江西科技師范大學楓林校區大型真菌調查鑒別

曾青青 周 盈 趙 寬

江西科技師范大學楓林校區大型真菌調查鑒別

曾青青 周 盈 趙 寬*

（江西科技師范大學生命科學學院，江西 南昌 330013）

對江西科技師范大學楓林校區的大型真菌多樣性進行調查，共采集標本83份，利用顯微特征觀察和分子系統學研究等方法，并結合查閱相關菌物分類資料和彩圖圖鑒，確認該區大型真菌8目21科26屬共32種。

楓林校區；大型真菌；物種多樣性；調查鑒別

大型真菌通常是指能產生肉眼可見徒手可采的大型子實體的一類真菌，也稱蕈菌，主要為擔子菌，部分為子囊菌[1]。其種類繁多，多生于森林、空曠山地和草原，是生態系統中不可或缺的部分，也是食用生物資源的重要組成。迄今，中國報道大型真菌1 662種，其中食用菌逾千種，藥用菌690多種，毒菌480種[2]。

江西地處中亞熱帶溫暖濕潤氣候區，受東亞季風影響，水熱充沛，森林覆蓋率高，氣候溫暖潮濕。又因其地質歷史悠久且未直接受到第四紀大陸冰川的明顯影響，孕育和保存了豐富的生物多樣性和某些特有現象[3, 4]。前人對江西省大型真菌資源多樣性的研究報道有26目73科217屬共884種[5]，為本項目提供了豐富資料。

江西科技師范大學楓林校區位于江西省南昌市西北面，鄰近梅嶺國家森林公園。校園生態環境優越，植被類型多樣，校園的樹林、草地、路邊分布著豐富的大型真菌。作者近兩年在校園開展大型真菌資源多樣性調查研究，以期尋找具有潛在應用價值的物種。

1 材料與方法

1.1 標本采集

在校區內采集大型真菌，拍照、編號。拍照時盡量保持大型真菌的完整性，包括菌蓋表面的附屬物、菌環、菌托等，將采集的子實體帶回實驗室，干制標本和分子樣本，儲藏于江西科技師范大學楓林校區生命科學學院真菌多樣性研究室。

1.2 形態研究

（1）宏觀特征觀察。采集標本時，記錄采集時間、地點及子實體各部位結構特征，詳細記載其生境（如林內地生、松果生、腐木生等）和習性（如單發生、成群發生、簇生等）[6]。參考相關資料對其歸類、整理和鑒定。真菌中文名主要引自《中國真菌志》和《中國真菌總匯》。

（2）顯微特征觀察。顯微鏡下觀察擔孢子、擔子、菌蓋表皮及囊狀體的形態和大小，用以輔助物種鑒定。

1.3 分子系統學研究

（1）DNA提取。應用上海生物工程有限公司Ezup柱式植物基因組DNA抽提試劑盒。

（2）PCR擴增。根據查閱文獻資料和預實驗結果[7, 8]，本研究最終選取的基因片段為核糖體內轉錄間隔區基因（ITS）。擴增體系總體積為25 μL，包括：10×Buffer 2.5 μL，正反向引物各0.5 μL，模板DNA 1 μL，Taq酶0.5 μL，ddH2O 20 μL。擴增反應程序的熱循環參數：94 ℃預變性3 min，然后進入連續35個循環，94 ℃變性40 s，50 ℃退火40 s，72 ℃延伸50 s，循環結束后于72 ℃延伸8 min，終止溫度為10 ℃。

（3）PCR產物測序與對比。PCR擴增產物送上海生工生物工程技術服務有限公司進行測序。

測序所得序列采用BioEdit軟件核對堿基是否正確讀取，檢查序列峰形圖，應用NCBI的在線軟件blast，與 Genbank中數據進行同源性比較。

2 結果與分析

2.1 楓林校區大型真菌的科、屬統計

共鑒定出大型真菌8目26屬32種[9-23]，詳見表1。其中，有13科僅含1種，占總科數的62%；含2～3種的7科，占33%；含4種的有1科。鑒定出的21個科中，種數最豐富的是白蘑科，其次是鬼傘科，再次是雞油菌科、耳匙菌科、小脆柄菇科和蘑菇科。調查的26屬中，以單種屬的較多，共22個，占總屬數的85%；含有2個種的屬有4個，占總屬數的15%。

