制備冷沉淀的新鮮冰凍血漿分離時間質量控制

黃潔雯 甘芳香

摘要：目的：研究不同時間段分離的新鮮冰凍血漿對冷沉淀凝血因子Ⅷ的影響，最高限度地保障冷沉淀凝血因子Ⅷ治療效果。方法：選擇安全性指標合格的血液48袋，按照全血采集后新鮮冰凍血漿不同分離時間分為3組，第1組是在采血后≤8 h，第2組是在采血后9～12 h，第3組是在采血后13～18 h，再制備成冷沉淀，檢測冷沉淀凝血因子Ⅷ的含量，對冷沉淀凝血因子Ⅷ的含量進行分析比較。結果：3組不同時間段分離的新鮮冰凍血漿制備的冷沉淀凝血因子Ⅷ含量差異顯著，組間差異存在統計學意義（P<0.05）;3組冷沉淀凝血因子Ⅷ含量合格率呈遞減趨勢，差異存在統計學意義（P<0.05）。結論：新鮮冰凍血漿分離的時間越短，冷沉淀凝血因子Ⅷ含量越高，應嚴格控制新鮮冰凍血漿分離時間。

關鍵詞：新鮮冰凍血漿;冷沉淀;分離時間;凝血因子Ⅷ

新鮮冰凍血漿是采集后儲存于冷藏環境中的全血，最好在6 h（保養液為ACD）或8 h（保養液為CPD、CPDA-1）內，但不超過18 h將血漿分離出并速凍呈固態的成分血[1]。冷沉淀凝血因子是采用特定的方法將保存期內的新鮮冰凍血漿在1℃～6℃融化后，分離出大部分的血漿，并將剩余的冷不溶解物質在1 h內速凍呈固態的成分血[2]。適用：甲型血友病，血管性血友病（vWD），纖維蛋白原缺乏癥。主要用于兒童及成人輕型甲型血友病，血管性血友病（vWD），纖維蛋白原缺乏癥及因子Ⅷ缺乏癥患者。嚴重甲型血友病需加用Ⅷ因子濃縮劑。冷沉淀凝血因子Ⅷ活性主要受新鮮冰凍血漿分離時間的影響，Ⅷ因子是一種不穩定的凝血因子，半衰期僅有8～12 h[3]。因此，新鮮冰凍血漿的分離時間既要保證冷沉淀凝血因子質量符合《全血及成分血質量要求》（GB18469-2012）中的相關要求，又要滿足冷沉淀日益增長臨床需求量，同時最大限度地利用血液資源。為此，筆者對茂名市中心血站2020年1～12月48袋不同時間分離新鮮冰凍血漿制備冷沉淀凝血因子Ⅷ含量進行分析，并對冷沉淀凝血因子Ⅷ符合質量標準合格率進行對比?，F報道如下：

1材料和方法

1.1 樣本材料

2020年1～12月，根據新鮮冰凍血漿不同分離時間對48袋血液進行分組，第1組是在采血后≤8 h，第2組是在采血后9～12 h，第3組是在采血后13～18 h，每組16袋，做相應的標識后，在相同條件下制備成冷沉淀凝血因子。

1.2 方法

1.2.1 新鮮冰凍血漿的制備

全血經大容量離心機一次性離心，離心力4 109 g，時間13 min，溫度（4±2）℃，在全自動血液成分分離機上進行分離，再放于平板速凍機速凍50 min，最后置于-18℃以下的低溫冰箱保存。

1.2.2 冷沉淀凝血因子的制備

采用離心法，嚴格按照《血站技術操作規程（2019）》中的方法進行制備，制備完成后立即放置-50℃以下的速凍機進行速凍，最后置于-18℃以下的低溫冰箱保存。

1.2.3 凝血因子Ⅷ的檢測

將已經制備好的冷沉淀凝血因子放入37℃的水浴箱進行融化后，用無菌操作抽取樣本，采用凝固法對凝血因子Ⅷ進行檢測。

1.3 統計分析

采用SPSS20.0統計學軟件進行數據處理，計量資料以（±s）表示，采用t檢驗，計數資料用比率表示，采用χ2檢驗，P<0.05為差異具有統計學意義。

2結果

2.1 不同時間段分離新鮮冰凍血漿制備冷沉淀凝血因子Ⅷ的含量結果

3組不同時間段分離的新鮮冰凍血漿制備成冷沉淀凝血因子Ⅷ的含量，隨制備時間延長而下降，差異有統計學意義（P<0.05）;第1組凝血因子Ⅷ含量達到最高，第2組凝血因子Ⅷ含量開始下降，跟凝血因子Ⅷ半衰期相符，第3組凝血因子Ⅷ含量明顯下降。見表1。

