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.4.1 可溶性固形物測(cè)定

將豇豆樣品（5±0.01）g用均質(zhì)機(jī)充分破碎，以4 000 r/min離心10 min；用蒸餾水校準(zhǔn)折射儀，調(diào)零；后用擦鏡紙或柔軟絨布將折光鏡面水擦凈，用滴管吸取少量樣品液加于折光儀的檢測(cè)鏡上，合上蓋板，注意防止氣泡產(chǎn)生，直接讀取刻度尺讀數(shù)即為固形物的百分含量，重復(fù)測(cè)定3次。

1.4.2 VC含量測(cè)定

參照于曉萍的吸收光譜曲線法。取少量樣品加入適量的水，用均質(zhì)機(jī)勻漿后以1 000 r/min離心10 min，上層清液即為被測(cè)液。根據(jù)VC含量與標(biāo)曲濃度范圍確定稀釋倍數(shù)。在267 nm處重復(fù)測(cè)定3次，用測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量。

1.4.3 可溶性蛋白測(cè)定

稱取少量豇豆樣品（1±0.01）g，加入5.00 mL水，冰浴上用均質(zhì)機(jī)充分破碎，轉(zhuǎn)移至離心管離心15 min（4℃），上清液即為所需可溶性蛋白質(zhì)提取液。取上清液1.00 mL，置于10.00 mL比色管中，后向比色管中加入配制好的考馬斯亮藍(lán)G-250溶液（5.00 mL），渦旋混勻，凈置2.00 min后，取少量混合液于比色皿測(cè)定吸光值，重復(fù)測(cè)定3次，波長(zhǎng)為595 nm。根據(jù)測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量。

1.4.4 還原糖測(cè)定

采用3,5-二硝基水楊酸比色法。取2.00 mL還原糖備用液和1.50 mL 3,5-二硝基水楊酸試劑于25.00 mL比色管中，充分渦旋混勻，沸水浴加熱5.00 min后，立即用冷水將其冷卻至常溫，用蒸餾水定容。用蒸餾水在540 nm波長(zhǎng)下，調(diào)零，測(cè)定待測(cè)液的吸光值。重復(fù)測(cè)定3次，以測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量。

1.4.5 粗纖維測(cè)定

參照周勇輝的酸堿洗滌法。取除雜后少量豇豆樣品（2±0.01）g放入烘箱內(nèi)，60℃～65℃干燥8 h，后將樣品粉碎，過60目篩。在坩堝中對(duì)粉碎的豇豆樣品進(jìn)行酸堿沖洗后，130℃烘2 h，冷卻后用電子天秤準(zhǔn)確稱量，編號(hào)M，將試驗(yàn)材料用馬弗爐在550℃下，灰化灼燒30 min，后取出稱重，編號(hào)M，粗纖維含量ω的計(jì)算公式：

式中：ω為粗纖維的含量，%；M為樣品的質(zhì)量，g；M為干燥后坩堝及樣品殘?jiān)馁|(zhì)量，g；M為灰化后坩堝及樣品殘?jiān)馁|(zhì)量，g。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，每個(gè)指標(biāo)測(cè)定重復(fù)3次，取平均值。采用新復(fù)極差法對(duì)營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)指標(biāo)進(jìn)行差異性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作

按1.4方法，系列稀釋標(biāo)準(zhǔn)溶液后，測(cè)得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程如表2所示。由表2可知，豇豆品質(zhì)指標(biāo)維生素C、可溶性蛋白和還原糖在對(duì)應(yīng)的濃度范圍內(nèi)，標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合程度高，相關(guān)系數(shù)均大于0.99，均可用于相關(guān)指標(biāo)的定量分析。

表2 豇豆維生素C、可溶性蛋白和還原糖標(biāo)準(zhǔn)曲線方程

2.2 三種施藥處理對(duì)豇豆品質(zhì)的影響

2.2.1 一次施藥處理后對(duì)豇豆品質(zhì)的影響

維生素C是生物體中重要的水溶性抗氧化劑，可保護(hù)其他底物免受氧化損傷。還原糖是一類具有還原性的糖，特別適用于消化道糖不耐受疾病患者。對(duì)豇豆進(jìn)行一次施藥處理后，于施藥后5 d、7 d和14 d采樣。測(cè)定5種主要的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)指標(biāo)，與未施藥（CK）組對(duì)比，5種主要營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)指標(biāo)變化如表3所示。由表3可以看出：T1、T2和T3處理與CK組相比，可溶性固形物、維生素C、可溶性蛋白、還原糖和粗纖維含量均無差異。這表明單施和混施滅蠅胺和啶蟲脒對(duì)豇豆5種主要的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)無影響，可混合施用。

