趙 瑞,楊世杰,楊 艷,段玉娟
昆明雪蘭牛奶有限責任公司,云南昆明 650217
三聚氰胺是一種含氮質量分數高達66.6%的化工原料,常用于生產三聚氰胺-甲醛樹脂的表面涂層、塑料、阻燃劑等[1]。由于凱氏定氮法并不能將非蛋白氮與蛋白質中的氮進行良好的區分,曾有不法商家利用該蛋白質檢測方法的漏洞,在乳制品中人為添加三聚氰胺以提高乳制品蛋白質含量的測得值。2008年震驚全國的三聚氰胺事件由此而來。然而《國際化學品安全手冊》(第三卷)和國際化學品安全卡片中均有說明:三聚氰胺的大鼠口服半數致死量大于3g/kg·bw,被認為輕微毒性,長期或反復大量攝入三聚氰胺可能導致膀胱結石、腎結石。三聚氰胺本身毒性較低,但通過食物攝入體內進入腎細胞后,三聚氰胺會與氰尿酸結合形成結晶沉積,從而造成腎結石并堵塞腎小管,并有可能導致腎衰竭。泌尿系統尚未成熟的嬰幼兒對三聚氰胺的反應則更為敏感,嬰幼兒同時又是奶粉食用的最大群體。因此,《GB/T22388—2008原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測方法》中規定了原料乳及乳制品中三聚氰胺的限量值分別為:嬰兒配方食品限量要求1mg/kg;其他食品限量要求2.5 mg/kg[2]。
現行有效的乳制品中三聚氰胺的檢測標準及方法有:《GB/T22388—2008原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測方法》,第一法高效液相色譜法(HPLC法),第二法液相色譜-質譜/質譜法(LC-MS/MS法),第三法氣相色譜-質譜聯用法〔包括氣相色譜-質譜法(GC-MS),氣相色譜-質譜/質譜法(GC-MS/MS)〕;《GB/T22400—2008原料乳中三聚氰胺快速檢測液相色譜法》;《SN/T3032—2011出口食品中三聚氰胺和三聚氰酸檢測方法液相色譜-質譜/質譜法》;《SN/T2805—2011出口液態乳中三聚氰胺快速測定拉曼光譜法》;《SN/T3627—2013出口液態原料乳中三聚氰胺的測定極譜法》;《SN/T4538.1—2016商品化試劑盒檢測方法三聚氰胺方法一》酶聯免疫競爭法;《SN/T4538.2—2016商品化試劑盒檢測方法三聚氰胺方法二》,包含酶聯免疫吸附法和膠體金法;《SN/T4538.3—2016商品化試劑盒檢測方法三聚氰胺方法三》為膠體金試紙法;《SN/T4538.4—2016商品化試劑盒檢測方法三聚氰胺方法四》膠體金法;《SN/T4479—2016出口原奶和奶粉中三聚氰胺的檢測方法酶聯免疫吸附法和膠體金法》;《DB34/T863—2008生鮮牛奶中三聚氰胺的測定》,安徽省地方標準,包含液相色譜法以及氣相色譜質譜法;《DB34/T1374—2011生鮮乳中三聚氰胺的測定-酶聯免疫吸附法》。表1對相關標準及檢測方法進行了梳理。

表1 現行有效的三聚氰胺檢測標準、方法、適用樣品、定量限比較
除上述現行標準中采用的檢測方法外,基于紅外光譜、傳感器、免疫熒光、適配體等技術的檢測方法在文獻中亦有相關報道,本文就上述提及的檢測方法進一步予以討論。
基于色譜分離的儀器方法是目前質檢部門及大多第三方檢測機構采用的主要方法。依賴于色譜儀器良好的重復穩定性,成熟的檢測方案、可獲得穩定可靠的檢測數據。
