云南清甜香典型片煙和非典型碎煙間揮發性致香成分差異性分析

凌軍 孫勝南 陳劍明 胡武 劉春波 盧真保 楊乾栩 趙世興 楊洪明 黃艷

摘要：【目的】對比云南清甜香典型片煙和非典型碎煙間揮發性致香成分含量的差異，為研究云南清甜香煙葉風格特色關鍵致香成分和低次煙葉深加工提供參考依據。【方法】以2個云南清甜香典型片煙和9個非典型碎煙為原料，運用氣相色譜/質譜法（GC/MS）和熱脫附—氣相色譜/質譜法（ATD-GC/MS）分別對2類煙葉的揮發性致香成分進行對比分析，并以典型片煙中揮發性成分相對含量顯著高于非典型碎煙作為分析目的，深入挖掘2類煙葉具有顯著性差異的揮發性致香成分，并找出2種方法分析結果存在的規律性。【結果】運用GC/MS對所制備的11個煙葉樣本揮發性致香成分進行檢測分析，共鑒定出40種揮發性成分，包含17種酮類、10種醇類、4種醛類、5種雜環類、2種烯烴類、1種酸類和1種內酯類化合物，典型片煙的酮類和內酯類化合物相對含量明顯高于非典型碎煙;典型片煙有14種揮發性成分的相對含量顯著高于非典型碎煙（P<0.05，下同），分別是甲基庚烯酮、2-乙酰基呋喃、4-環戊烯-1，3-二酮、β-大馬酮、β-紫羅蘭酮環氧化物、桉油烯醇、脫氫二氫-β-紫羅蘭酮、3，4-脫氫-β-紫羅蘭酮、巨豆三烯酮的4個同分異構體、二氫獼猴桃內酯和3-羥基-β-二氫大馬酮;通過ATD-GC/MS對2類煙葉樣本設定的14種重要致香成分進行半定量對比分析，發現典型片煙的成分總含量明顯高于各非典型碎煙，而β-大馬酮、巨豆三烯酮的4個同分異構體、二氫獼猴桃內酯、3-羥基-β-二氫大馬酮和3-氧代-α-紫羅蘭醇這8種成分在典型片煙中的相對含量也顯著高于非典型碎煙。2種分析方法存在含量顯著性差異的致香成分中有7種致香成分一致，包括β-大馬酮、巨豆三烯酮的4個同分異構體、二氫獼猴桃內酯和3-羥基-β-二氫大馬酮。【結論】通過2種分析方法對云南清甜香典型片煙和非典型碎煙的揮發性致香成分進行對比研究，發現2類煙葉間部分揮發性致香成分存在顯著性差異，且2種方法的分析結果存在一定的規律。

關鍵詞： 云南;清甜香;片煙;碎煙;揮發性致香成分;差異性分析

中圖分類號： S572? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻標志碼： A 文章編號：2095-1191（2021）02-0374-11