2.2 楓林校區大型真菌名錄

2019—2020年間，在校區內共采集到大型真菌83份。通過顯微觀察和分子系統學研究，并查閱相關菌物分類資料和彩圖圖鑒，共鑒定出大型真菌32種（表2），分別隸屬于21科26屬。調查結果顯示，楓林校區大型真菌物種豐富，有進一步研究的價值。

2.3 大型真菌多樣性資源分析

此次調查的結果反映出江西科技師范大學楓林校區內存在著豐富的大型真菌資源，其中食用菌類有16種，部分常見的物種如下：長根小奧德蘑(Relh ex Fr.) Singer、馬勃Scop.、花臉香蘑(Schum.: Fr.) Singer、裂褶菌Fr.、南方樹舌靈芝(Fr.) Pat.、松果齒菌Gray、芳香喇叭菌(Schw.) Fr.、小雞油菌P. H. Petersen、耳匙菌Gray、木耳(L.) G. W. Martin等。這些食用菌中，以長根小奧德蘑和木耳的食用價值最大；而馬勃、漏斗多孔菌、褶紋鬼傘、堅殼田頭菇、松果齒菌和耳匙菌是具有較好藥理作用的藥用菌。另外，尖蛋黃菌(Clem.) Singer、黃蓋脆柄菇Fr.、白黃小脆柄菇(Fr.) A. H. Smith、灰褐小脆柄菇(Schaeff.) Maire、粗鱗絲蓋傘(Fr.) Gillet.、赭白畸孢孔菌(Berk.) Pilát、大青褶傘(G. Mey.) Massee、肥腳白鬼傘(Sowerby) Pat. 等具有較強毒性，目前僅有生態的功能，有無開發潛力尚待挖掘。

表1 江西科技師范大學楓林校區大型真菌科、屬、種鑒別統計

表2 江西科技師范大學楓林校區大型真菌名錄

注：☆表示食用菌；●表示毒菌；★表示食用價值不明。

3 小 結

大型真菌不僅是生態系統不可或缺的成員，也是食用生物資源的重要組成部分[24]。開展資源調查對物種多樣性分析、資源開發利用等具有重要意義[25]。通過對江西科技師范大學楓林校區大型真菌資源的調查，基本明確了校內大型真菌的分布情況，為開展食用菌種質資源收集、真菌化學等下游研究工作及就近獲取科研材料提供了便利，同時對于提高校內師生的生物多樣性認知、預防誤食毒菇具有參考價值。

[1] 李萍, 楊雪晴, 肖海燕, 等. 楚雄西舍路大型真菌多樣性研究[J]. 安徽農業科學, 2019, 47(7): 83-86.

[2] Wu F, Zhou L W, Yang Z L, et al. Resource diversity of Chinese macrofungi: edible, medicinal and poisonous species[J]. Fungal Diversity, 2019, 98(1): 1-76.

[3] 謝國文. 江西木本植物區系成分及其特征的研究[J]. 植物研究, 1991(1): 91-99.

[4] 賴書紳. 江西野生植物資源簡記[J]. 植物雜志, 1994(4): 14-15.

[5] 張俊波. 江西部分地區大型真菌資源調查與系統學研究[D]. 南昌: 江西農業大學, 2018.

[6] 王雪穎, 曹若凡, 樊鵬振, 等. 白云山國家森林公園大型真菌物種多樣性與環境的關系[J]. 河南農業大學學報, 2018, 52(4): 604-610.