GB/T22400—2008及GB/T22388—2008第一法、DB34/T863—2008第一法均為高效液相色譜法。其中GB/T22400—2008前處理較為簡便,僅使用乙腈作為原料乳中的蛋白質沉淀劑和三聚氰胺提取劑,通過強陽離子交換色譜柱進行分離,使用紫外檢測器(240nm)或二極管陣列檢測器檢測,外標法定量。由于前處理過程簡單,并未對樣品進行細致純化,因此抗干擾性能差,僅適合用作生鮮乳及無添加液態乳的樣品檢測,且所使用的強陽離子交換色譜柱比常用的C18、C8色譜柱昂貴。GB/T22388—2008和DB34/T863—2008的HPLC方法前處理原理大致相同,都是通過三氯乙酸等物質沉淀蛋白后,使用陽離子交換萃取柱凈化樣品,之后通過C18/C8色譜柱進行分離,240nm/235nm波長檢測。
北京市飼料監察所魏秀蓮等[3]采用與G B/T22400—2008類似的方案進行實驗,三聚氰胺在牛奶中的平均回收率在85.9%~98.4%,當添加質量濃度低時,回收率也會相應降低,但回收率也在75%~85%(添加量為0.05mg/kg時,回收率約在78%;添加量過低時,回收率的穩定性不好)君樂寶乳業王玉英等[4]使用三氯乙酸和乙腈提取樣品后經0.45μm濾膜過濾,HPLC分析(色譜柱:C18-4.6mm×250mm×5.0μm,流動相:離子對試劑緩沖液-乙腈(80+20,體積比),流速:1mL/min,進樣量:20μL;柱溫:40℃;波長:240nm)在2.0ppm、2.5ppm、4ppm的加標測試中獲得了95.15%~99.12%的加標回收率,處理時間相對GB/T22388—2008第一法約縮短3h,但該方法的檢出限較高,為0.5ppm。
試樣經提取后,經陽離子交換固相萃取柱凈化,用液相色譜-質譜/質譜法進行測定。SN/T3032—2011及GB/T22388—2008第二法二者均為LC-MS/MS法,二者稍有不同。GB/T22388—2008第二法前處理過程與其第一法基本一致,采用強陽離子交換與反向C18混合填料色譜柱分離,MS/MS外標法定量。SN/T3032—2011則是主要使用乙腈和鹽酸作為蛋白沉淀劑和三聚氰胺提取劑,并在提取過程中加入三聚氰胺同位素內標,提取液經陽離子交換固相萃取柱凈化,采用HILIC色譜柱分離,MS/MS內標法定量。LC-MS/MS中流動相不能使用難揮發性的鹽,所以不能使用離子對試劑,C18/C8反相色譜柱不能作為LC-MS/MS的分離柱。離子交換色譜柱能夠滿足液相色譜一質譜法對流動相的要求,所以常使用的流動相為乙酸銨/甲酸銨緩沖液[5]。
國家食品質量安全監督檢驗中心王浩等[6]將嬰幼兒配方乳粉樣品經堿性乙腈提取,以MGⅢ-C18色譜柱分離,流動相為60mmol/L乙酸銨溶液(含0.4‰甲酸)和甲醇,梯度洗脫,流速為0.25mL/min。采用多反應監測正離子或負離子模式,可以同時對嬰幼兒配方乳粉中的三聚氰胺、氯霉素、甲硝唑和洛硝達唑進行快速定性和定量測定。三聚氰胺檢出限可達50ppb,回收率在50~2500ppb加標條件下為60.1%~68.1%。
GB/T22388—2008第三法為GC-MS及GC-MS/MS方法,DB34/T863—2008第二法亦為GC-MS方法。試樣經超聲提取、固相萃取凈化后,進行硅烷化衍生,衍生產物采用選擇例子監測質譜掃描模式(SIM)或多反應監測質譜掃描模式(MRM),用化合物的保留時間和質譜碎片化的豐度比定性,外標法定量。GB/T22388—2008中GC-MS方法定量限可達0.05 mg/kg,GC-MS/MS方法可達0.005 mg/kg。DB34/T863—2008中GC-MS方法檢出限為0.05 mg/kg.