Abstract：【Objective】By comparing the differences of volatile aroma components between typical tobacco strips and non-typical tobacco fines of Yunnan fresh-sweetness scent. The results could provide technical reference for the study of key aroma components in Yunnan fresh-sweetness scent tobacco leaves and deep processing of low-grade tobacco leaves.【Method】Two typical tobacco strips of Yunnan fresh-sweetness scent and nine non-typical tobacco fines were used as raw materials. The volatile aroma components of two kinds of tobacco leaves were analyzed comparatively by gas chromato-graphy/mass spectrometry（GC/MS） and automatic thermal desorption-gas chromatography/mass spectrometry（ATD-GC/ MS）. The relative content of volatile components in typical tobacco strips significantly higher than that in non-typical tobacco fines was chosen as the analysis purpose. The volatile aroma components with significant differences between the two types of tobacco leaves were deeply explored， and the regularity of the analysis results of the two methods was found.【Result】The volatile aroma components of 11 tobacco samples were analyzed comparatively by GC/MS. There were 40 volatile components in the samples， including 17 ketones， 10 alcohols， 4 aldehydes， 5 heterocyclic compounds， 2 alkenes， 1 acid and 1 lactone. In terms of the total relative content of various compounds， the ketones and lactones in typical tobacco strips were significantly higher than those in non-typical tobacco fines.It was found that the relative contents of 14 components in typical tobacco strips were significantly higher than those in non-typical tobacco fines（P<0.05， the same below）， which were 6-methyl-5-hepten-2-one， 2-acetylfuran，4-cyclopentene-1，3-dione，β-damascenone，β-ionone epoxide， spathulenol， dehydrodihydro-β-ionone， 3，4-dehydro-β-ionone， 4 isomers of megastigmatrienone， dihydroactinidiolide， 3-hydroxy-β-damascone. The 14 important aroma components of the samples were semi quantitative comparatively analyzed by ATD-GC/MS. It was found that the relative content of total components in typical tobacco strips was significantly higher than that in non-typical tobacco fines. The contents of β-damascenone， four isomers of megastigmatrienone， dihydroactinidiolide， 3-hydroxy-β-damascone， 3-oxo-α-ionol in typical tobacco strips were also significantly higher than those in non-typical tobacco fines. In addition， seven aroma components with significant difference between the two methods were consistent， including β-damascenone，four isomers of megastigmatrienone，dihydroactinidiolide and 3-hydroxy-β-damascone. 【Conclusion】The volatile aroma components of typical tobacco strips and non-typical tobacco fines with Yunnan fresh-sweetness scent are compared by two different analysis methods. The results show that there are significant differences in some volatile aroma components between the two types of tobacco leaves， and there are certain rules in the two analysis results.

Key words： Yunnan; fresh-sweetness scent; strips; fines; volatile aroma and flavor components; difference analysis

Foundation item： Yunnan Scientific Research and Technology Plan Project（2017ZE027）

0 引言

【研究意義】云南煙葉作為西南高原生態區清甜香型的代表，以干草香、清甜香和青香為主香韻，以蜜甜香、醇甜香、烘焙香、木香、酸香、焦香和木香為輔助香韻（羅登山等，2019），其優良的香韻特征和感官質量是生產中式卷煙無法替代的重要煙葉原料。煙葉通過打葉復烤工藝被加工成煙片和煙梗，在此過程中，由于機械外力的作用，會產生部分碎煙。根據碎煙的尺寸規格進行分類利用，一般分為>6.4 mm、3.2～6.4 mm、0.8～3.2 mm和<0.8 mm 4個規格，尺寸規格細小的碎煙由于耐加工性較差，且含有一定比例的短梗和梗簽，無法達到作為葉組配方原料直接應用的要求，一般用作煙草薄片原料和煙草提取物原料（陳家東等，2000;徐若飛等，2005）。因此，運用分析方法對云南清甜香典型片煙和非典型碎煙間的揮發性成分進行對比，發掘2類煙葉在揮發性成分含量方面的差異性和規律性，對研究云南清甜香煙葉風格特色關鍵致香成分及非典型碎煙深加工具有重要意義。【前人研究進展】近年來，關于云南煙葉的研究主要集中在常規化學成分分析、化學成分與相關要素相關分析、致香成分與產區或煙葉品種的相關分析、感官評價等方面。敖金成等（2015）研究發現云南8個烤煙有機生態產區的初烤煙葉常規化學成分存在明顯差異，區域特征明顯聚為4類，煙葉整體的安全性較高;黃愛纓等（2015）研究發現，云南昭通10個植煙生態區的上、中部煙葉致香物質質量分數明顯高于下部煙葉，并指出等級（部位）是對煙葉致香物質質量分數綜合影響最大的因素;陳長清等（2017）研究表明，云南煙葉與津巴布韋煙葉在常規化學成分、中性致香成分和感官評價方面差異相對突出，通過以云南煙葉為基礎，配以國內外不同地區和等級的煙葉可達到替代津巴布韋煙葉的效果;陳劍明等（2017）研究發現，不同類型的水溶性糖含量與云南主產煙區煙葉感官質量各指標存在一定的相關性，水溶性糖含量在一定程度上影響煙葉的感官質量;侯英等（2017）研究表明，總體上云南不同產區的紅花大金元煙葉在化學成分和感官質量上均具有較強的區域特征，但煙區不同導致煙葉各項化學指標顯著的差異性和變異程度;高占勇等（2019）以2018年的石林紅花大金元和文山硯山K326 2個打煙后煙片為研究對象，在分析出的六大類共計67種揮發性致香成分中，有五大類合計66種成分的含量與煙片面積呈負相關對數型趨勢，且不同片型煙片的化學特性存在明顯差異;范幸龍等（2020）將云南4個生態區482份中部煙葉作為研究對象，通過逐步回歸分析顯示，糖堿比和氮堿比是影響滇東、西2個生態區煙氣綜合品質的主要因素，鉀氯比則是影響滇中、西、南3個生態區煙氣綜合品質的主要因素。【本研究切入點】目前，關于云南煙葉不同產區、不同品種和不同等級間的對比分析以及云南煙葉與國內外煙葉的對比研究均有報道，但未見云南清甜香典型片煙和非典型碎煙間揮發性致香成分的對比分析。【擬解決的關鍵問題】運用氣相色譜/質譜法（GC/MS）和熱脫附—氣相色譜/質譜法（ATD-GC/MS）分別對2類煙葉的揮發性致香成分進行對比分析，并以典型煙葉中揮發性成分的相對含量顯著高于非典型碎煙作為分析目的，深入挖掘2類煙葉具有顯著性差異的揮發性致香成分，為云南煙葉在中式卷煙葉組配方和加香加料配方設計中的應用，以及低次煙葉深加工方面提供參考依據。

