表達豬圓環病毒2型Cap蛋白重組耐熱新城疫病毒的構建及免疫原性

李 麗，趙 康，張 媛，王紅琳，羅青平，邵華斌,2，潘茲書，溫國元,2*

(1.湖北省農業科學院 畜牧獸醫研究所，湖北 武漢 430064；2.農業部畜禽細菌病防治制劑創制重點實驗室，湖北 武漢 430064；3.武漢大學 生命科學學院，湖北 武漢 430074)

豬圓環病毒2型(porcine circovirus type 2，PCV2)屬于圓環病毒科，為單股負鏈閉合環狀DNA病毒，是目前所發現最小的動物病毒[1]。PCV2是引起斷奶仔豬多系統衰竭綜合征(postweaning multisystemic wasting syndrome，PMWS)的重要病原[2-4]，發生PMWS疾病的豬群死亡率達5%～30%[5]。PCV2的感染會導致豬群免疫力下降，造成嚴重的免疫抑制。其和細小病毒、豬肺炎支原體、豬呼吸與繁殖障礙綜合征病毒等病原共同感染使豬群產生圓環病毒相關疾病[6-8]，給全球養豬業造成了巨大的經濟損失[ 2,9-10]。PCV2在PK-15細胞上增殖滴度較低，且不引起細胞病變，給常規滅活疫苗的研發與生產帶來很大的困難[11]，因此，PCV2基因工程疫苗的研發是當前研究的熱點之一。

PCV2基因組全長約1.7 kb，有2個主要的功能性開放閱讀框(opening reading frame,ORF)。ORF1編碼2個滾環復制相關蛋白(Rep和Rep′)[12]，ORF2編碼大小約為28 kDa的PCV2 衣殼蛋白Cap[13]。研究表明Cap蛋白是PCV2的主要免疫原蛋白，包含高度保守的抗原表位，能刺激機體產生PCV2特異性中和抗體[7-8]。Cap蛋白是用于研發PCV2基因工程疫苗的首選蛋白[14]。

新城疫病毒(Newcastle disease virus，NDV)屬于副黏病毒科腮腺炎病毒屬，為單股負鏈RNA病毒。隨著反向遺傳操作系統的發展，重組NDV已成為一類研究深入且應用前景廣闊的基因工程載體疫苗。目前已經有多種病毒的保護性抗原基因在NDV中得到高效表達[15-17]。在哺乳動物體內存在的免疫力和母源抗體不會影響NDV的復制，NDV在許多動物模型中具有較高的安全性[18]。……