浙江省飼料監察所朱聰英等[7]采用氣相色譜-質譜(GC-MS)法,建立了生鮮乳中三聚氰胺及其類似物的定性定量測定方法。試樣中的三聚氰胺及其類似物經(乙腈∶水∶二乙胺=5∶4∶1,V/V)提取,飽和乙酸鉛溶液沉淀蛋白后,氮氣吹干,用BSTFA進行衍生化,氣相色譜-質譜法測定。采用色譜保留時間和質譜碎片離子豐度比定性,內標法定量。采用SCAN全掃描的方式進行儀器方法學研究,每種化合物確定4 個碎片離子作為監測離子,進行SIM模式定性定量分析。該方法三聚氰胺檢出限為0.1 mg/kg,0.5~50.0 mg/kg的加標回收率為79.2%~110.0%。廣州市質量監督檢測研究院冼燕萍等[8]建立了奶粉中三聚氰胺及其同系物(三聚氰酸、三聚氰酸一酰胺和三聚氰酸二酰胺)含量的氣相色譜-質譜測定方法。樣品經溶劑提取后,取少量提取液氮吹干,硅烷化衍生后,用氣相色譜-質譜法測定。三聚氰胺及其同系物在0.01~0.5 mg/kg呈線性,方法檢出低限為0.15 mg/kg。在添加水平為0.5~2.0 mg/k g時,回收率為9 1.1%~1 0 1.3%,變異系數為2.5%~5.7%。
除國標中使用的色譜方法,亦有其他基于色譜分離技術的方法用于三聚氰胺的檢測。毛細管電色譜是將毛細管柱內填充或鍵合固定相,以電滲流為驅動力,結合了微徑高效液相色譜與毛細管電泳兩者的特點,具有高柱效、快速分離、高選擇性、高精度以及試劑和樣品用量少等優點,但單純的CEC模式易產生氣泡、干柱等問題。而加壓毛細管電色譜(pCEC)通過微型液相色譜泵在毛細管電色譜柱一端施加壓力,壓力的引入使CEC分離過程受pH和緩沖液的限制相對減少,可有效地解決CEC的氣泡問題,且能實現梯度洗脫;用電滲流和泵壓同時驅動流動相,溶質依據它們在流動相與固定相中分配系數的不同和自身電泳淌度的差異得到分離,對復雜樣品顯示出極大的分離能力。上海交通大學藥學院李新燕等[9]以加壓毛細管電色譜(pCEC)技術為平臺,優化了整體柱基于親水作用分離分析奶制品中三聚氰胺的色譜條件。當流動相中乙腈與10 mmol/L磷酸鹽緩沖液的體積比為80∶20,pH值為3.0,電壓為3 kV,檢測波長為215 nm時,三聚氰胺能獲得很好的分離。方法學考察結果表明,合成的親水整體柱具有良好的重現性和滲透性,建立的pCEC分析方法的檢出限為0.05 mg/L、10 mg/L和40 mg/L的加標回收率分別為86%和105.5%。國家食品質量安全監督檢驗中心郭啟雷等[10]建立的p C E C方法在1.0~100 mg/kg質量濃度范圍內線性關系良好(R2=0.999),在牛奶和酸奶中的定量限為2.5 mg/kg,在奶粉中的定量限為10 mg/kg,加標回收率為78.9%~93.5%,相對標準偏差小于5%。上海市農業科學院農產品質量標準與檢測技術研究所饒欽雄等[11]建立了牛奶和奶粉中三聚氰胺的高效毛細管電泳-二極管陣列檢測器(HPCEDAD)檢測方法。分析物在1~100mg/L范圍內線性良好,牛奶和奶粉的定量限分別為0.5 mg/kg和1.0 mg/kg。在添加水平為定量限濃度至50 mg/kg時的回收率為72.2%~97.3%,相對標準偏差為2.1%~3.9%。
利用抗原抗體反應特異性,可以在無需樣品提取的情況下快速的對樣品中的三聚氰胺進行檢測。基于免疫學原理的快速檢測產品,在檢測便利性、靈敏度、檢測通量上具有極大的優勢。
SN/T4538.1—2016、SN/T4538.2—2016、DB34/T1374—2011中均提到了酶聯免疫吸附法,液態奶樣品可直接或經簡單稀釋后用于檢測,具有較大的便利性。目前市售的商品化三聚氰胺ELISA試劑盒,大多基于直接競爭法原理,即孔板中預先包被特異性的三聚氰胺抗體,在孵育時,樣品中的三聚氰胺與辣根過氧化物酶標記的三聚氰胺競爭結合孔板中的抗體,結合到孔板中的辣根過氧化物酶與樣品中的三聚氰胺濃度呈負相關,樣品中三聚氰胺含量越高,則最后顯色越淺,根據樣品及標品的OD值可計算出樣品中的三聚氰胺含量。