1 材料與方法

1. 1 試驗材料

選取2個云南清甜香典型片煙煙葉，分別為紅河上部桔黃色1級煙葉（簡稱紅河B1F，品種為K326，2014年）和文山/硯山中部桔黃色3級煙葉（簡稱文山/硯山C3F，品種為K326，2016年）;非典型碎煙共9個，以產區和等級分為3組，分別為紅河碎煙組：紅河中部桔黃色3級煙葉、上部桔黃色3級煙葉和下部桔黃色2級煙葉（分別簡稱為紅河C3F、紅河B3F和紅河X2F，品種為K326，2018年）;曲靖碎煙組：曲靖中部桔黃色3級煙葉、上部桔黃色3級煙葉和下部桔黃色2級煙葉（分別簡稱為曲靖C3F、曲靖B3F和曲靖X2F，品種為云煙87，2018年）;石林碎煙組：石林中部桔黃色3級煙葉、上部桔黃色3級煙葉和下部桔黃色2級煙葉（分別簡稱為石林C3F、石林B3F和石林X2F，品種為紅花大金元，2018年）。煙葉樣品由云南中煙工業有限責任公司提供。乙醇（食用級）購自中山市華士達生物科技有限公司。主要儀器設備：煙葉切絲機QS-1（開封捷利美嘉機械設備有限公司）、中藥磨粉機JYS-M01（杭州九陽小家電有限公司）、冷凍離心機DL-6M（湘儀離心機儀器有限公司）、旋轉濃縮器（上海申生科技有限公司）、熱脫附TurboMatrix 650 ATD（美國PerkinElmer公司）和HP 7890GC-5977MS氣相色譜—質譜聯用儀（美國安捷倫公司）。

1. 2 GC/MS分析煙葉揮發性致香成分

1. 2. 1 煙葉揮發性致香成分制備工藝流程 煙葉→切絲、粉碎、過篩→稱取煙絲→水蒸氣蒸餾→有機溶劑萃取→濃縮→快速層析分離→乙醇萃取→濃縮。將2個清甜香典型片煙煙葉和9個非典型碎煙分別按此工藝流程得到煙葉揮發性致香成分，每個煙葉樣本平行進行3次試驗。

1. 2. 2 GC/MS分析測定條件 GC條件：色譜柱HP-INNOWAX（30 m×250 μm×0.25 μm）;進樣口溫度250 ℃;載氣為氮氣;柱溫箱為程序升溫，起始溫度40 ℃保持1 min，以1.5 ℃/min升至160 ℃保持5 min，以3 ℃/min升至250 ℃并保持10 min;分流比5∶1;橫流模式，流速5.0 mL/min。