表3 兩種農(nóng)藥處理后豇豆?fàn)I養(yǎng)品質(zhì)

表4 兩種農(nóng)藥處理后豇豆?fàn)I養(yǎng)品質(zhì)

2.2.2 二次施藥處理對(duì)豇豆品質(zhì)的影響

對(duì)豇豆進(jìn)行二次施藥處理后，測(cè)定5種主要的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)指標(biāo)變化，如表4所示。

由表4可以看出：施藥次數(shù)2次時(shí)，T1、T2和T3處理與CK組相比，可溶性固形物、維生素C、可溶性蛋白、還原糖和粗纖維含量也均無差異。這表明單施和混施滅蠅胺和啶蟲脒對(duì)豇豆5種主要的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)無影響，可混合施用，與一次施藥處理結(jié)果一致。

2.2.3 三次施藥處理對(duì)豇豆品質(zhì)的影響

對(duì)豇豆進(jìn)行3次施藥處理后，于施藥后5 d、7 d和14 d采樣。測(cè)定5種主要的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)指標(biāo)，與未施藥CK組對(duì)比，5種主要營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)指標(biāo)變化如表5所示。

表5 兩種農(nóng)藥處理后豇豆?fàn)I養(yǎng)品質(zhì)

由表5可以看出：施藥次數(shù)三次時(shí)，T1、T2和T3處理與CK組相比，可溶性固形物、維生素C、可溶性蛋白、還原糖和粗纖維含量也均無差異。這表明單施和混施滅蠅胺和啶蟲脒對(duì)豇豆5種主要的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)無影響，可混合施用，與一次和二次施藥處理結(jié)果一致。

2.3 施藥次數(shù)對(duì)豇豆?fàn)I養(yǎng)品質(zhì)的影響

2.3.1 可溶性固形物

對(duì)豇豆分別進(jìn)行1、2和3次施藥處理后，于施藥后5 d、7 d和14 d采樣。測(cè)定豇豆中可溶性固形物營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)指標(biāo)，可溶性固形物隨施藥次數(shù)變化如圖1。

圖1 可溶性固形物變化Fig.1 Changes of soluble solids

由圖1可知：豇豆中可溶性固形物在藥后5 d、7 d和14 d時(shí)，CK、T1、T2和T3組隨施藥次數(shù)增加，可溶性固形物均無差異，三天采樣測(cè)定的結(jié)果一致。這表明隨施藥次數(shù)、施藥量增加，對(duì)豇豆可溶性固形物含量無影響。

2.3.2 維生素C

對(duì)豇豆分別進(jìn)行1、2和3次施藥處理后，于施藥后5 d、7 d和14 d采樣。測(cè)定豇豆中維生素C營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)指標(biāo)，維生素C隨施藥次數(shù)變化差異如圖2。

圖2 維生素C變化Fig.2 Changes of Vitamin C

由圖2可知：豇豆中維生素C在藥后5 d、7 d和14 d時(shí)，CK、T1、T2和T3組隨施藥次數(shù)增加，維生素C均無差異，三天采樣測(cè)定的結(jié)果一致。這表明隨施藥次數(shù)、施藥量增加，對(duì)豇豆維生素C含量無影響。

2.3.3 可溶性蛋白

對(duì)豇豆分別進(jìn)行1、2和3次施藥處理后，于施藥后5 d、7 d和14 d采樣。測(cè)定豇豆中可溶性蛋白營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)指標(biāo)，可溶性蛋白隨施藥次數(shù)變化差異如圖3。