商品化試劑盒作為多種試驗要素的集合,因其使用方便、檢測快速,已廣泛應用于日常檢測與科研試驗中,然而試劑盒卻存在著諸多問題,試劑盒本身質量問題、試劑盒在操作過程中使用不當、尚沒有完善的標準或質量評價體系。沈陽農業大學食品學院李霜等[12]對三聚氰胺ELISA試劑盒進行評價研究,從基體的選擇(樣品)、線性試驗、選擇性試驗、回收率試驗、檢測限與定量限試驗、耐變性試驗、批間差試驗、試驗環境等諸多方面進行了探討。
膠體金免疫技術因其具有簡單快速、價格低廉、可單份測定,對儀器設備無依賴、適合基層單位以及個人使用等特點而得到廣泛的應用。采用膠體金技術制備的三聚氰胺試紙條產品也因此在奶戶及原奶驗收環節中較為普及。目前市售的三聚氰胺膠體金試紙條產品,均基于競爭法開發,即三聚氰胺偶聯抗原包被于T線,用于測試樣品中三聚氰胺的含量。在樣品檢測時,樣品中的三聚氰胺與T線抗原競爭結合被納米金顆粒標記的三聚氰胺抗體。在樣品中有高于檢出限的三聚氰胺存在時,T線顏色減淡或消失。SN/T4538.3—2016、SN/T4538.4—2016、SN/T4479—2016中均提到了使用膠體金試紙條作為檢測樣品中三聚氰胺的工具。中國檢驗檢疫科學研究院何田田等[13]對三聚氰胺快速檢測試紙條從靈敏度、選擇性、適用性、耐變性、批件差異等方面進行試驗,并進行了評價。
在膠體金技術的基礎上,使用熒光納米顆粒、量子點、上轉發光材料替代納米金顆粒作為標記物,可在保留膠體金試紙條易用性的同時,增加試紙條產品的靈敏度和穩定性,使得用試紙條對樣品中的三聚氰胺定量檢測成為可能。
當前較常用于食品安全分析的熒光標記物多為時間分辨熒光。稀土離子螯合物的熒光壽命較長(100~1000μs),其發出的熒光稱為時間分辨熒光,如果延遲一定時間(如200μs)后再進行測量,可有效消除本底熒光(1~10ns)的干擾。時間分辨熒光Stokes位移寬,螯合物的熒光發射峰狹窄,可通過波長分辨的方式進一步區別于背景熒光。以稀土離子螯合物作為抗原或抗體的標記物,將時間分辨熒光與免疫分析技術相結合的方法與通常的熒光免疫分析法相比,可有效避免本底熒光的干擾,大大提高檢測的靈敏度和準確性[14]。
量子點是一種半導體納米材料,通常是由鋅、鎘、硒、硫等元素化合而成的,三維尺寸均處于納米范圍內的零維半導體材料,它的半徑小于或接近于激子玻爾半徑。當其受到光或電的刺激時,處于基態的載流子會被激發跳躍到更高的能級,等到這些載流子再回到原激發態時就會發出固定波長的可見光,故也稱量子點為半導體熒光納米晶粒。量子點激發波長寬,發射波長窄、對稱,發光穩定。合肥工業大學食品科學與工程學院趙弟萍建立了一種基于熒光量子點的側向層析試紙檢測新方法,并將該方法用于食品中非法添加劑三聚氰胺的檢測。試驗結果表明,該熒光試紙條對三聚氰胺檢測的肉眼檢測限能達到10ppb,檢測時間為10min[15]。
上轉發光材料(UCP)是一種獨特納米級顆粒,由稀土金屬元素摻雜于晶體的晶格中構成,由主基質、吸收子、發射子三種成分組成。上轉化發光的產生是涉及兩個及多個光子的光學過程,吸收子吸收兩個及以上低能量光子(紅外區),經過一系列內部能量轉換,以非輻射形式將兩個光子的能量連續傳遞給發射子,使其處于激發態,然后接著發生一個返回基態能級的躍遷,釋放一個高能量光子(可見光),完成能量上轉換。上轉發光層析技術即將UCP納米顆粒與DNA、RNA、抗原或抗體等利用分子間相互作用共軛連接,進而應用于生物樣品檢測。具有較高的敏感性、靈活性、安全性、穩定性[16]。