MS條件：離子源溫度250 ℃;四級桿溫度150 ℃;EI離子源70 eV;質量掃描范圍30～490 amu;采用NIST14進行檢索。

1. 3 ATD-GC/MS分析煙葉中重要揮發性致香成分

選擇14種重要揮發性致香成分作為分析對象，包括茄酮、β-二氫大馬酮、β-大馬酮、香葉基丙酮、苯甲醇、苯乙醇、β-紫羅蘭酮、巨豆三烯酮4個同分異構體、二氫獼猴桃內酯、3-羥基-β-二氫大馬酮和3-氧代-α-紫羅蘭醇。這些致香成分對煙葉或卷煙的香氣特色及感官質量影響顯著，且在煙用香精香料的開發上廣為應用（閆克玉，2002）。

1. 3. 1 ATD-GC/MS分析前處理工藝 煙葉樣本切絲，40 ℃下烘干2 h，磨粉過篩后得60目規格煙末。熱脫附管用熱脫附儀進行老化后，加入干凈的玻璃棉，然后稱取煙末樣品0.0200 g置于熱脫附管中，再塞入干凈玻璃棉堵住煙末上方;用微量注射器吸取5 μL濃度約0.015%的煙酸甲酯內標溶液，注射至煙末上，每個煙葉樣本平行進行3次試驗。

1. 3. 2 ATD-GC/MS分析測定條件 熱脫附ATD條件：一級脫附（樣品脫附）溫度100 ℃，脫附時間15 min;脫附流量45.0 mL/min;吸附阱溫度-30 ℃;二級脫附（吸附阱脫附）溫度300 ℃，脫附時間2 min;進樣壓力103.425 kPa。

GC條件：色譜柱HP-INNOWAX（30 m×250 μm×0.25 μm）;載氣為氦氣;恒壓模式103.425 kPa;分流比1∶20;柱溫箱為程序升溫，起始溫度50 ℃保持3 min，以3 ℃/min升至200 ℃，以20 ℃/min升至220 ℃并保持10 min[。]

MS條件：傳輸線溫度240 ℃;EI離子源70 eV;離子源溫度230 ℃;四級桿溫度150 ℃;檢測模式選擇離子監測（SIM）;溶劑延遲18 min。

1. 4 統計分析

采用Excel 2010對試驗數據進行處理和統計，SPSS 18.0進行顯著性差異分析。顯著性差異分析著重分析各煙葉組之間的差異，在每個煙葉樣本的3組平行分析結果中隨機挑選1組數據，各碎煙組分別由同產地3個不同部位碎煙的隨機1組分析數據組成，而典型片煙組僅有2個煙葉，因此在2個典型片煙的各自3組平行分析結果中隨機挑選1組分析數據后，在剩余4組分析結果中再隨機選擇1組分析數據，保證顯著性差異分析中典型片煙組和非典型碎煙組均有3組分析數據。

2 結果與分析

2. 1 云南清甜香典型片煙和非典型碎煙揮發性致香成分GC/MS分析結果

對11個煙葉樣本的揮發性致香成分進行GC/MS分析，各樣本揮發性致香成分的總離子流見圖1～圖4。在成分鑒定的過程中發現化合物種類沒有明顯差異，在保證盡可能地鑒定出揮發性致香成分中所有揮發性成分的基礎上，同時剔除掉無效峰和干擾峰，確定53個有效峰進行鑒定，從11個煙葉樣本鑒定出共有的40個化合物（表1）。其中，酮類化合物種類最多，達17種，醇類化合物10種，醛類化合物4種，雜環類化合物5種（包括煙堿），烯烴類化合物2種，酸類和內酯類化合物各1種。在鑒定出的化合物類型中，醇類和酮類化合物數量之和占總化合物數量的60%以上。

在11個煙葉樣本的揮發性致香成分中，相對含量較高的致香成分（相對含量平均值>1.000%）有茄酮（6.188%）、β-大馬酮（2.947%）、巨豆三烯酮I（1.518%）、巨豆三烯酮II（6.546%）、巨豆三烯酮III（1.121%）、巨豆三烯酮IV（5.365%）、苯甲醇（4.175%）、苯乙醇（2.120%）、二氫-β-紫羅蘭醇（1.050%）、西柏三烯二醇（12.677%）、糠醛（1.287%）、苯乙醛（2.205%）、煙堿（20.354%）、2-乙酰基吡咯（1.103%）、吲哚（1.215%）和二氫獼猴桃內酯（1.050%）。其中，西柏三烯二醇和煙堿的相對含量平均值最高，均超過10.000%;巨豆三烯酮的4個同分異構體相對含量平均值也均超過1.000%，且相對含量平均值總和達14.550%。

