復方冰甲乳膏藥效學研究*

邱 洪，李新順，王 慧

（中國人民解放軍聯勤保障部隊第925 醫院，貴州 貴陽 550009）

復方冰甲乳膏為我院皮膚科臨床經驗方，系冰片、硫磺、硼砂、甲硝唑、制霉菌素等中西藥結合的復方制劑［1－2］，有清熱燥濕、收斂生肌功效，主要用于治療真菌感染引起的手足癬等［3］。本課題組前期已完成了相關毒理學研究［4－5］，為驗證其臨床療效，進一步對該方進行了藥效學研究。現報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

儀器：JM－B 型電子天平（余姚市紀銘稱重校驗設備有限公司）；ALC－210.3 型電子天平（上海良平儀器儀表有限公司）；SPX－500 型生化培養箱（常州市金壇高科儀器廠）；N－300M 型生物顯微鏡（南京江南永新光學有限公司）。

近年來，隨著增減掛鉤項目的試點推廣，如何在增減掛鉤實施過程中降低甚至規避項目潛在風險矛盾，使項目能實現其最大效益，成為了當前決策者和執行者面臨的重大挑戰，同時逐漸引起學者們的關注。相關研究大都是選擇某一角度分析增減掛鉤在某些特定環節中的矛盾沖突，尚缺乏對增減掛項目社會風險的系統全面分析。本研究擬立足于增減掛鉤項目整個過程，運用工作分解結構法（WBS）梳理增減掛鉤項目各個環節可能存在的風險因素，并系統性識別增減掛鉤項目可能存在的社會風險點。

試藥：復方冰甲乳膏（貴陽中醫學院中藥制劑研究中心，批號為20150126）；硝酸咪康唑乳膏（達克寧，西安楊森制藥有限公司，批號為140608107，規格為每支20 g）；復方醋酸地塞米松乳膏（皮炎平，華潤三九醫藥股份有限公司，批號為1405021H，規格為每支20 g）；二甲苯（天津市大茂化學試劑廠，批號為20080921）；卡拉膠（角叉菜膠，上海勁馬生物科技有限公司，批號為20140625）；磷酸組胺（上海源葉生物科技有限公司，批號為YY10165）；蛋白胨（上海申科昆蟲生物科技開發有限公司，批號為080109）；葡萄糖（天津市科密歐化學試劑有限公司，批號為20130320）；瓊脂粉（天津市致遠化學試劑有限公司，批號為20140726）；馬鈴薯為市售。

動物：豚鼠 130 只、體質量 240 ～ 260 g，昆明小鼠60 只、體質量 18 ～ 22 g，SD 大鼠 50 只、體質量 180 ～220 g，均雌雄各半。由貴陽醫學院實驗動物中心提供，實驗動物生產許可證號為SCXK（黔）2012－001。飼料為全價顆粒飼料，由同一單位提供。

觀察指標：于給藥第 1，3，7，10 天時大體觀察皮損鱗屑、紅斑、膿腫等感染征象，皮損部位行真菌鏡檢及培養，測量皮損直徑，以判斷皮損面積。

1.2 方法

1.2.1 體外抗真菌作用［6－7］

治愈標準：皮損處無任何感染征象，真菌鏡檢、培養均呈陰性。

試驗時從4 ℃冰箱中取出菌株，室溫放置24 h 后接種于SDA 培養基，26 ℃培養10 d 后，挑取菌落接種至 60 mL PDB 培養基中，于 26 ℃ 培養 3 ～ 5 d，取出，作為原液。再用PDA 液體培養基稀釋至濃度為1 ∶100，作為試驗菌液，備用。

首先，大數據能夠為學生的實驗理論學習以及實踐學習，提供源源不斷的動力。隨著當前整個教育改革制度的持續推進，理工類高等院校當中的實驗教學模式也在不斷地發生著相應的變化，以往傳統的以教師講授為主體的教學模式，被逐漸的淘汰掉了，而更加具有靈活性、更加具有開放性的實驗室教學逐漸成為主體，學生在這樣的過程當中能夠得到教育工作者的關注和青睞。而理工類專業的學生，在實驗課程上能夠更好地驗證自身理論知識的掌握程度，正是憑借著良好的實驗室環境以及高效的管理模式，最終也就為學生的理論學習以及實踐能力培養提供了源源不斷的動力。