圖3 可溶性蛋白變化Fig.3 Changes of soluble protein

由圖3可知：豇豆中可溶性蛋白在藥后5 d、7 d和14 d時(shí)，CK、T1、T2和T3組隨施藥次數(shù)增加，可溶性蛋白均無差異，三天采樣測(cè)定的結(jié)果一致。這表明隨施藥次數(shù)、施藥量增加，對(duì)豇豆可溶性蛋白含量無影響。

2.3.4 還原糖

對(duì)豇豆分別進(jìn)行1、2和3次施藥處理后，于施藥后5 d、7 d和14 d采樣。測(cè)定豇豆中還原糖營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)指標(biāo)，還原糖隨施藥次數(shù)變化差異如圖4。

圖4 還原糖變化Fig.4 Changes of reducing sugar

由圖4可知：豇豆中還原糖在施藥后5 d、7 d和14 d時(shí)，CK、T1、T2和T3組隨施藥次數(shù)增加，還原糖均無差異，三天采樣測(cè)定的結(jié)果一致。這表明隨施藥次數(shù)、施藥量增加，對(duì)豇豆還原糖含量無影響。

2.3.5 粗纖維

對(duì)豇豆分別進(jìn)行1、2和3次施藥處理后，于施藥后5 d、7 d和14 d采樣。測(cè)定豇豆中粗纖維營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)指標(biāo)，粗纖維隨施藥次數(shù)變化差異如圖5。

圖5 粗纖維變化Fig.5 Changes of crude fiber

由圖5可知：豇豆中粗纖維在藥后5 d、7 d和14 d時(shí)，CK、T1、T2和T3組隨施藥次數(shù)增加，粗纖維均無差異，三天采樣測(cè)定的結(jié)果一致。這表明隨施藥次數(shù)、施藥量增加，對(duì)豇豆粗纖維含量無影響。

綜合以上可溶性固形物、維生素C、可溶性蛋白、還原糖和粗纖維隨施藥次數(shù)、施藥量增加，均無顯著變化，表明滅蠅胺和啶蟲脒對(duì)豇豆主要的5種營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)指標(biāo)無影響，可適當(dāng)增加施藥次數(shù)及施藥劑量以提高防效，與2.2的結(jié)論一致。

3 討論與結(jié)論

本研究發(fā)現(xiàn)，在比較不同施藥次數(shù)和不同采樣時(shí)間條件下，實(shí)驗(yàn)組豇豆的維生素C、可溶性蛋白、粗纖維、還原糖和可溶性固形物相較于對(duì)照組均未發(fā)生顯著變化，這與李曉華等研究噴藥對(duì)芹菜、花椰菜、小白菜、生菜營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的影響相悖。對(duì)四種蔬菜噴藥后，大棚和露地種植的花椰菜、小白菜的可溶性固形物、可溶性蛋白、脯氨酸和維生素C均顯著降低；芹菜、生菜的脯氨酸和維生素C顯著降低。研究結(jié)果與杜鵑等在研究施用多菌靈對(duì)番茄維生素C的影響也是不同的，原因可能是由于不同農(nóng)藥、不同蔬菜和試驗(yàn)期間氣候和溫濕度之間差異導(dǎo)致的。

研究表明，隨著農(nóng)藥濃度增加，導(dǎo)致豇豆酶防御系統(tǒng)受到破壞，從而使可溶性固形物和還原糖流失。Egbekunle等研究發(fā)現(xiàn)，隨著施用不同濃度的殺蟲劑，植物體內(nèi)果膠酶的活性受到不同的抑制，從而影響植物細(xì)胞膜通透性，導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)流失。唐紅楓等對(duì)小白菜噴施甲胺磷后發(fā)現(xiàn)，低濃度下有助于小白菜酶防御功能，高濃度下會(huì)造成活性氧防御功能下降。研究表明，噴施滅蠅胺和啶蟲脒未使得豇豆品質(zhì)發(fā)生顯著變化；隨著施藥次數(shù)增加，豇豆品質(zhì)也沒有出現(xiàn)顯著的影響，這可能是因?yàn)樗幬飳?duì)豇豆中的一些酶活性產(chǎn)生影響較小[27-30]。

綜上所述，滅蠅胺和啶蟲脒對(duì)豇豆的可溶性蛋白、粗纖維、維生素C、還原糖和可溶性固形物等營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)均無影響。