探討冷凝集素對血型鑒定和交叉配血的干擾及處理方法

張東陽，胡小娟

（河北省懷來縣醫院，河北 懷來）

0 引言

常規來講，血型鑒定的結果受到健康人群體內冷凝集素效價的影響極其微小，而依稀病理原因將會引起以內的冷凝集素效價出現增高，對交叉配血以及正反定型結果造成一定影響[1-5]。本次研究特收集本院檢驗科近十年時間所診治的100例冷凝集素增多患者，分析研究采用冷凝集素針對交叉配血以及血型鑒定處理方式與干擾因素，現內容如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本次研究特收集本院檢驗科近十年時間所診治的100例冷凝集素增多患者，男性60例，女性40例，年齡30～69歲，平均（52.3±6.2）歲，病程4周至2個月，平均（2.5±1.2）周。

1.2 方法和試劑

1.2.1 試劑選擇

長春博德生物技術有限公司提供的不規則抗體篩選試劑、Rh血型鑒定試劑、標準紅細胞以及ABO血型抗血清試劑；江蘇力博生物醫藥技術股份有限公司提供的微柱凝膠法配血試劑。

1.2.2 方法

對100例患者進行取樣，抽取3～4 mL靜脈血，并放置37 ℃環境中行離心10 min獲得紅細胞，處理紅細胞，溫度控制在37 ℃，將其放置在0.9%生理鹽水內，隨后反復清洗3次。針對紅細胞實施先吸收放散處理，隨后紅細胞還未呈現凝聚狀態下立即實施下一步的操作，也就是交叉配血實驗以及血型鑒定實驗，以此來保證整個實驗的準確性。

在處理血清的過程中，采用二巰基乙醇，把血清從干燥管內取出，隨后再提取與之等量的用二巰基乙醇，將血清和用二巰基乙醇混勻，隨后將混合物質小心放置在溫度為37 ℃的水中進行水浴，靜待40 min后再將標本取出，并實施交叉配血、抗體篩查以及正反定型等一系列工作。處理完成后，把等量自身血清和未凝集紅細胞混合，放在溫度為4 ℃環境中進行冷藏吸收，可反復操作，固定時間內將血清標準取出，實施交叉配血、抗體篩查以及ABO反定型等相關工作。針對血型正反定型不一致樣本無需開展血清學試驗檢測，經相關數據后，ABO正反定型保持一致，RhD鑒定也為陽性。

針對O型成人紅細胞呈凝血以后，和測定冷凝集素效價未稀釋者的血清開展效價滴定測驗，做好記錄，從而判定冷凝集素特異性。

1.3 觀察指標

想要確保冷凝集素效價處于正常值范圍中，若冷凝集素效價偏高，則會干擾交叉配血與血型測定結果，出現不同的血型混亂。常規狀態下，采用血清測定凝集以及未經過處理的紅細胞，隨后對冷凝集素效價采用凝集進行判定，可作為鑒別冷凝集素特異性的指標。

2 結果

針對正反定型以及交叉配血觀察發現，檢驗科收治的冷凝集素增多的患者100例中，處理前所有患者的血型正反定型最終結果全部一致，正定型以及反定型分別為AB型和O型。經過處理后，患者本身的血型和正反定型的最終結果完全相同。

開展交叉配血以及血型鑒定處理后，在患者的血清內未出現任何不規則抗體，與此同時冷凝集素效價對正反定型以及交叉配血最終結果存在影響，因此冷凝集素效價必須處于正常水平線上，不宜過高。當冷凝集素效價發生增多的時候，無法對患者血型作出準確測定，引起不良事件的發生，本研究結果顯示，針對冷凝集素實施處理后正反定型最終結果未發生異常，交叉配血未出現不良事件，如表1所示為型正反定型結果。

表1 血型正反定型結果

3 討論

常規情況下，健康者自身體內的紅細胞會呈現兩面凹的圓餅狀，而正常情況下的紅細胞則不會發生凝集，但是當受到外界環境改變的刺激以后，則會產生一定的異常表現，例如：倘若溫度下降的時候，其溫度降至紅細胞無法承受的范圍當中，則會產生凝集跡象，當冷凝集素效價發生增加時，遠遠超越正常的范疇，最終形成高效價的冷凝集素，以上現象將會干擾血型測定，無法開展進一步的研究[6]。有相關研究人員指出，當冷凝集素效價＜16時，在37 ℃室溫下血型血清學實驗是不會受到太大的影響，為生理性冷凝集素的；處理病理狀態下冷凝集素由于一些病理原因所致促使其效價增加，倘若反應溫度以及效價升高均會促使交叉配血、抗體效價以及Rh血型鑒定或者是ABO血型鑒定受阻。所以，針對臨床中進行血型鑒定時，出現懷疑又因為冷凝集素所致且正反定型不符，則將標本放置37 ℃生理鹽水或者是37 ℃水浴中反復洗滌3次[7-8]。

IgM抗體是5個免疫球蛋白單體經過二硫鍵連接的一個大分子，二巰基乙醇屬于巰基化合物，能夠對IgM抗體滅活，斷裂亞單位之間二硫鍵，引起IgM大分子的降解發生失效。并且，IS,G抗體間二硫鍵還可被巰基化合物所還原，打開連接重鏈二硫鍵，讓IgG抗體2個Fab片段之間存在極大舒展性。冷凝集素屬于一個分子量較大的完全抗體，可將紅細胞直接進行凝集。有相關研究人員指出，人體血清內的抗-AB抗體、抗-B和抗-A巨大部分屬于IgM性質抗體，也有一部分屬于IgG抗體。健康獻血者內，與IgG3和4相對比IgG1和2顯著偏多。同時，還有相關學者指出，針對血清中IgG和IgM采用二巰基乙醇以及唾液進行處理，針對高效價IgM采用二巰基乙醇取出不徹底，但是處理后不會影響IgG效價。

本研究結果指出，冷凝集素效價對正反定型以及交叉配血最終結果存在影響，針對冷凝集素實施處理后正反定型最終結果未發生異常，交叉配血未出現不良事件。可見，在實施研究時需要嚴格把控溫度，禁止出現驟然降低或者是升高，從而影響冷凝集素效價，并且還要注意可控環境因素影響，防止失誤對實驗結果造成影響。

總而言之，嚴格按照標準流程實施操作，防止紅細胞濃度與血清出錯，仔細實施稀釋過程，將誤差降至最小。嚴格遵循交叉配血原則，防止出現免疫排斥或是凝血排斥事件，保證輸血安全性，緩解患者痛苦。