供試品溶液制備：取樣品適量，用水配制成質量濃度為100 mg／mL 的供試品溶液，裝入25 mL 小錐形瓶中，70 ℃加熱溶解2 min，封口，備用。

西王集團以玉米深加工和特鋼為主業，擁有三家上市公司，其成長歷程堪稱改革開放40年中的標志性企業。其創始人王勇是全國人大代表，也在今年入選改革開放40年感動山東人物。

最低抑菌濃度（MIC）測定：取13 支干燥無菌帶塞小試管，無菌操作，分別加入1 mL SDB 培養基，然后向第1 支試管加入供試品溶液液1 mL，混勻，取1 mL 加入第2 支試管內，依次類推至第11 管，制成質量濃度依次 為 50.00，25.00，12.50，6.25，3.13，1.56，0.78，0.39，0.20，0.10，0.05 mg ／mL 的系列供試品溶液，每管加入0.1mL 菌液；第12 管不加菌液，作陰性對照；第13 管加菌液，作陽性對照。置生化培養箱中培養1 周。以真菌不生長的最高藥物稀釋度為該藥的 MIC。配制過程中每一濃度梯度完成后應更換槍頭。每個質量濃度重復3 管。

1.2.4 止癢作用［10］

在基層社會治理的模式構建中有三大要素對社會治理效果發揮著重要作用，分別是基礎保障性要素、創新協同性要素和工具性要素。誠然，在社區治理中對社區治理主體進行簡單的分類并沒有實質性的意義，在歸類基礎上對其結構和資源的整合以及流程的再造才是要素區分的要義。

1.2.2 抗模型豚鼠真菌感染作用［8－9］

建模、分組與給藥：將80 只豚鼠背部剃毛，面積9 cm2（3 cm×3 cm），用細砂紙在剃毛部位擦拭，以出現輕微滲血為度（提高接種成功率），24 h 后用1 mL 注射器在脫毛面中心區刺入豚鼠皮膚內（以不使皮膚出血為度）注入0.1 mL 菌懸混合液（玫瑰毛癬菌、犬小孢子菌、絮狀表皮癬菌。試驗前恢復其致病力并接種于PDB 培養基，26 ℃培養1 周，制備成菌懸混合液，置4 ℃冰箱保存，備用），再用棉簽蘸取菌懸混合液0.2 mL 涂布于脫毛創傷部位，1 天2 次，共感染3 d，以復制感染模型。豚鼠脫毛接種區皮膚出現紅斑、丘疹及水皰，且真菌鏡檢及培養均為陽性為模型復制成功。于感染模型復制成功后第2 天隨機分為模型組（A 組），復方冰甲乳膏高、中、低劑量組（B1組、B2組、B3組 ），陽性對照（達克寧）組 （C組），各 10 只。B1組、B2組、B3組用棉簽取稱量好的相應藥物均勻涂抹于豚鼠皮損部位，劑量分別為0，0.70，0.35，0.18，0.70 g ／kg （后續試驗中大鼠給藥劑量同）連續涂藥10 d，1 天1 次。模型組給予賦形劑，以下試驗同。

菌株：玫瑰毛癬菌、犬小孢子菌、絮狀表皮癬菌，均購于中國醫學科學院皮膚病研究所。

培養基制備：1）SDA 培養基，稱取葡萄糖 40.0 g，蛋白胨 10.0 g，瓊脂粉 20.0 g，加水定容至 1 000 mL，并用玻璃棒不斷攪拌，使各成分溶解，然后煮沸1 min。115 ℃、高壓滅菌 20 min，備用。2）沙氏葡萄糖液體（SDB）培養基，除不加瓊脂粉外，其余制備方法同1）。3）馬鈴薯葡萄糖液體（PDB）培養基：稱取馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，蛋白胨5 g，水1 000 mL。馬鈴薯去皮及芽，加水煮爛（能被玻璃棒戳破即可），3 層紗布過濾。加葡萄糖、蛋白胨、蒸餾水，分裝6 個三角瓶，加塞，包扎，121 ℃滅菌20 min，即得，備用。

