合并巨細胞病毒感染對小兒乙型肝炎疫苗初次免疫應(yīng)答的影響

葉明 徐璐 趙子華 段雙霞

巨細胞病毒(HCMV)易進入母體導致新生兒出現(xiàn)先天性感染，使胎兒出現(xiàn)發(fā)育遲緩現(xiàn)象，出生后免疫功能降低，持續(xù)感染發(fā)生可能性加大[1]。我國是HCMV感染率較高的國家，而新生兒免疫功能低下，對病毒抵抗力小，被感染時身體免疫機能會遭受嚴重破壞[2-3]。乙肝疫苗在1992年成為我國計劃免疫疫苗之一，新生兒出生后24 h內(nèi)需要接種乙肝疫苗[4]。臨床上關(guān)于HCMV感染對乙肝疫苗效果的影響研究結(jié)果較少，本研究通過對比有HCMV感染和無HCMV感染的新生兒初次免疫應(yīng)答情況，了解HCMV的可能影響機制。

資料與方法

一、一般資料

選取新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院2017年1月至2018年1月148例足月出生且出生后24 h內(nèi)完成接種乙肝疫苗的新生兒(未接種第二針乙肝疫苗)，其中納入確診為HCMV感染的患兒74例計為觀察組，另選未被HCMV感染的新生兒74例計為對照組。觀察組男、女分別為42、32例，日齡20～34(25.52±3.09)d；對照組男、女分別為41、33例，日齡21～35(25.57±3.05)d，兩組資料基本相當(P>0.05)。本研究經(jīng)院醫(yī)學倫理委員會通過。納入標準：①日齡20～35 d；②父母乙肝指標均為陰性，抗HBsAb滴度≥10 mIU/mL；③家長知情同意。排除標準：①其他肝炎病毒感染者；②其他病原感染(風疹病毒、EB病毒及弓形體)及遺傳代謝疾病；③先天性畸形；④存在自身免疫性肝炎。

二、研究方法

(1)初次免疫后檢測兩組血清乙肝表面抗體(抗-HBs)、白細胞介素(IL)-2、IL-6水平，早上空腹抽取靜脈血2 mL。ELISA檢測血清抗-HBs、IL-2、IL-6水平。

(2)記錄兩組對乙肝疫苗初次免疫應(yīng)答情況 用CMIA法檢測抗-HBs，兒童HBsAb，HBsAb陰性者檢測HBV-DNA。正常應(yīng)答：抗-HBs>100 mIU/mL，低應(yīng)答：抗-HBs在10～99 mIU/mL，無應(yīng)答：抗-HBs<9 mIU/mL且HBsAb、HBV-DNA均為陰性。

(3)檢測兩組細胞免疫指標水平，取入選對象靜脈血1 mL，采用流式細胞儀上機檢驗CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平。

三、統(tǒng)計學分析

結(jié) 果

一、兩組血清抗-HBs、IL-2、IL-6水平比較

觀察組抗-HBs、IL-2水平低于對照組，IL-6水平高于對照組(P<0.05)，見表1。

表1 兩組抗-HBs、IL-2、IL-6水平比較(±s)

二、兩組乙肝疫苗初次免疫應(yīng)答比較

觀察組新生兒對乙肝疫苗初次免疫保護應(yīng)答率67.57%低于對照組85.14%(P<0.05)，見表2。

表2 兩組乙肝疫苗初次免疫應(yīng)答比較[n(%)]

三、兩組細胞免疫指標比較

觀察組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平低于對照組(P<0.05)，CD8+水平高于對照組(P<0.05)，見表3。

表3 兩組細胞免疫指標比較(%，±s)

討 論

嬰兒感染HCMV多為先天性感染，新生兒免疫功能低下，對病毒的抵抗力較小，病毒進入體內(nèi)后易造成細胞免疫功能低下，進而會對機體免疫功能造成損害[5-6]。我國乙型肝炎發(fā)病率較高，乙肝病毒攜帶者多，接種乙肝疫苗后機體會出現(xiàn)免疫應(yīng)答情況，可有效預防和控制乙肝病毒的傳播[7]。HCMV感染對乙肝疫苗效果的影響目前研究結(jié)果較少，為進一步了解HCMV對乙肝疫苗效果的影響，本研究對148例新生兒進行觀察，記錄新生兒初次免疫應(yīng)答情況，分析其HCMV可能影響機制，現(xiàn)已經(jīng)取得有效成果。

本研究中，觀察組血清IL-2、抗-HBs水平比對照組低，血清IL-6水平比對照組高，觀察組新生兒對乙肝疫苗初次免疫保護應(yīng)答率比對照組低，表明被巨細胞病毒感染的患者初次免疫應(yīng)答率低于未被病毒感染的患者。接種乙肝疫苗后，乙肝病毒表面抗原進入機體，機體免疫功能發(fā)生作用產(chǎn)生特異性抗體，當乙肝病毒再次進入機體，特異性抗體與外來抗原反應(yīng)產(chǎn)生免疫反應(yīng)[8-9]，因此，乙肝疫苗作用的激發(fā)，特異性抗體的出現(xiàn)是以機體自身免疫功能發(fā)生作用為前提的[10]。HCMV可以感染機體多個器官和組織中的間質(zhì)細胞、實質(zhì)細胞和血細胞，例如肝臟中的細胞，肝臟不止有內(nèi)分泌、消化器官，還有免疫器官，機體被HCMV感染后，免疫功能下降，IL-6過度分泌，IL-2下降，促進免疫細胞再生和肝功能修復，機體免疫調(diào)節(jié)功能紊亂[11-12]。當被HCMV感染的患兒接種乙肝疫苗時，免疫功能低下的機體對乙肝疫苗的免疫反應(yīng)明顯下降，分泌血清抗-HBs水平降低，特異性抗體數(shù)量不夠，初次免疫應(yīng)答強度變?nèi)酰庖邞?yīng)答率變低[13]。韓啟軍等[14]對小鼠進行實驗的研究結(jié)果與本研究結(jié)果相似。

本研究中，觀察組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比對照組低，而CD8+水平高于對照組，表明受HCMV感染的患兒相對于未被感染的患兒而言其免疫功能更加低下。CD4+作為一種分泌性細胞因子，具有趨化、活化淋巴細胞功能和炎癥細胞的作用。CD8+可抑制T細胞增殖和B細胞抗體免疫反應(yīng)，CD4+/CD8+降低是免疫功能破壞程度的重要指標[15]。HCMV感染導致細胞功能和結(jié)構(gòu)紊亂，此時細胞表面抗體識別抗原和處理抗原能力減弱，新生兒體內(nèi)對病毒具有清除能力的細胞增殖速度及免疫功能降低[16-17]。溫麗等[18]對103例巨細胞病毒感染兒童的研究結(jié)果與本研究結(jié)果相似。

綜上，合并巨細胞病毒感染會抑制新生兒機體免疫功能，使機體對乙肝疫苗初次免疫時抗-HBs水平、IL-2、IL-6水平降低，免疫應(yīng)答率降低，應(yīng)答強度減弱。