內蒙古中西部綿羊弓形蟲病血清學調查

閆鑫磊，韓汶熒，韓 笑，雒 帥，汪 洋

(內蒙古農業大學食品科學與工程學院，內蒙古 呼和浩特 010018)

弓形蟲是一種細胞內寄生的人獸共患寄生蟲，可感染所有的溫血動物的有核細胞[1-2]。內蒙古自治區是我國畜牧業大省，其中綿羊養殖占據重要地位[3]。羊感染弓形蟲后，會出現腦炎、眼病和胎盤炎等嚴重癥狀，母羊患病可導致流產、死胎及非正常生產[4]，給畜牧業生產造成較大損失 ； 人感染弓形蟲的一個重要原因是食用未煮熟的含有弓形蟲包囊的肉，目前已有在羊肉及羊奶中分離出弓形蟲活體的報道[5]。本試驗通過對內蒙古自治區中西部地區代表性牧業地區的放牧及舍飼綿羊展開血清學檢測，以期為該地區畜牧業發展、居民食品安全水平提高及人獸共患病防治等方面提供數據參考。

1 材料與方法

1.1 樣品采集及血清制備 本試驗所用綿羊血樣分別采集于呼和浩特市、烏蘭察布市、鄂爾多斯市和巴彥淖爾市的15個旗縣，共計641份。血液樣品5 000 r/min離心15 min，取上清轉入經高壓滅菌的1.5 mL離心管中，編號后于-20 ℃冰箱保存待用。

1.2 試驗試劑及方法 綿羊弓形蟲(Tox)間接ELISA抗體檢測試劑盒，購自泉州市睿信生物科技有限公司，試驗操作按試劑盒說明書要求進行。

1.3 結果判定 在陽性對照樣本OD值≥1且陰性對照樣本OD值≤0.15的條件下，判定結果的臨界值=陰性對照樣本的平均OD值+0.15，若被測樣的OD值>臨界值，則被測樣為陽性，反之則為陰性。

1.4 數據統計 采用SPSS 19.0軟件對數據進行卡方檢驗，當P<0.05時差異顯著，P<0.01時差異極顯著。

2 結果

2.1 各地區綿羊弓形蟲血清抗體檢測 本試驗從內蒙古中西部4個地級市15個旗縣(區)采集樣品641份，經弓形蟲抗體檢測，總體陽性率為21.84%。高于總體陽性率的有10個旗縣，其中最高為和林格爾縣(29.63%)；低于總體陽性率的有5個旗縣，其中最低為伊金霍勒旗(11.11%)，見表1。

表1 弓形蟲血清抗體陽性率檢測結果

2.2 不同飼養方式綿羊弓形蟲血清抗體檢測 由表2可知，在所檢測的494份舍飼的樣品中，弓形蟲血清抗體陽性率為24.49%；放牧綿羊的陽性率為12.93%。對二者陽性率進行卡方檢驗，差異極顯著(P<0.01)。

表2 不同飼養方式綿羊弓形蟲血清陽性率

2.3 不同性別綿羊弓形蟲血清抗體檢測 由表3可知，所檢測282份雄性綿羊的血清中，檢測結果為陽性的有72份，陽性率為25.53%；雌性綿羊的359份被檢樣品中，陽性樣品為68份，陽性率為18.94%。雄性綿羊陽性率大于雌性綿羊，經卡方檢驗分析，二者無顯著性差異(P>0.05)。

表3 不同性別綿羊弓形蟲血清陽性率

2.4 不同年齡綿羊弓形蟲血清抗體檢測 以12月齡及以上的綿羊為成年羊，12月齡以下為未成年羊。結果顯示，成年羊的陽性率為33.21%；未成年羊的陽性率為13.83%。成年的綿羊弓形蟲血清抗體陽性率大于未成年綿羊，且二者差異極顯著(P<0.01)， 結果見表4。

表4 不同年齡綿羊弓形蟲血清陽性率

2.5 不同月份綿羊弓形蟲病流行病學調查情況 結果由表5可知，全年每個月份均有陽性樣品檢出。其中8月份感染率最高(28.57%)，1月份最低(14.29%)。綜合分析發現，綿羊弓形蟲感染率呈現春冬季節較低，夏秋季節較高的趨勢，但各月份間感染率不存在顯著性差異(P>0.05)。

表5 不同月份綿羊弓形蟲感染血清學檢測結果

3 討論

本試驗利用間接ELISA方法檢測呼和浩特市、烏蘭察布市、鄂爾多斯市和巴彥淖爾市4個地級市15個旗縣共641份綿羊血樣，總體結果陽性率為21.84%。與已報道的國內其他調查結果[6-8]相比處于較高水平。本次調查結果顯示，舍飼綿羊弓形蟲感染的血清學檢測結果陽性率(24.49%)高于放牧綿羊(12.93%)，且二者呈極顯著差異(P<0.01)，與已報道的研究結果[9-10]相吻合，造成這種情況的原因可能是由于舍飼綿羊集中，受感染的機率大于放牧綿羊，易發生群體性感染。此外年齡因素也是造成弓形蟲感染的風險因素之一。結果顯示，在所調查的12月齡以上綿羊中，弓形蟲感染率為33.21%，12月齡以下的綿羊弓形蟲感染率為13.83%，且差異極顯著(P<0.01)，可能原因是隨著飼養時間的增加綿羊接觸外界環境的概率隨之增大，因此接觸到弓形蟲卵囊的可能性也就越大。但該結果與已報道的結果[11-12]相左，這說明年齡因素可能與其他未知因素結合產生影響。需要指出的是，本試驗結果顯示，性別不是弓形蟲感染的風險因素，說明不同性別綿羊均可感染弓形蟲，因此對于不同性別綿羊弓形蟲感染均需做好全面防控工作。本試驗還發現，被調查地區不同月份綿羊弓形蟲血清陽性率雖無顯著差異，但可看出春冬季節感染率低、夏秋季節感染率高的趨勢，說明秋冬季節為弓形蟲感染的高發時期，提示在此期間相關人員應加強該疫病的防控力度。

綜上所述，該結果為地區性動物疫病防控、畜牧業發展及居民肉類食品安全保障提供一定科學參考。但內蒙古地區幅員遼闊，綿羊養殖量巨大，因此為獲得更加準確的數據，擴大采樣范圍及采樣量是今后研究的方向。同時建議相關部門做好相關疫病防治及對相關人員的宣傳教育工作。