楊春梅和鄭巖在研究我國促進技術創新的相關財稅政策中發現，當前，我國的財稅政策之間缺乏聯系，各個稅種之間內在聯系不緊密，一些新出臺的政策和舊政策之間的銜接也不緊密、協調性差[9]。如中央和地方之間財稅激勵政策之間銜接的不緊密，上下不統一問題。如中發〔2015〕8號和國發〔2016〕16號等“新政”中提出取消科技成果“審批或備案”環節，給予企業、科研院所等更多自主權。但一系配套制度并未做出相應調整，導致財稅激勵政策上下聯動受限，也給企業申報設置了不小障礙。

首先打開Shadow 數據屬性表，選中值為 1的柵格，再選擇 [轉換工具][由柵格轉出][柵格轉面]工具，打開工具對話框，完成矢量轉換，如圖11。

對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的作用：將昆明小鼠隨機分為模型組（A 組），復方冰甲乳膏高、中、低劑量組（B1組、B2組、B3組），陽性藥（皮炎平）組 （C 組），各 12只。按前述方法用棉簽取稱量好的相應藥物均勻涂抹于小鼠耳朵兩面，連續涂藥7 d，1 天1 次，劑量分別為0，1.00，0.50，0.25，1.00 g ／kg。第 7 天末次涂藥 1 h 后，以水洗去膏藥，用干棉球擦凈。用二甲苯原液0.03 mL 涂于小鼠左耳前后兩面，致炎40 min 后處死，剪取左右兩耳，用直徑8 mm 的打孔器于相同部位打取左右耳耳片，精密稱定質量，以左右耳耳片質量之差為小鼠耳腫脹度，并計算小鼠耳腫抑制率。

真菌懸液制備：從保存菌種斜面上各挑取菌苔（玫瑰毛癬菌、絮狀表皮癬菌、犬小孢子菌），分別接種至60 mL PDB 培養基中，于 26 ℃培養 3 ～ 5 d，取出，作為原液。再用PDB 培養基稀釋至濃度為1 ∶100，作為試驗菌液。

抑制率（%）＝（模型組耳腫脹度－給藥組耳腫脹度）／模型組耳腫脹度×100%

對角叉菜膠所致大鼠足跖腫脹的作用：將SD 大鼠隨機分為模型組（A 組），復方冰甲乳膏高、中、低劑量組（B1組、B2組、B3組），陽性藥（皮炎平）組 （C 組），各 10只。按前述方法用棉簽取稱量好的相應藥物均勻涂抹于大鼠右后肢足跖處，連續涂藥7 d，1 天1 次，第7 天末次涂藥1 h 后，以水洗去膏藥，用干棉球擦凈。在大鼠右后肢足跖皮下注射1%角叉菜膠0.1 mL，分別于致炎后1，3，4，5，7 h 時用游標卡尺測量大鼠后肢左右足趾厚度，以左右足趾厚度的差值為腫脹度。

最低殺菌濃度（MBC）測定：取抑菌試驗結果中透明的各試管，再依次取出不生長真菌的供試品溶液培養物0.1 mL，分別移至SDA 培養基中，用涂布棒均勻涂布，倒置于培養箱中，26 ℃培養1 周，以不生長真菌的最高稀釋度為該藥的 MBC。重復試驗3 次。

將50 只豚鼠隨機分為模型組（A 組），復方冰甲乳膏高、中、低劑量組（B1，B2，B3組），陽性藥（皮炎平）組（C 組），各10 只。試驗前，各組豚鼠于右后足脫毛約1 cm×2 cm。第2 天，在右后足背脫毛區皮膚面涂藥，按前述方法用棉簽取稱量好的相應藥物均勻涂抹，連續涂藥7 d，1 天1 次。第7 次涂藥前，用粗砂紙擦傷豚鼠右后足背脫毛處，面積約1 cm2。在擦傷處再按上述所示涂第7 次藥，于末次涂藥 10 min 后在擦傷處滴 0.01% 磷酸組胺0.05 mL，觀察豚鼠回頭舔右后足擦傷處反應，若豚鼠無此反應，可每隔3 min 重復滴藥，直至豚鼠出現該反應為止，以最后出現該反應時的磷酸組胺總量為致癢閾。