由表1可看出，2個典型片煙中的酮類化合物相對含量較突出，分別達46.073%和45.188%，而9個非典型碎煙的酮類化合物相對含量均未超過30.000%;醇類和醛類化合物相對含量方面，典型片煙和非典型碎煙差異較小;烯烴類和酸類化合物種類較少，2類煙葉的總相對含量差異也不明顯。在雜環類化合物相對含量方面，2個典型片煙分別為5.896%和8.242%，9個非典型碎煙為16.067%～37.323%，然而將其中的煙堿去除后，典型片煙和非典型碎煙在總相對含量上差異不明顯，這也突出了典型片煙的煙堿相對含量明顯低于非典型碎煙的情況。此外，11個煙葉樣本揮發性致香成分中共有的內酯類化合物——二氫獼猴桃內酯，2個典型片煙的相對含量也明顯高于9個非典型碎煙。

2. 2 云南清甜香典型片煙和非典型碎煙揮發性致香成分相對含量顯著性差異分析結果

通過對云南清甜香典型片煙和非典型碎煙進行GC/MS分析（表1）可知，在已鑒定出的40種揮發性成分中，典型片煙的大部分成分相對含量高于或接近非典型碎煙，為深入發掘2類煙葉揮發性成分相對含量的差異性，運用SPSS 18.0對2類煙葉揮發性致香成分的GC/MS分析結果進行數據處理，并以典型片煙中揮發性成分相對含量顯著高于非典型碎煙作為分析目的，結果見表2。

從表2可看出，典型片煙中有14種揮發性致香成分含量均顯著高于非典型碎煙（P<0.05，下同）;其中有10種揮發性致香成分在3組非典型碎煙之間無顯著差異（P>0.05，下同），分別為甲基庚烯酮、4-環戊烯-1，3-二酮、β-大馬酮、β-紫羅蘭酮環氧化物、脫氫二氫-β-紫羅蘭酮、3，4-脫氫-β-紫羅蘭酮、巨豆三烯酮I、巨豆三烯酮IV、二氫獼猴桃內酯和3-羥基-β-二氫大馬酮;而2-乙酰基呋喃在石林碎煙中的相對含量顯著高于曲靖碎煙，曲靖碎煙的相對含量顯著高于紅河碎煙;桉油烯醇在紅河碎煙中的相對含量顯著高于曲靖碎煙，但石林碎煙的相對含量與紅河和曲靖碎煙無顯著差異;對于巨豆三烯酮II，石林碎煙的相對含量顯著高于紅河和曲靖碎煙，但后兩者間無顯著差異;對于巨豆三烯酮III，石林碎煙的相對含量顯著高于曲靖碎煙，但紅河碎煙的相對含量與石林和曲靖碎煙無顯著差異。

2. 3 云南清甜香典型片煙和非典型碎煙重要致香成分半定量分析結果

運用ATD-GC/MS對11個煙葉樣本的14種重要致香成分進行半定量分析，結果（表3）顯示，紅河片煙和文山/硯山片煙在14種重要致香成分的總含量上差異較小，而各致香成分的相對含量各有高低，由于紅河片煙和文山/硯山片煙在煙葉產區、部位和年份上存在差異，導致在這些重要致香成分的相對含量上未發現明顯規律。而在3組相同產區不同部位的非典型碎煙分析結果中，致香成分的相對含量大多表現為中部煙>上部煙>下部煙的趨勢，3組非典型碎煙同時顯示這種趨勢的揮發性致香成分有β-紫羅蘭酮、巨豆三烯酮I、巨豆三烯酮II、巨豆三烯酮IV、二氫獼猴桃內酯和3-氧代-α-紫羅蘭醇，2組碎煙同時具有這種趨勢的致香成分有β-二氫大馬酮、β-大馬酮、巨豆三烯酮III和苯乙醇。此外，3組非典型碎煙的14種致香成分相對含量總和也表現為中部煙>上部煙>下部煙的趨勢。

