高原肉雞肺動脈平滑肌細胞的分離、鑒定及低氧對其增殖的影響

常振宇,董海龍 ,李家奎,吳慶俠*

(1.西藏農牧學院 動物科學學院，西藏 林芝860000;2.華中農業大學 動物醫學院，湖北 武漢430070)

肉雞肺動脈高壓綜合征 ( pulmonary arterial hypertension，PAH) 是由多病因所致的一種以肺動脈壓力增高為特點的疾病或綜合征，主要通過血管收縮、肺血管重構來誘發右心衰竭，直至腹水死亡[1]。肺動脈平滑肌細胞(PASMCs)位于肺動脈血管內皮細胞下層，參與多種病理反應的發生發展過程，如高原缺氧、肉雞腹水肺動脈高壓綜合征、自由基損傷、動脈粥樣硬化等[2-4]。另外，肉雞肺動脈血管內膜及中膜PASMCs的增殖、肥大可以誘導低氧性肺血管收縮和血管重構，且肉雞PAH綜合征形成過程中具有這一特征，國內外學者研究發現低氧應激在PAH血管重構中發揮關鍵作用[5-8]。因此探討研究肺血管重構機制的關鍵環節就是體外培養PASMCs，因此需要建立PASMCs培養方法。雖然國內外關于人、鼠和豬等哺乳動物的PASMCs培養方法已建立培養體系，但目前有關高原缺氧條件下肉雞PASMCs的體外培養的研究少有報道[9-11]。肉雞PASMCs培養方法主要有組織貼塊法和酶消化法兩種，但酶消化法步驟繁瑣，酶消化時間難掌控，所需膠原酶價格昂貴不經濟，所需成本較高[12-15]。近年來的研究開始以PASMCs作為細胞模型來探討PAH的分子機制[16]。本試驗以高原肉雞肺主動脈組織作為來源，通過N2誘導低氧條件下培養，并采用組織貼塊培養法更為穩定可靠，為在體外細胞培養條件下研究低氧對PASMCs 增殖的機制提供參考，并為研究缺氧--肺血管重構--PAH發病機制及其他相關研究提供一定的科學依據。……