南京師范大學化學與材料科學學院邵科峰等構建了基于石墨烯-殼聚糖復合物修飾電極的免疫傳感器。將石墨烯-殼聚糖復合物與三聚氰胺一起修飾在電極上,利用三聚氰胺抗體和三聚氰胺之間特定反應的競爭模式,以K3Fe(CN)6為探針,通過循環伏安法和差分脈沖伏安法監測免疫反應,對體系中的三聚氰胺進行檢測。對溶液中三聚氰胺的檢測是基于抗體和三聚氰胺之間特定反應的競爭模式實現的。當電極浸入含有三聚氰胺抗體和游離三聚氰胺的溶液中時,固定在電極上的三聚氰胺分子和溶液中游離的三聚氰胺與三聚氰胺抗體發生競爭反應,形成三聚氰胺-抗體復合物,三聚氰胺抗體被吸附在電極上。三聚氰胺-抗體復合物在電極表面的形成導致電極產生位阻,減少了電極活動區域,阻礙了K3Fe(CN)6探針離子到達電極,峰值電流下降。根據免疫傳感器在含有不同質量濃度三聚氰胺溶液中的電化學信號的差異對溶液中游離的三聚氰胺進行檢測。該免疫傳感器檢測線性范圍為0.005~1.5mg/kg,檢測限為0.0002mg/kg,在牛奶中加入0.02~1.2mg/kg的三聚氰胺可獲得104.0%~106.2%的檢測回收率[17]。
與三聚氰胺特異識別的適配體可代替特異性三聚氰胺抗體作為檢測方案中的識別單元。
核酸適配體是通過鏈內堿基間的氫鍵作用折疊形成穩定的發卡、莖環、假結、口袋、凸環和G-四鏈體等二級或三級結構,并與靶標產生空間結構匹配的高親和力和特異性結合的核糖核酸(RNA)和單鏈脫氧核糖核酸(ssNDA)。核酸適配體一般由幾十個核苷酸組成,相對分子質量小、易穿透細胞膜、性質穩定、容易制備和修飾,其結合的靶標范圍廣,包括離子、小分子、蛋白質、細胞和微生物等[18]。
按照與三聚氰胺的識別機制不同,新型核酸適配體生物傳感器大致可以分為四大類分別為:基于胸腺嘧啶(T)-三聚氰胺-胸腺嘧啶(T)錯配和多聚胸腺嘧啶(polyT)核酸適配體的生物傳感器;基于三聚氰胺代替無嘌呤位點(AP位點)處堿基,通過T-三聚氰胺-T錯配形成三鏈DNA結構的生物傳感器;基于指數富集配體系統進化技術(SELEX技術)篩選出的核酸適配體,設計的生物傳感器;基于核酸DNA、汞/銅等離子和三聚氰胺的配位作用的生物傳感器[19]。
上海應用技術大學化學與環境工程學院邢海波等[20]設計合成了能與三聚氰胺特異性結合的適配體,將納米金比色法與適配體的分子識別相結合,確立了一種簡單、高效、快速檢測三聚氰胺的新方法,檢測下限為0.0043mg/L,在牛奶樣品的檢測中,三聚氰胺的加標回收率為90%~120%。
不同物質具有與其分子結構對應的特征拉曼光譜,原料乳、純牛奶和酸奶等樣品經過稀釋、離心、用基于表面增強原理的拉曼光譜技術進行檢測。根據樣品三聚氰胺含量與歸一后拉曼光譜相對強度的對應關系,采用外標法對樣品中三聚氰胺進行測定。SNT2805—2011采用的拉曼光譜法,可對含量高于0.5mg/kg的液態奶樣品進行定量檢測,回收率在80%~100%之間。
武漢大學化學與分子科學學院曲干等[21]利用納米金的表面增強拉曼效應,建立了一種快速、靈敏、無標記、無分離的檢測三聚氰胺的定性及定量分析方法,線性檢測范圍為0.012~0.174mg/L,檢出限(LOD)為0.0023mg/L。
在計算機技術的飛速發展、光學技術和化學計量學方法的不斷進步下,近紅外光譜分析技術在多個領域顯示了其獨特的優勢,其中無損、高效、快速、成本低、無污染的優點,使其明顯優于傳統的分析檢測技術,而且樣品無需預處理,更加便于實現在線分析。上海理工大學醫療器械與食品學院程文宇等通過近紅外光譜結合適當的化學計量學方法,可實現對液態奶樣中三聚氰胺的定性判斷[22]。
