副乳癌和常規胸部乳腺癌HES1、HER2表達差異及臨床病理特征分析

宋天豹，王建軍，孫小虎，王保信，陳紹華，李國明，呂建男

副乳癌(accessory breast cancer，ABC)系指正常乳腺以外出現乳腺組織，占女性乳腺疾病的1%～2%，占副乳癥的1%～5%，是一種少見的乳腺疾病[1]，ABC病人以腋下腫塊(多為腋窩下或腋前無痛性腫物)為首發癥狀，由于腋窩處血液和淋巴結豐富易出現早期轉移，臨床發現時多已處于晚期，因此ABC生存率明顯低于常規胸部乳腺癌(mammary cancer，MC)[2]。與常規胸部乳腺一樣，副乳也受內分泌影響，可出現與常規胸部乳腺同樣的良惡性腫瘤(如小葉增生、導管擴張及纖維腺瘤等)，易與乳腺外腫瘤相混淆[3]。目前磁共振成像掃描在ABC診斷中價值尚不明確，但研究[4]證實超聲引導下細針吸取細胞學或粗針穿刺活檢有助于ABC的早期診斷，因此臨床中可從分子水平上探究ABC與常規胸部MC的有效診斷方案。轉錄因子發狀分裂相關增強子1(hairy and enhancer of split1，HES1)是細胞分化、細胞周期調控的重要因子，在腫瘤疾病中呈高表達[5]，其在ABC中表達情況國內尚未見報道；人類表皮生長因子受體2(human epidermal growth factor receptor 2，HER2)是決定MC分子分型的重要分子生物學標志物，其在常規胸部MC組織中表達的研究[6]較多見，但有關其在ABC與常規胸部MC中表達差異的研究并不多見。本文旨在探討ABC和常規胸部MC HES1、HER2表達差異及其與臨床病理特征的關系，以期為ABC診治提供參考信息。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年1月至2016年1月我院確診的ABC病人(ABC組)和常規胸部MC病人(MC組)，各30例?；仡櫺苑治霾∪说呐R床診治及隨訪資料。其中ABC組女28例，男2例；年齡30～69歲；腋窩下或腋前ABC 29例、腹股溝處ABC 1例。MC組均為女性，年齡28～72歲。

納入標準：(1)符合ABC或MC診斷標準[7]，術后病理證實有明確的ABC或常規胸部MC；(2)年齡≥18歲，癥狀可見有或無腫塊疼痛、腫脹、泌乳、溢液、破潰等；(3)接受手術治療；(4)臨床資料完善；(5)入組前未接受ABC、常規MC放化療藥物治療。

排除標準：(1)合并其他臟器惡性腫瘤；(2)入選前已進行過放射治療、化學治療或其他綜合治療；(3)入院時已發生遠處轉移而無法手術；(4)相關資料欠缺。

1.2 治療方法 ABC組行ABC擴大區段切除加腋窩淋巴結清掃10例，乳腺癌改良根治術11例，乳腺癌根治術6例，ABC區段切除術3例；MC組行乳腺癌改良根治術20例，乳腺癌根治術6例，保乳術4例。術后均嚴格參照相關指南進行術后化療、放療及內分泌治療。2組術后病人的放化療和內分泌治療均參照MC治療指南[7]進行。術后隨訪2組病人復發情況。

1.3 HES1、HER2表達檢測 免疫組織化學法檢測：術前取ABC病人、MC病人癌組織標本，常規石蠟包埋切片，免疫組織化學法檢測ABC、常規MC組織中HES1、HER2表達。步驟：脫蠟水化后，37 ℃ 3%H2O2溫箱孵育，阻斷內源性過氧化物酶，PBS液重復洗滌3次后檸檬酸緩沖液(pH值6.0)微波修復，室溫冷卻30 min；非免疫動物血清37 ℃溫箱封閉，PBS液重復洗滌3次，滴加一抗、二抗，辣根過氧化酶標記鏈霉素親和復合物，37 ℃溫箱孵育后，DAB染色、蘇木素復染、脫水、透明、封片。由兩位病理科醫師采用雙盲法，依據染色強度(陰性、弱性、適中、強性對應計0、1、2、3分)、陽性染色細胞百分比(0%、>0%～10%、>10%～25%、>25%～50%、>50%對應計0、1、2、3、4分)評定免疫組織化學分析結果，染色強度+陽性染色細胞百分比總分4～8分提示HES1或HER2陽性。

1.4 統計學方法 采用χ2檢驗和Fisher′s確切概率法。

2 結果

2.1 ABC和MC組織HES1、HER2陽性表達率比較 2組病人HES1和HER2陽性表達率差異均無統計學意義(P>0.05)(見圖1～4、表1)。

表1 HES1、HER2在不同組織中的表達情況[n;百分率(%)]

2.2 不同病理特征病人HES1陽性表達情況 ABC組和MC組病人HES1陽性表達率在不同病理類型、組織學分級、臨床分期和是否淋巴結轉移、三陰乳腺癌間差異均有統計學意義(P<0.05～P<0.01)，ABC組HES1陽性表達率在是否復發病人間差異亦有統計學意義(P<0.05)。2組組間HES1陽性表達在淋巴結轉移分布上差異有統計學意義(P<0.05)(見表2)。

