黃承俊,張文軍,王 格,李 寧
(遼寧省農業發展服務中心,遼寧沈陽110032)
活體卵母細胞是進行試驗研究、保種育種、動物繁殖等的材料[1-2]。目前,B 超法活體采卵是較為理想的方式,但需要B 超儀與經驗豐富的工作人員相配合[3-5]。因此,方便可持續性獲取活體卵母細胞的方法仍在探索中。
在解剖生理上,空懷牛的卵巢多位于骨盆腔內,經產及妊娠牛的卵巢往往吊在腹腔靠近體壁處,并由系膜懸掛,具有一定的可延伸性。右側髖關節前水平線稍下的腹壁處是離卵巢最近,且可安裝瘺管的位置[6]。如果卵巢位于腹腔內,加上卵巢系膜的延展性,通過此處安裝瘺管,將體內卵巢取出具有一定的可行性。如果卵巢位于骨盆腔內,將其系膜和韌帶部分割斷,仍具有取出的可能性。本試驗通過瘺管,結合超數排卵技術[7],進行可持續性的獲得活體卵母細胞,為卵母細胞的獲取方法提供參考。
沿江初產母牛1頭,3周歲。兩側卵巢完整,均位于骨盆腔內。
SZM7045B1 體視顯微鏡(深圳市泰宇星光電儀器有限公司)、直徑10 cm 瘺管(武漢科立搏牧業科技有限公司)。
LA1812 PBS磷酸鹽緩沖液(Labcoms)。
1.3.1 術前準備
試驗牛禁食24 h,禁水12 h。準備好相關手術器械和藥品。瘺管用開水燙至軟化。
1.3.2 保定與麻醉
將牛保定在單排結實的鐵柵欄一側。術部去毛和消毒,利用硬膜外腔麻醉法進行麻醉[8]。
1.3.3 安裝瘺管
術部位于髖關節與最后肋骨間靠近髖關節一側。開口上緣在髖關節與最后肋骨水平連線下8 cm。……