SN/T3627—2013采用極譜法對液態乳中三聚氰胺進行檢測。其原理為首先利用膜分離技術,利用滲透膜對三聚氰胺分子的選擇性透過功能從液態乳制品中提取三聚氰胺。三聚氰胺分子中3個氨基基團均具有電化學活性,當電極所加載的電位向陽極掃描時,在堿性溶液介質中能產生特征的氧化還原電位,以特征的氧化還原電位來定性,以特征電位嘗試的的峰電流值定量。該法定量限為2mg/kg。
長沙理工大學化學與生物工程學院羅永豐等[23]報道了一種基于金銀核殼納米粒子(Au@AgCSNPs)檢測乳制品中三聚氰胺的電化學方法。通過層層自組裝技術將二硫蘇糖醇(DTT)、金銀核殼納米粒子(Au@AgCSNPs)、L-半胱氨酸(L-Cys)鍵合在金表面,形成Au/DTT/Au@AgCSNPs/L-Cys修飾傳感膜,檢測限為0.0076mg/L,該修飾電極選擇性和重現性好,用于牛奶樣品中三聚氰胺的檢測,回收率為98.2%~106.0%。
大連理工大學化學學院劉鳳玉等[24]利用三聯吡啶釕電化學發光法在玻璃碳(G C)電極和金(Au)電極上檢測三聚氰胺,檢測限可達0.1nmol/L,檢測奶粉中添加的三聚氰胺樣品,回收率在93%~107%。
色譜方法、免疫學方法、光譜法、電化學方法等方法均可用于三聚氰胺的定性或定量檢測。當前,以色譜方法和免疫學方法較為常用。
高效液相色譜,是大多數食品檢測實驗室常規配置的檢測儀器,HPLC法亦大量被用于日常三聚氰胺的檢測工作,現有的HPLC方法相對于LC-MS/MS或者GC-MS(GC-MS/MS)方法而言,靈敏度偏低,在無人為添加三聚氰胺的情況下,僅測試代謝產生的三聚氰胺時,其靈敏度已經不能滿足檢測需求。在日常測試工作中也時常遇到三聚氰胺峰與雜峰分離不佳的情況,造成定量的困難。LC-MS/MS或者GC-MS(GC-MS/MS)的靈敏度較高,但儀器昂貴,檢測通量低,GC-MS(GC-MS/MS)的前處理因為需要硅烷化衍生,從而更為耗時。因此,仍有必要開發基于HPLC的更高靈敏度的檢測方案。
免疫學的檢測方法是基于抗原抗體反應的,這種特異性的識別,受限于抗體本身的特異性,以及樣品中的干擾成分。當抗體自身特異性不強,樣品中又存在比較多的干擾成分時,其檢測結果與實際情況可能想去甚遠。這也是免疫學檢測產品檢測結果不穩定,產品質量參差不齊的主要原因之一。因此,用于檢測的免疫學產品,需要經過仔細的評價,確認各個指標均滿足檢測需求方可使用。
膠體金試紙條由于其使用簡便,在基層廣泛使用。但經常會遇到有假陰性、假陽性的情況發生,或者會因為主觀判斷的差異導致不同的判斷結果。相對而言,基于酶聯免疫的試劑盒產品,定量結果通常比膠體金產品更為可靠,是日常檢測工作的必要補充。
就三聚氰胺而言,其免疫學檢測產品的靈敏度通常可以達到甚至超過LC-MS/MS或者GC-MS(GC-MS/MS)方法,而僅僅需要非常簡便的前處理,或者無需前處理,直接檢測。并且試紙條和試劑盒可高通量的對樣品進行檢測。但受其原理的限制,并不能排除假陽性的可能。因此,在應用免疫學檢測產品檢出陽性樣品時,仍需要通過C-MS/MS或者GC-MS(GC-MS/MS)方法予以確認。
SNT2805—2011中描述的拉曼光譜法,前處理過程較為簡單,離心獲得上清液,搭配專用的檢測試劑與提上清混合后,使用拉曼光譜儀進行檢測。相對色譜法而言,該法具有前處理簡單,檢測速度快等優點。便捷程度及檢測通量、檢測靈敏度不及免疫學產品。且拉曼光譜儀通常價格不菲,該方法應用場景十分有限。
SN/T3627—2013中描述的極譜法,前處理較為繁瑣,檢測靈敏度欠佳,實際工作中極為少見。相比之下,文中提及的其他電化學方法,更為靈敏。但未見成熟的商品化產品面世。
基于免疫傳感器、核酸適配體、紅外光譜法等原理的三聚氰胺檢測技術,大多還停留在實驗室階段,離商業化的產品尚有距離。