重組豬GM-CSF提高非洲豬瘟病毒在骨髓細胞中的產量

岳慧賢,張艷艷,陳 騰,楊金金,楊金梅,郭曉盼,張 菲,張守峰,王 穎,韓 栒,扈榮良

(軍事科學院 軍事醫學研究院 軍事獸醫研究所,吉林 長春 130122)

非洲豬瘟(African swine fever,ASF)是由非洲豬瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的家豬和野豬的烈性傳染病。2018年8月初，非洲豬瘟疫情傳入我國并迅速傳播，防控形勢十分嚴峻。由于該病給我國的養豬業造成了巨大的經濟損失，在我國目前客觀條件下，開發安全可靠的疫苗已成為防控的關鍵。研究中的非洲豬瘟疫苗主要包括滅活疫苗、減毒活疫苗、亞單位疫苗等[1]，其中減毒活疫苗是目前效果最好的候選疫苗。在減毒活疫苗生產工藝研究中，減毒株的培養及病毒滴度的提高是其中關鍵。

據報道，盡管重組ASFV可在某些傳代細胞系復制，但均無法進行連續穩定傳代和高滴度培養增殖。原代肺泡巨噬細胞和骨髓細胞是目前用來分離和培養ASFV的主要培養介質[1,2]。我們在原代細胞的分離培養過程中發現，即使是SPF豬，因呼吸系統處于開放狀態，其肺泡巨噬細胞的微生物污染情況仍較為嚴重，存在如豬4型腺病毒、支原體、圓環病毒等污染。相對而言，骨髓處于生理封閉狀態，細胞病原體污染輕微，是目前疫苗生產中培養ASFV的理想選擇，但以未分化骨髓細胞培養ASFV時，病毒滴度較低，導致實際免疫成本過高。由于ASFV對髓系來源的單核-巨噬細胞(單核細胞、巨噬細胞以及樹突狀細胞)易感性最強[3]，因而，本研究擬誘導骨髓細胞分化為巨噬細胞或樹突狀細胞，以提高病毒滴度，優化疫苗生產工藝。……