1.3 統計學處理

1.2.3 抗炎作用［8－10］

待兩組患者建立靜脈輸液通道后，對其進行誘導麻醉，給予患者標準劑量的咪達唑侖、舒芬太尼，靜脈注射依托咪酯，而后檢查患者睫毛放射和意識是否已經消失。對照組接受苯磺順阿曲庫銨（江蘇恒瑞醫藥股份；國藥準字H20060869；規格：10 mg）靜脈注射，劑量使用如下：0.12 mg/kg；觀察組患者接受羅庫溴銨（荷蘭歐加農；國藥準字H20130486；規格：5 mL：50 mg）靜脈注射，使用劑量如下：0.5 mg/kg。待肌松藥給藥后，對兩組患者行氣管插管和機械通氣，并給予患者0.15%七氟烷氣體以維持患者處于深度麻醉。

2 結果

2.1 體外抗真菌作用

結果見表1。可見，絮狀表皮癬菌、玫瑰毛癬菌對復方冰甲乳膏較敏感，MIC 均為 3.13 mg／mL，而犬小孢子菌的 MIC 為6.25 mg／mL；絮狀表皮癬菌、犬小孢子菌、玫瑰毛癬菌的 MBC 分別為 3.13，6.25，50 mg ／mL。

2.2 抗豚鼠真菌感染作用

用藥第1 天時，各組皮損處出現紅斑，直徑約7 mm，伴有鱗屑、膿腫等感染征象，皮損部位鏡檢可見真菌。復方冰甲乳膏高、中、低劑量組及陽性對照組于治療第7 天時，皮損感染癥狀已明顯好轉，紅斑直徑明顯縮小，鱗屑已消失，至治療第10 天時，部分皮損感染現象已消失，真菌鏡檢及培養均為陰性，且復方冰甲乳膏存在一定的劑量依賴性，高、中、低劑量組治療率分別為70%，50%，40%（陽性對照組為80%）。模型組病變部位至第7 天時持續加重，之后逐漸好轉，但未見痊愈。試驗組與模型組比較，差異有統計學意義（P ＜ 0.01）。詳見表2。

有些教師的確是拒絕、懼怕課改的，他們希望按照多年不變的方法教語文，既省力又省心，所以對新的理念和方法本能地有排斥心理。但絕大多數還是歡迎課改的，他們的困惑反映課改出了問題。毫無疑問，課改以后的語文課，出現許多非常好的變化：學生的地位突出了，教學方法豐富了，教學手段改進了，課堂空間拓展了。但一些不正常的理念也開始滋生，一些畸形的課堂教學觀開始蔓延。

表1 復方冰甲乳膏體外抗真菌作用Tab.1 Effect of Compound Bingjia Cream against fungal in vitro

表2 復方冰甲乳膏對模型豚鼠皮損直徑的影響（，mm，n ＝ 10）Tab.2 Effect of Compound Bingjia Cream on the lesion diameter of guinea pigs（，mm，n ＝ 10）

表2 復方冰甲乳膏對模型豚鼠皮損直徑的影響（，mm，n ＝ 10）Tab.2 Effect of Compound Bingjia Cream on the lesion diameter of guinea pigs（，mm，n ＝ 10）

注：與模型組比較，*P ＜0.05，**P ＜0.01。表 3 至表 5 同。Note：Compared with those in the model group，* P ＜ 0.05，** P ＜0.01，as well as Tab.3，Tab.4 and Tab.5.

組別A 組B1 組B2 組B3 組C 組劑量（g／kg）0 0.70 0.35 0.18 0.70治療后1 d 7.43 ±0.70 7.28 ±0.64**7.18 ±0.79**7.31 ±0.84**7.31 ±0.85治療后3 d 10.21 ±1.08 6.63 ±0.65**6.92 ±0.59**7.55 ±0.90**6.79 ±0.77治療后7 d 10.85 ±0.64 4.15 ±0.91**4.71 ±0.96**5.72 ±1.68**3.68 ±0.94治療后10 d 8.34±2.14 0.93±1.52**1.96±2.10**2.32±2.09**0.56±1.19