2.3 不同病理特征病人HER2陽性表達情況 ABC病人HER2陽性表達率在不同病理類型、組織學分級、臨床分期和是否三陰乳腺癌及復發間差異均有統計學意義(P<0.05～P<0.01)；MC病人HER2陽性表達率在不同病理類型、臨床分期和是否淋巴結轉移、三陰乳腺癌間差異均有統計學意義(P<0.01)。2組組間HER2陽性表達在病理類型分布上差異有統計學意義(P<0.01)(見表3)。

表3 2組不同病理特征病人HES1陽性表達情況(n)

3 討論

雖ABC發病率較低，但與常規MC病人相比，早期ABC臨床癥狀缺乏特異性，且生化指標無明顯變化，初步診斷易誤診為乳腺腋尾部癌、乳腺癌的腋窩淋巴結轉移、隱性乳腺癌等，此外ABC位置較為特殊，其在鉬靶上難以完全顯示，臨床當中尚缺乏行之有效的ABC早期診斷手段。隨著分子生物學迅速發展，近年來分子生物學標志物在乳腺癌診斷中的研究日益廣泛[8]。HES1屬于堿性螺旋-環-螺旋基因轉錄抑制因子之一，有抑制組織細胞特征性分化的作用，可直接影響細胞分化以及增殖、細胞凋亡。研究[9]表明，HES1可阻礙神經干細胞以及小腸前體細胞分化，確保其保持未分化狀態。國內外學者[10-11]研究證實HES1在卵巢癌、結腸癌、非小細胞肺癌等惡性腫瘤中呈高表達，且其表達水平與病人預后密切相關。HER2基因屬于一種表皮生長因子受體家族成員，主要定位于染色體17q12-21.32，其可激活下游酪氨酸激酶使之磷酸化，有效調節腫瘤細胞增殖。研究[6]證實，HER2在乳腺癌組織中高表達往往預示著復發轉移風險高、預后差。鑒于此，分析ABC病人HES1、HER2表達與常規胸部MC病人的差異及其與病理特征的關系，將有望為ABC術前診斷及預后評估提供參考。

既往報道[12-13]顯示，HES1作為腫瘤細胞關鍵轉錄因子，其異常表達與腫瘤疾病發生、細胞分化、腫瘤惡性程度、腫瘤干細胞的成瘤性等生理及病理變化緊密相關；HER2表達與乳腺癌病人淋巴結轉移、腫塊大小、病理學分級間亦具有明顯的相關性。本研究發現，ABC與MC組織中HES1、HER2陽性表達率無明顯差異，而ABC組/MC組組內HES1陽性表達率在不同病理類型、組織學分級、臨床分期、淋巴結轉移、三陰乳腺癌病理特征間差異均有統計學意義。其中浸潤性導管癌、三陰乳腺癌具更高的陽性表達率，可能是由于浸潤性導管癌、三陰乳腺癌惡性程度更高，且隨臨床分期增高，淋巴結轉移、腫瘤細胞浸潤轉移范圍也更大，故而浸潤性導管癌、三陰乳腺癌、臨床分期高、組織學分級越高，以及合并淋巴結轉移的ABC、常規胸部MC病人癌組織中HES1、HER2陽性表達率更高[14]。本研究結果顯示，ABC組、MC組組間HES1陽性表達率在是否淋巴結轉移間差異顯著，表明HES1陽性表達率與ABC和MC病理特征密切相關；ABC病人HES1陽性表達率越高，其組織學分級越高和臨床分期越晚，因HES1表達與ABC的侵襲能力有明顯相關性，其可通過異常調控ABC干細胞自我更新能力，從而有效促進癌細胞增殖及轉移，表現為組織學分級及臨床分期晚，與早期李曉瑛等[15]研究指出的在乳腺癌病人中HES1陽性表達與TNM分期顯著正相關的結論類似。本研究結果還顯示，ABC組內HER2陽性表達率在不同病理類型、組織學分級、臨床分期、三陰乳腺癌、復發病理特征間差異顯著，而MC組內HER2陽性表達率在不同病理類型、臨床分期、淋巴結轉移、三陰乳腺癌病理特征間差異顯著，提示ABC病人術前HER2陽性表達率越高，浸潤性導管癌、三陰乳腺癌及復發可能性越高，而MC病人HER2陽性表達率越高，三陰乳腺癌風險越高，與早期學者[16]研究指出的乳腺癌病人中HER2表達與乳腺癌病理類型、三陰乳腺癌及復發密切相關的結論基本相符。2組組間HER2陽性表達率在病理類型分布上差異顯著，提示或可通過不同病理類型病人HER2陽性表達率對兩種乳腺癌進行鑒別。HER2其受體蛋白可通過同源或異源二聚體方式發生偶聯，有效激活下游酪氨酸激酶使其磷酸化，促進腫瘤增殖，在腫瘤病理類型、惡性程度及預后中有一定預測價值[17]。

綜上，術前ABC病人與MC病人HES1、HER2陽性表達率無明顯差異，但術前HES1、HER2陽性表達率在預測ABC病人、MC病人病理特征方面可能有一定積極作用，可為臨床合理治療方案的制定提供參考。