[7] White T J, Bruns T, Lee S, et al. Amplification and direct sequencing of fungal ribosomal RNA genes for phylogenetics [J]. PCR protocols: a guide to methods and applications, 1990, 18(1): 315-322.

[8] 張俊波, 宋海燕, 蘇明聲, 等. 江西大型真菌系統分類學研究: 側耳屬及栽培馴化[J]. 江西農業大學學報, 2019, 41(3): 590-600.

[9] Wahlert G A, Chiarini F, Bohs L. Phylogeny of the carolinense clade of solanum (Solanaceae) inferred from nuclear and plastid DNA sequences [J]. Systematic Botany, 2006, 39 (4): 1208-1216.

[10] Larkin M A, Blackshields G, Brown N P, et al. Clustal w and clustal x version 2.0[J]. Bioinformatics, 2007, 23 (21): 2947-2948.

[11] Brykczynskau A U, Tzika A C, Rodriguez I, et al. Contrasted evolution of the vomeronasal receptor repertoires in mammals and squamate reptiles [J]. Genome Biology and Evolution, 2013, 5(2): 389-401.

[12] 胡先運, 李香莉, 張勇民, 等. 花臉香蘑(Fr.) Singer 的研究進展[J]. 中國食用菌, 2006(5): 20-22.

[13] 吳興亮, 李泰輝, 宋斌. 廣西花坪國家級自然保護區大型真菌資源及生態分布[J]. 菌物學報, 2009, 28(4): 528-534.

[14] 王月. 東北地區小脆柄菇屬真菌分類學研究[D]. 長春:吉林農業大學, 2014.

[15] 陳言柳, 裴男才, 張林平, 等. 中國小蘑菇屬三新記錄種[J]. 江西農業大學學報, 2019, 41(4): 708-714.

[16] 李宇. 中國蘑菇屬新種和新記錄種[J]. 云南植物研究, 1990(2): 154-160.

[17] 陳言柳, 劉萌, 張林平, 等. 中國乳菇屬真菌一新記錄種——思茅乳菇[J]. 河南農業科學, 2019, 48(1): 105-109, 152.

[18] 王鋒尖, 李為民, 周向宇, 等. 中國田頭菇屬一新記錄種——堅實田頭菇[J]. 河南農業大學學報, 2018, 52(6): 951-955.

[19] 魏禮, 趙瑞琳. 銅壁關自然保護區大型真菌多樣性研究[J]. 現代農業科技, 2015(10): 170-175.

[20] 王鐵柱, 梁晗, 圖力古爾. 長白山不同植被帶大型真菌多樣性調查名錄Ⅱ亞高山岳樺林帶[J]. 菌物研究, 2010, 8(2): 66-70．

[21] 圖力古爾,包海鷹,李玉.中國毒蘑菇名錄[J].菌物學報, 2014, 33(3): 517-548.

[22] 戴玉成, 周麗偉, 楊祝良, 等. 中國食用菌名錄[J]. 菌物學報, 2010, 29(1): 1-21.

[23] Wang F J , Qi L L , Zhou X Y . A new species and a new record of(Agaricaceae, Agaricales) from China [J]. Phytotaxa 371 (4): 241-250.

[24] 高曉燁, 方潔鈺, 溫怡琳, 等. 江西省大型真菌多樣性研究現狀[J]. 食藥用菌, 2020, 28(03): 166-169.

[25] 陳光富. 滇西北玉龍雪山7種常見野生食用真菌資源調查[J]. 園藝與種苗, 2019, 39(6): 13-16.

S718.81

B

2095-0934（2021）03-208-04

江西省自然科學基金項目（20202BABL215014）；江西科技師范大學“大學生創新創業訓練項目”（Nos. 202011318018）

曾青青（1995—），女，本科生，E-mail：z15207969213@163.com。

趙寬（1989—），男，博士，副教授，研究方向：大型食藥用真菌的物多樣性與資源保護。E-mail：key1989@126.com。