單細胞水平檢測前列腺液CD64與NIH-CPSI評分聯合應用在診療慢性前列腺炎患者中的價值

劉小林，馬麗萍，周 彥

(連云港市第二人民醫院，江蘇 連云港 222023)

慢性前列腺炎(chronic prostatitis，CP)是男性常見的疾病之一，美國國立衛生院報道其在美國的發病率最高達到16%,2009年的流行病調查報告顯示目前國內慢性前列腺炎患病率約為4.5%。CP患病率高、治愈率低、復發率高等特點，對患者生活質量產生較大的影響。盡管近年來，國內外的醫學專家進行了大量的研究，并制定了新的分類標準，但是對其發病原因、診療規范仍未給出明確的答案[1-4]。NIH-CPSI評分指數表是一種實用的前列腺炎癥狀自測表，其操作方便，可以較有效、準確地反映患病程度。但是這種根據問答的評分表，受到患者自身對疾病的感知程度，文化背景以及接診醫生工作經驗的影響，對病情的正確判斷有一定影響且不能為病情提供定量指標[5]。筆者希望在NIH-CPSI基礎上結合一個比前列腺炎常規檢測更準確的定量結果，便于臨床診療。相關研究表明：健康體檢者外周血中中性粒細胞中CD64低表達，但是當機體發生感染時，其CD64表達迅速升高[4]?；谶@種原理，現將CD64與CPSI在慢性前列腺炎中的關系進行初步的研究，并將研究結果報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料：收集我院門診前列腺炎癥狀患者資料，根據共識指南推薦的標準[5]經本院泌尿科專業主任醫師結合細菌培養確診為慢性細菌性前列腺炎的患者中，隨機選取50例患者EPS作為試驗組，應用流式細胞儀檢測前列腺液中性粒細胞CD64表達，患者年齡20～60歲，平均為40歲。另外選擇20例健康體檢者作為對照組，平均年齡33歲，為了不耽誤患者治療，在檢測前列腺液常規及細菌培養的同時進行中性細胞CD64表達檢測。分別檢測其在治療1周后、治療4周后的前列腺液中性粒細胞CD64，同期進行CPSI評分測算。本次研究經過本院醫學倫理委員會同意。

1.2標本采集：按摩受試者前列腺，前列腺液均用有蓋的尖底無菌管收集，立即送檢。所有標本均按“二杯法”留取標本，前列腺按摩液用有蓋的尖底無菌管收集,立即送檢做細菌培養和流式細胞儀法定量計數CD64。樣本量要求最小不少于70 μl。

1.3方法：BD公司ABC(antibodies bound per cell)單個細胞抗原結合數量檢測法，應用QuantiBRITE PE標準微球在流式細胞儀上用于檢測單個細胞抗原結合數量(ABC)。用無菌的吸頭無菌操作吸取前列腺液50 μl加入TRU-COUNT管與20 μl CD64PE/CD45PerCP抗體(美國BD公司)混勻，避光室溫放置20 min后加1×PBS 0.43 ml，避光室溫放置0.5 h，上流式細胞儀(BD公司FACS Calibur)檢測，應用Cellquest軟件，進行CD64定量檢測。同期取全血血漿，采用速率散射比濁法進行CRP定量分析，分別于就診時、治療1周和4周3次留取標本。

1.4CPSI評分：對50例慢性前列腺炎患者，在治療前、治療1周后、治療4周后按照NIH-CPSI嚴格評分，記錄下每個患者分值和評分時間。

2 結果

2.1慢性前列腺炎患者在抗生素治療過程中CD64與CPSI總評分的比較：健康對照組的前列腺液中性粒細胞CD64值為966.214±106.263，50例患者(僅分析治療前)的前列腺液中性粒細胞CD64表達值1 876.305±134.284，顯著高于對照組。慢性前列腺炎患者在對癥治療過程中，在首次治療前、治療1周后、治療4周后進行前列腺液中性粒細胞CD64檢測，同期進行CPSI評分。見表1。

表1 慢性前列腺炎患者在對癥治療過程中CD64與CPSI評分的比較

2.2前列腺液單個核細胞CD64與CPSI總評分表達情況分析：慢性前列腺炎患者治療過程中，CD64與CPSI總評分平均分為增高和減低，CD64表達水平和CPSI按照表達平均分成增高和降低兩組，其中二者都高表達組有15例患者，而二者低表達組3例。見表2。