2.2 不同時間段分離新鮮冰凍血漿制備冷沉淀凝血因子Ⅷ的質量檢測結果

全血采集后≤8 h分離的新鮮冰凍血漿制備出來的冷沉淀凝血因子合格率為100%，全血采集后9～12 h分離的新鮮冰凍血漿制備出來的冷沉淀凝血因子合格率為94%，全血采集后13～18 h分離的新鮮冰凍血漿制備出來的冷沉淀凝血因子合格率為81%，檢查合格率≥75%，符合質量抽檢標準，但隨著時間的延長，合格率呈下降趨勢，3組之間的合格率對比存在統計學意義（P<0.05）。見表2。

3結論

冷沉淀凝血因子以節省血源、作用快、療效好等優點廣泛被臨床所應用。隨著醫療技術的不斷更新，對冷沉淀凝血因子質量要求將會越來越高，為了防止成分輸血醫療事故的發生，高效率回收凝血因子，新鮮冰凍血漿分離的時間直接影響了冷沉淀中凝血因子Ⅷ含量，因此對制備冷沉淀凝血因子的新鮮冰凍血漿要求越來越嚴格。Ⅷ因子是一種不穩定的凝血因子，半衰期僅有8～12 h。影響新鮮冰凍血漿中凝血因子Ⅷ含量的因素主要血源自身凝血因子水平、血液采集過程、分離時間、保存溫度、制備方法等，其中分離時間是最為重要的因素[4～5]。研究數據表1顯示，3組不同分離時間段的新鮮冰凍血漿制備成冷沉淀中凝血因子Ⅷ含量隨制備時間延長明顯下降，差異有統計學意義（P<0.05）;新鮮冰凍血漿分離時間最好控制在血液采集后8 h內，凝血因子Ⅷ含量達到最高，9～12 h凝血因子Ⅷ含量開始下降，跟凝血因子Ⅷ半衰期（8～12 h）相符，而13～18 h凝血因子Ⅷ含量明顯下降。研究數據表2顯示，3組不同分離時間段的新鮮冰凍血漿制備成冷沉淀中凝血因子Ⅷ質量標準合格率，隨著新鮮冰凍血漿制備時間的延長，合格率呈下降趨勢。最后一組13～18 h合格率為81.25%，雖然滿足《血站技術操作規程（2019）》質量控制中“75%的抽檢結果落在質量控制制備范圍內，可認為血液采集和制備過程受控”的標準。但是，縮短新鮮冰凍血漿制備時間，保證了冷沉淀凝血因子Ⅷ含量，大大提高臨床輸血應用效果[6]。

現代輸血事業迅速發展，成分血制備能力不斷提高，冷沉淀凝血因子廣泛被臨床推廣使用，在臨床治療中占不可替代的位置。目前，茂名市人民醫院納入廣東省高水平醫院登峰計劃建設、高州市人民醫院的品牌效應，促進醫療水平提高，醫療資源輻射面擴大，大型公立醫院床位擴編，外地疑難危重復雜病例涌入，必然會加大臨床用血量，其中包括冷沉淀凝血因子的需求量。如何能在有限血源的條件下，既能保證冷沉淀凝血因子的安全性和有效性，又能滿足臨床用血需求，將是我站面臨的挑戰。

因此，我站為了保障冷沉淀凝血因子Ⅷ的質量，嚴格按照要求規范工作人員的操作技能，首先做好血液原料質量控制，各個科室協調溝通，嚴格按照血液儲存及運輸要求，共同做好血液原料的采集、貯存、運輸等過程的血液質量控制措施，確保冷沉淀成分的活性和輸注的有效性。其次控制好冷沉淀凝血因子制備的各個關鍵環節，分離技術精益求精，不斷摸索，鉆研分離技術，完善設備控制參數，確保冷沉淀的質量。最后，嚴格控制新鮮冰凍漿分離的時間，由于我站行政區域輻射范圍較廣，有些鄉鎮距離比較遠，采集血液回到站內通常到晚上，安排制備人員上夜班，做到血液分離不過夜，盡量縮短新鮮冰凍血漿分離的時間，保障了冷沉淀凝血因子Ⅷ的質量，最大限度地利用血液，節約血液，為全市人民的健康保駕護航。

參考文獻

[1]拉珍，次白.制備時間對新鮮冰凍血漿內凝血因子Ⅷ含量的影響研究[J].西藏醫藥，2019，40（6）：981-983.

[2]廖云.不同溫度、時間制備新鮮冰凍血漿中的凝血因子含量分析[J].中外醫學研究.2017.15（5）：61-62.

[3]李燕紅，王敏，夏曉.冷沉淀制備時間對新鮮冰凍血漿凝血因子及纖維蛋白原含量的影響[J].中國校醫，2020（5）：3.

[4]盧少芬，梁潔貞，仇嚴妹，等.新鮮冰凍血漿制備時間對冷沉淀凝血因子的質量影響[J].中國醫藥科學，2017（8）：4.

[5]王峰.制備時間對新鮮冰凍血漿內凝血因子Ⅷ含量的影響[J].血栓與止血學，2018，25（6）：3.

[6]何紅.延長制備時間對新鮮冰凍血漿和冷沉淀質量的影響[J].血栓與止血學，2016，23（1）：169-170.