硝苯地平緩釋片Ⅰ釋放度影響因素研究

劉景宜

洛陽市食品藥品檢驗所，河南 洛陽 471023

硝苯地平緩釋片Ⅰ是常用的降壓藥之一，硝苯地平血藥濃度時間曲線平緩長久，每服用一次能維持最低有效血藥濃度（10 ng/mL）長達(dá)12 h。不同時間的釋放度關(guān)系到藥效的好壞，合理準(zhǔn)確測定釋放度的結(jié)果比較重要。本試驗參照國家食品藥品監(jiān)督管理局國家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS1-（X-056）-2004Z 及《中國藥典》2015 年版四部通則0931 第二法及通則0401 進(jìn)行實驗。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

UV-2401PC 紫外可見分光光度計（日本島津公司）；UV-2700 紫外可見分光光度計（日本島津公司）；FADT-801 自動取樣溶出系統(tǒng)（上海富科思分析儀器有限公司）；MSA224S-1CE-DU 電子天平（德國賽多利斯）；RCZ-8M 溶出試驗儀（天津市天大天發(fā)科技有限公司）。

1.2 試藥

硝苯地平對照品批號：100338-201806，規(guī)格：100 mg/支，中國食品藥品檢定研究院生產(chǎn)，含量：99.9%。硝苯地平緩釋Ⅰ樣品為河南省2020 年硝苯地平類專項抽檢樣品；硝苯地平緩釋片Ⅰ樣品收集情況及執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)，見表1。

表1 樣品收集情況及執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)

2 方法與結(jié)果

2.1 對照品的影響因素

對照品的制備：精密稱取硝苯地平對照品約12.5 mg，置25 mL 量瓶中，加無水乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取2 mL，置100 mL 量瓶中，加鹽酸溶液稀釋至刻度，作為對照品溶液［1］。

配制對照品，總計7 次，測定吸光度，計算吸光度與對照品濃度的比值，再計算7 次比值的RSD（測定吸光度時紫外可見分光光度計均重新關(guān)機(jī)再開機(jī)）。測量數(shù)值與計算結(jié)果見表2。

表2 測量數(shù)值與計算結(jié)果

由表2 可見，對照品吸光度和濃度比值比較恒定，對照品狀態(tài)穩(wěn)定，對結(jié)果影響較小。實際工作中，配制一次對照品，測定吸光度后可以在紫外可見分光光度計狀態(tài)穩(wěn)定時多次使用該次測量結(jié)果，不需要每次在做釋放度時重新配制對照品。

2.2 濾膜的影響因素

在對陜西A 藥廠的樣品做檢驗時，采用溶出儀自動取樣，最后得到的檢驗結(jié)果與藥廠的檢驗結(jié)果存在較大差異，與廠家技術(shù)人員溝通后，又對可能影響釋放量的各種因素充分驗證后，認(rèn)為造成結(jié)果差異的因素為濾膜的孔徑、材質(zhì)［2-8］。

根據(jù)《中國藥品檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范》2019 年版的規(guī)定，在對樣品進(jìn)行檢驗前，先對對照品溶液進(jìn)行了濾膜吸附的檢查。方法如下：用對照品溶液規(guī)定的方法測定吸光度，然后用濾膜濾過后再測定吸光度，濾膜吸附應(yīng)在2%以下［9-10］。對照品溶液在最大吸收238 nm 處測定吸光度，數(shù)據(jù)見表3。

表3 濾膜過濾后對照品數(shù)據(jù)及誤差

由表3 可見，濾膜的孔徑、材質(zhì)對結(jié)果影響很大，其中尼龍材質(zhì)的濾膜對結(jié)果影響較小，在規(guī)定的2%范圍以內(nèi)，因此選擇使用津騰0.8 μm 尼龍濾膜做為樣品過濾時使用的濾膜。在進(jìn)行樣品實驗前，先進(jìn)一步對津騰0.8 μm 尼龍濾膜進(jìn)行對照品吸附驗證，防止表3 數(shù)據(jù)為偶然現(xiàn)象。數(shù)據(jù)見表4。

表4 津騰0.8 μm尼龍濾膜過濾后吸光度

由表4可見，津騰0.8 μm尼龍濾膜符合實驗要求。

下面對6 個廠家8 個批次的樣品，根據(jù)WS1-（X-056）-2004Z 標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行2 h 的釋放度測定，采用手動取樣，分別使用溶出儀自帶的濾膜過濾和使用津騰0.8 μm 尼龍濾膜過濾，比較吸光度的誤差。數(shù)據(jù)見表5。

由表5 可見，使用不同的濾膜過濾對檢驗結(jié)果影響是很大的，誤差范圍5.1%～9.4%。在標(biāo)準(zhǔn)WS1-（X-056）-2004Z 中，對2 h 釋放度規(guī)定的范圍為30%～55%，其中陜西A 公司3 個批號的產(chǎn)品在用儀器濾膜過濾時，檢驗結(jié)果是不合格的，在用津騰濾膜過濾后，檢驗結(jié)果為合格，由此可見，在檢驗工作中需要手動取樣后選擇合適的濾膜過濾，尤其是對一些檢驗結(jié)果在邊緣的藥品。

表5 樣品2 h吸光度數(shù)據(jù)

下面對2 個廠家4 個批次的樣品，根據(jù)WS1-（X-056）-2004Z 標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行4 h、8 h 的釋放度測定，采用手動取樣，分別使用溶出儀自帶的濾膜過濾和使用津騰0.8 μm 尼龍濾膜過濾，比較吸光度的誤差。數(shù)據(jù)見表6。

由表6 可見，使用不同的濾膜過濾時，兩者在4 h 的誤差為3.5%～4.7%，在8 h 的誤差為2.4%～3.7%，由此可見，使用不同的濾膜對檢驗結(jié)果的影響隨時間的變長是逐漸降低的。

表6 樣品4 h、8 h吸光度數(shù)據(jù)

2.3 溫度的影響因素

《中國藥典》2015 年版四部通則0931 規(guī)定溶出介質(zhì)溫度為37.0±0.5 ℃，而在實際工作中發(fā)現(xiàn)，溶出介質(zhì)溫度分別為36.5 ℃和37.5 ℃時，也會對釋放度結(jié)果產(chǎn)生一定影響。選擇陜西A 公司，批號191111 的產(chǎn)品，在36.5 ℃和37.5 ℃時，在2 h 各進(jìn)行3 次測定。36.5 ℃測得吸光度的平均值為0.313 8，37.5 ℃測得吸光度的平均值為0.321 1，兩者差值為2.3%。由于樣本的數(shù)量較少以及樣本之間的不均一性，差值2.3%并不能完全反映出溫度對釋放度的影響，但也說明當(dāng)溫度不夠準(zhǔn)確或波動較大時會對釋放度結(jié)果產(chǎn)生一定影響。

3 討論

在測定對照品吸光度時，當(dāng)儀器狀態(tài)正常時，在不同時間不同儀器上測定的吸光度和濃度的比值基本上是恒定的，對照品對釋放度結(jié)果的影響很小，因此在測定時可以不考慮對照品的因素。溫度對釋放度結(jié)果影響較小，在正常測定時可以不考慮溫度的影響，只有當(dāng)檢驗結(jié)果在規(guī)定限度的邊緣時需要考慮溫度因素。

濾膜是影響釋放度結(jié)果的主要因素，已經(jīng)影響到了檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，在檢驗時必須考慮濾膜的影響。另外在使用津騰濾膜過濾樣品時，應(yīng)該棄去4 mL 左右的初濾液，使濾膜達(dá)到飽和，不影響吸光度的測定。