2.3 抗炎作用

與模型組比較，各給藥組小鼠耳廓腫脹度均明顯減輕（P ＜ 0.05，P ＜ 0.01）。詳見表 3。大鼠足跖皮下注射角叉菜膠后3 h 內足趾腫脹度持續升高，之后開始降低。而各給藥組足跖腫脹度的增加均受到抑制，尤其是復方冰甲乳膏高劑量組，除致炎后5 h 外，其余各個時間點足跖腫脹度與模型組比較均明顯減輕（P ＜0.05，P ＜ 0.01）。詳見表 4。

2.4 止癢作用

與模型組比較，各給藥組大鼠的致癢閾均明顯升高（P ＜0.05，P ＜0.01）。詳見表 5。

表3 復方冰甲乳膏對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹度的影響（，n ＝ 12）Tab.3 Effect of Compound Bingjia Cream on auricle swelling induced by xylene in mice（，n ＝ 12）

表3 復方冰甲乳膏對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹度的影響（，n ＝ 12）Tab.3 Effect of Compound Bingjia Cream on auricle swelling induced by xylene in mice（，n ＝ 12）

組別A 組B1 組B2 組B3 組C 組劑量（g ／kg）0 1.00 0.50 0.25 1.00耳腫脹度（mg）19.60 ± 4.60 13.90 ± 2.90**16.60 ± 2.70**15.60 ± 3.50**12.80 ± 3.10耳腫脹抑制率（%）29.08 15.31 20.41 34.69

表4 復方冰甲乳膏對角叉菜膠所致大鼠足跖腫脹度的影響（，mm，n ＝ 10）Tab.4 Effect of Compound Bingjia Cream on paw swelling induced by carrageenan in rats（，mm，n ＝ 10）

表4 復方冰甲乳膏對角叉菜膠所致大鼠足跖腫脹度的影響（，mm，n ＝ 10）Tab.4 Effect of Compound Bingjia Cream on paw swelling induced by carrageenan in rats（，mm，n ＝ 10）

組別A 組B1 組B2 組B3 組C 組劑量（g／kg）0 0.70 0.35 0.18 0.70治療后1 h 1.52 ±0.45 0.97 ±0.36**1.07 ±0.52*1.25 ±0.75 1.00 ±0.54*治療后3 h 2.14 ±0.32 1.51 ±0.28**1.58 ±0.31**1.66±0.96 1.52 ±0.48**治療后4 h 1.87 ±0.256 1.57 ±0.55*1.47 ±0.76 1.68±0.85 1.60 ±0.32*治療后5 h 1.60 ±0.27 1.40 ±0.32 1.35 ±0.51 1.42±0.83 1.46 ±0.24治療后7 h 1.26 ±0.38 0.87 ±0.29*0.90 ±0.51*1.28±0.57 1.09 ±0.73

表5 復方冰甲乳膏對模型大鼠致癢閾的影響（，μg，n ＝10）Tab.5 Effect of Compound Bingjia Cream on itch thxeshold in model rats（，μg，n ＝ 10）

表5 復方冰甲乳膏對模型大鼠致癢閾的影響（，μg，n ＝10）Tab.5 Effect of Compound Bingjia Cream on itch thxeshold in model rats（，μg，n ＝ 10）

組別A 組B1 組B2 組B3 組C 組劑量（g／kg）0 0.70 0.35 0.18 0.70致癢閾9.50 ± 5.00 26.50 ± 7.00**23.00 ± 9.80**16.50 ± 9.70**19.00 ± 12.60

3 討論

復方冰甲乳膏為中西藥復方制劑，用于真菌感染引起的手足癬、股癬等的治療。本研究結果顯示，復方冰甲乳膏體外有抑菌和殺菌作用；殺菌效果絮狀表皮癬菌優于犬小孢子菌，犬小孢子菌優于玫瑰毛癬菌；高、中、低劑量復方冰甲乳膏能明顯縮小真菌感染豚鼠皮損直徑，并使皮損外觀癥狀好轉或消失，明顯升高治愈率；能顯著抑制二甲苯導致的小鼠耳廓腫脹及角叉菜膠誘發的大鼠足腫脹；能明顯提高磷酸組胺致癢模型豚鼠的致癢閾。

綜上所述，復方冰甲乳膏可通過體內、體外抗真菌、抗炎和止癢共同發揮治療手足癬的作用。本研究為復方冰甲乳膏的臨床使用提供了實驗室依據。