2. 4 云南清甜香典型片煙和非典型碎煙重要致香成分半定量含量顯著性差異分析結果

為進一步了解2類煙葉的14種致香成分在ATD-GC/MS分析方法中的含量對總量差異的影響，以及驗證2.2中揮發性致香成分相對含量的差異性分析結果，同樣利用SPSS 18.0對云南清甜香典型片煙和非典型碎煙重要致香成分的ATD-GC/MS分析結果進行數據處理，以典型片煙中顯著高于非典型碎煙的揮發性成分相對含量作為分析目的，分析結果見表4。

由表4可看出，在設定的14種重要致香成分中，典型片煙有8種揮發性致香成分含量顯著高于3組非典型碎煙，且3組非典型碎煙之間無顯著差異，包括β-大馬酮、巨豆三烯酮的4個同分異構體、二氫獼猴桃內酯、3-羥基-β-二氫大馬酮和3-氧代-α-紫羅蘭醇。這些成分作為煙草中有代表性的重要揮發性致香成分，在一定程度上證明云南清甜香典型片煙與非典型碎煙在致香成分上存在差異性，而這8個顯著差異性成分中有7個與2.2中揮發性致香成分相對含量存在顯著性差異的成分一致，僅3-氧代-α-紫羅蘭醇除外，而該成分未在2.1揮發性致香成分的分析中鑒定出來，可能與揮發性致香成分的制備工藝有關。

3 討論

香氣是衡量烤煙煙葉品質的核心內容之一，而烤煙煙葉的香氣主要來源于烤煙中的致香成分。煙草中的重要致香成分按照官能團進行分類包括酮類、醇類、酸類、醛類、酚類和烯烴類等化合物（倪弋婷等，2013），有研究表明酮類和醇類化合物是煙草中最重要的致香組分（宣曉泉等，2007），因此本研究將云南清甜香典型片煙和非典型碎煙共計11個煙葉樣本通過設計的工藝流程，制備出以酮類和醇類化合物為主的揮發性致香成分，并通過GC/MS對所制備的揮發性致香成分進行分析。在已鑒定的40種共有揮發性成分中，2個典型片煙和9個非典型碎煙均以酮類和醇類化合物為主，兩者數量之和占總化合物數量的60%以上，達到了揮發性致香成分設計工藝的目的。烤煙煙葉中的重要致香成分按照香氣前體物分類法分成4類，分別為類胡蘿卜素類、類西柏烷類、苯丙氨酸類和棕色化反應類化合物。本研究中ATD-GC/MS分析所設定的14種致香成分均為其中的代表性重要香氣物質，這些成分也是煙葉中重要致香成分的研究熱點（李偉等，2013;堯珍玉等，2017;董惠忠等，2019）。其中，β-二氫大馬酮、β-大馬酮、香葉基丙酮、β-紫羅蘭酮、巨豆三烯酮、二氫獼猴桃內酯、3-羥基-β-二氫大馬酮和3-氧代-α-紫羅蘭醇屬于類胡蘿卜素代表性的降解香氣產物，選擇多種該類香氣成分作為研究對象是因為類胡蘿卜素降解香氣產物對煙葉的香氣影響較大（劉金霞等，2011;史宏志等，2012）;而茄酮是類西柏烷類化合物中的重要香氣物質，苯甲醇和苯乙醇則是苯丙氨酸類化合物代表香氣物質。由于棕色化反應較復雜，部分反應機理尚未明確（景延秋等，2005），因此本研究未選擇棕色化反應類的香氣物質作為研究對象。

非典型碎煙在卷煙適用性方面屬于低次煙葉，低次煙葉香氣差，雜氣明顯，吃味和余味均較差，無法直接在卷煙葉組配方中使用的同時，還造成一定的庫存和環境污染壓力（王建兵等，2017;陸炳祥和張德祥，2019）。而在內在成分方面，有研究表明，低次煙葉和典型片煙在致香成分種類上差異不明顯，僅在含量方面存在一定差異，低次煙葉感官品質較差主要是由于低次煙葉身份薄，油分少，內在化學成分比例不協調（邱承宇等，2002;瞿先中等，2014）。為驗證和探索典型片煙和非典型碎煙在致香成分上的差異，本研究著重結合2種分析方法的結果進行致香成分含量方面的顯著性差異分析。