表2 前列腺液單個核細胞CD64與CPSI總評分表達統計

3 討論

CD64主要分布在巨噬細胞、單核細胞和樹突狀細胞等細胞表面。CD64表達被細胞因子所控制，在功能上起連接體液免疫和細胞免疫的作用，其為免疫球蛋白IgG的Fc段受體1(IgG、FcγR I)。當機體被感染，中性粒細胞CD64表達快速增加，與其補體或抗體結合后，引發免疫反應，包括吞噬作用、抗體依賴細胞介導細胞毒作用和細胞因子的釋放。研究表明在慢性前列腺炎疾病中，中性粒細胞CD64的檢測具有較高的臨床應用價值[6-7]。

本試驗為了嚴格控制結果準確性，采取排除標準控制實驗前的篩選：具備以下情況之一者從統計中排除：①因試驗分散而漏做或標本量<70 μl無法做全項目，造成報告數據不完整的病例；②近1個月內進行過檢查治療，有可肯能影響本試驗結果的患者；③淋病、非淋菌性尿道炎現癥患者；④年齡上限定為≤55歲，消除前列腺增生帶來的影響。本文章所有標本，均細菌培養陽性。臨床主任醫師確診為細菌性前列腺炎。

慢性前列腺炎治療的首選藥物是喹諾酮類抗生素，療程一般為4周，藥物治療為主的過程配合對癥治療[8]。本試驗按照抗生素治療療程1周和4周檢測結果，觀察治療后患者的臨床表現與CPSI評分是否一致，與CD64表達是否一致，并進一步比較CD64和CPSI的相關性，研究[6-7]結果表明：對癥治療前列腺液中性粒細胞CD64表達量較治療1周組下降，CPSI的分數也降到7.0±10.5和18.0±10.5，證明對癥治療有效果，也間接證明了CD64作為感染指標的準確性，但不具有統計學意義。對癥治療4周后CD64表達與對照和治療后1周組比較，差異有統計學意義(P<0.05)。說明CD64表達量不僅與前列腺液感染有一定關系，其表達水平與感染的嚴重程度相關。感染的程度越重，表達水平越高。反過來說，前列腺液中性粒細胞CD64隨著療程過程表達率較未治療前下降，表明：對癥治療后，隨著感染控制、病情的穩定好轉，同時患者疾病疼痛不適、排尿不盡等癥狀有一定緩解，CPSI評分降低。定量檢測CD64動態改變有助于慢性細菌性前列腺炎感染程度和用藥療效的監測研究表明隨著治療時間的增加CD64表達值逐漸變小。與CPSI評分隨之治療時間呈相同的下降趨勢。并且在第4周之后的檢測中有部分CD64接近健康對照組值。但也有1例患者，在治療前CPSI-1評分很高，疼痛的感覺很明顯，也是就診原因，另有2例患者CD64表達量很高，但CPSI總分得分很低，不排除個人感受和患者對疾病產生一定程度的耐受。4周后結果與治療1周略相同。

試驗中，筆者試圖通過CD64表達高低分析NIH-CPSI評分，發現差異無統計學意義(P>0.05)，數據相差不大，這可能與CPSI個體差異有關，故分為增高和降低兩組分析表達，發現僅按照NIH-CPSI評分，會忽略癥狀很輕或者癥狀不明顯但是已經感染程度較深的患者。測量前列腺液中性粒細胞CD64值雖然也存在陰性的概率，但是其測定方法相對簡單，靈敏度高，可以快速檢測出結果，是一種比較可靠的診斷方法。本試驗在治療過程中對前列腺液中性粒細胞CD64進行定量檢測，可以進行療效觀察和可能能夠預示預后情況，同期結合NIH-CPSI 評分，二者聯合應用，為CP治療提供有利的客觀指標，既能檢測實際感染的程度又能發現該病累積和對泌尿系統影響的程度。由于本研究樣本數目少，且該病并未被患者清楚認識，使有部分患者未能全程跟蹤監測。僅能部分解釋慢性前列腺炎的臨床問題，需要擴大樣本量，有待進一步研究。

總之，前列腺液中性粒細胞CD64定量檢測可為細菌性前列腺炎的診療提供依據，且聯合NIH-CPSI評分，有助于判斷感染的程度和評價預后。