運用SPSS 18.0對2類煙葉揮發性致香成分的GC/MS結果進行分析，發現典型片煙有14種揮發性香氣成分的相對含量顯著高于非典型碎煙，包括甲基庚烯酮、2-乙酰基呋喃、4-環戊烯-1，3-二酮、β-大馬酮、β-紫羅蘭酮環氧化物、桉油烯醇、脫氫二氫-β-紫羅蘭酮、3，4-脫氫-β-紫羅蘭酮、巨豆三烯酮的4個同分異構體、二氫獼猴桃內酯和3-羥基-β-二氫大馬酮;針對11個煙葉樣本進行ATD-GC/MS分析，在設定的14種重要致香成分的半定量分析結果中，發現典型片煙的成分總含量明顯高于各非典型碎煙，而β-大馬酮、巨豆三烯酮的4個同分異構體、二氫獼猴桃內酯、3-羥基-β-二氫大馬酮和3-氧代-α-紫羅蘭醇這8種成分在典型片煙上顯著高于非典型碎煙。這與部分學者研究不同尺寸片煙內在致香成分含量的差異性分析結果具有一致性。劉超等（2018）在對打葉后不同尺寸濃香型片煙的分析中發現，尺寸25.40～42.00 mm片煙的大部分中性致香成分含量及總量均為最高，尺寸2.36～6.35 mm的片煙相比高于該尺寸的片煙，除新植二烯之外的各類中性致香成分含量及總量均為最低。而本研究所篩選的云南清甜香典型片煙和非典型碎煙分別屬于25.40～42.00和2.36～6.35 mm的尺寸范圍內，研究結果的一致性也表明片煙尺寸不同是影響片煙內在化學成分差異的重要因素之一。

11個煙葉樣本揮發性致香成分GC/MS分析與重要致香成分ATD-GC/MS分析的成分含量差異存在較顯著的一致性，2種分析方法中存在含量顯著性差異的致香成分分別有14種和8種，其中有7種致香成分一致，分別為β-大馬酮、巨豆三烯酮的4個同分異構體、二氫獼猴桃內酯和3-羥基-β-二氫大馬酮。說明分析方法建立的合理性，也基本達到預定的分析目的，更佐證了2種分析方法均呈現含量顯著差異性的7種致香成分的重要性，在一定程度上可作為影響典型和非典型煙葉特征香韻與感官品質的重要致香成分。

此外，在ATD-GC/MS的重要致香成分半定量分析結果中，發現各組同產區非典型碎煙存在致香成分含量以中部煙>上部煙>下部煙的趨勢，其中3組碎煙同時存在這種趨勢的致香成分有6種，2組碎煙同時存在這種趨勢的致香成分有4種，且3組碎煙的14種致香成分含量總和也同樣表現出該趨勢，與王東山等（2005）對云南保山不同等級煙葉重要香味物質進行定性定量分析發現巨豆三烯酮的4個同分異構體及醇類、酮類化合物的總含量存在中部煙>上部煙>下部煙的趨勢，周桂園等（2014）對云南主產煙區不同煙葉致香成分含量進行分析發現紅大煙葉的苯丙氨酸類含量和NC297煙葉的致香成分總含量、類西柏烷類及苯丙氨酸類含量出現中部煙>上部煙>下部煙的趨勢一致，但也存在一些差別，可能是由于在研究中針對的煙葉樣本和運用的分析方法不同所造成的。但在一定程度上共同佐證了煙葉部位是影響煙葉中致香成分含量差異的重要因素之一。

本研究開展云南清甜香典型片煙和非典型碎煙間揮發性致香成分的對比分析，從中找到2類煙葉間具有差異性和規律性的揮發性致香成分，下一步可在此基礎上有針對性地增加煙葉樣本范圍和分析方法的多樣性，深入研究云南各類型煙葉的內在致香成分的差異和規律，對云南清甜香煙葉致香機理的研究具有一定的參考意義，也可為低次煙葉的深加工和價值提升提供基礎研究方面的技術信息。

4 結論

通過GC/MS和ATD-GC/MS對云南清甜香典型片煙和非典型碎煙的揮發性致香成分進行差異性分析，發現2類煙葉間部分揮發性致香成分存在顯著性差異，且2種方法的分析結果存在一定的規律，可為云南煙葉清甜香韻致香機理研究和非典型碎煙的深加工再利用提供一定的技術參考。

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（責任編輯 羅 麗）