胥 冀,李榮杰,麻明彪,史應萍,楊光能,杜 立,孫載鑫,張應嬌,許 彬
昆明市兒童醫院檢驗科,云南昆明 650228
兒童時期腹瀉發病率較高,嚴重威脅著小兒的健康成長。小兒腹瀉是由多種病原體引起的,其中病毒感染占85%~90%,細菌及其他感染占0%~15%,病毒感染在腹瀉中占重要地位,而諾如病毒(NoV)及輪狀病毒(RV)則是眾多病毒性致病因子中最重要的兩種[1]。病毒性腹瀉具有明顯的季節性,主要在秋冬兩季[2],但隨著外界環境的變化,病毒性腹瀉季節性高發的界限已經越來越不明顯。為了解昆明市兒童醫院腹瀉患兒NoV和RV感染狀況、季節及人群分布情況,本研究對2018年本院收治的2 021例腹瀉患兒糞便樣本進行NoV和RV病原檢測,分析兩種病毒感染與年齡的關系等流行病學特征,為本地區兒童腹瀉的防治提供科學依據。
1.1一般資料 所有患兒均在家屬知情同意下,經本院醫學倫理委員會批準后,選取2018年1-12月在本院就診的2 021例腹瀉患兒的臨床資料,患兒均來自于昆明地區,年齡最小為出生后26 d,最大為72個月,平均年齡(13±2)個月。納入標準:(1)年齡≤72個月;(2)72 h內嘔吐或腹瀉(稀便或水樣便≥3次);(3)糞便中不含黏液或血液。診斷標準參照文獻[3]。
1.2方法
1.2.1NoV檢測 收集3~5 mL符合納入標準的患兒糞便樣本,冷凍于-80 ℃冰箱中,集中待測,吸取0.4 mL糞便樣本置于1.5 mL的離心管中,12 000 r/min離心3 min,吸取200 μL樣本上清液添加5 μL內標,進行NoV核酸提取。采用 AB7300儀器進行PCR擴增,所有操作嚴格按照試劑盒說明書制訂的標準操作規程進行。所有試劑盒均在有效期內進行使用,所用的檢測系統及質控合格。試劑盒購買于湖北朗德醫療科技有限公司。
1.2.2RV檢測 所有樣本在收集當日采用金標法檢測A群RV(膠體金法),嚴格按照試劑說明書進行操作及結果的判讀。所有樣本檢測當日質控在控,使用的試劑均在有效期內。試劑盒購買于北京萬泰生物藥業股份有限公司。
1.3統計學處理 采用Excel 2007對病例信息數據進行整理及圖表制作,數據處理和統計分析采用SPSS17.0統計軟件,計數資料以率表示,組間比較采用χ2檢驗,P<0.05表示差異有統計學意義。
2.1NoV和RV陽性率 2 021例腹瀉患兒糞便樣本中,NoV和RV總陽性率為70.06%(1 416/2 021),其中NoV、RV和NoV+RV兩種病毒混合感染的陽性率分別為29.29%(592/2 021)、34.83% (704/2 021)和5.93%(120/2 021)。見表1。
2.2流行病學特征
2.2.1流行高峰期分布 NoV和RV全年均有感染,NoV流行高峰期主要集中9-12月,該時間段內NoV陽性數為501例,占總陽性人數的84.6%(501/592),與其他月份總陽性率比較,差異有統計學意義(χ2=60.138,P<0.05);RV流行高峰期主要集中在1-3月及11-12月,共檢出RV陽性數610例,占總陽性人數的86.6%(610/704),與其他月份總陽性率比較,差異有統計學意義(χ2=148.111,P<0.05);NoV+RV流行高峰期主要集中在1-3月和11-12月,與RV感染時間段分布一致,共檢出NoV+RV陽性數101例,占總陽性人數的84.16%(101/120),與其他月份總陽性率比較,差異有統計學意義(χ2=3.949,P<0.05)。
2.2.2RoV和RV在不同年齡段人群中感染情況 NoV和RV在各年齡段中均能檢測到,見表1。其中NoV陽性率較高的年齡段為48~<60個月和12~<24個月,陽性率分別為35.71%和33.97%,NoV陽性率最低的年齡段為36~<48個月,陽性率為17.31%;RV陽性率較高的年齡段為24~<36個月和12~<24個月,陽性率分別為56.96%和53.76%,RV陽性率最低的年齡段為0~<6個月,陽性率為18.45%;NoV+RV陽性率最高年齡段為12~<24個月,陽性率為7.91%。年齡段為0~<24個月的RV陽性率與其他年齡段比較,差異有統計學意義(χ2=4.924,P<0.05),而年齡段為0~<24個月的NoV陽性率與其他年齡段比較差異無統計學意義(χ2=0.129,P>0.05);年齡段為0~<24個月的NoV+RV陽性率與其他年齡段比較,差異有統計學意義(χ2=3.963,P<0.05)。

表1 2018年1-12月本院腹瀉患兒不同年齡段NoV和RV檢出情況[n(%)]
引起兒童腹瀉的病原體有多種,常見的病原體主要為細菌和病毒,但隨著抗菌藥物有效應用,細菌性腹瀉已逐漸得到控制[4],病毒腹瀉逐步成為兒童腹瀉的主要病因[5],而NoV及RV則是病毒性腹瀉的主要病原體。
本研究結果顯示,腹瀉患兒NoV及RV總陽性率為70.06%,其中NoV、RV和NoV+RV兩種病毒混合感染的陽性率分別為29.29%、34.83%和5.93%。本院RV陽性率低于文獻[6-7]報道結果,但高于文獻[8-9]報道結果。而NoV陽性率低于文獻[10]報道結果,高于文獻[4,11-12]報道結果,這可能與昆明地區四季如春,有利于病毒的繁殖有關。此外,本地區NoV+RV陽性率高于陳惠芳等[13]報道結果,低于陳玲霞等[14]報道結果,昆明地區NoV與RV混合感染在病毒性感染性腹瀉中是不可忽視的問題,是否會加重病情及發病機制有待于進一步更深入的研究。
本研究NoV流行高峰主要在9-12月,而RV及NoV+RV混合感染的流行高峰主要在1-3月和11-12月,與國內報道結果基本一致[3,8,13-14],但NoV感染性腹瀉與文獻[15]報道的其多發于冬、春季節有差別,可能與飲食習慣及氣候有關。因此,加強NoV及RV監測,防止其暴發流行,尤其在腹瀉流行高峰期,應加強對學校、醫院等集體機構食物和水源的監控和管理,開展有針對性的健康教育。
本研究結果顯示,年齡段為0~<24個月的RV陽性率與其他年齡段比較,差異有統計學意義(P<0.05);年齡段為0~<24個月的NoV+RV陽性率與其他年齡段比較,差異有統計學意義(P<0.05),與國內多地報道結果一致[2,8,16],但本研究NoV陽性率最高的年齡段為48~<60個月,可能與本研究中該年齡段患兒數量較少有關,需要進一步行大樣本檢測。因此,病毒性腹瀉患兒應以2歲嬰幼兒為重點監測對象,尤其是RV及NoV+RV混合感染,同時加大48~<60個月患兒NoV樣本的監測。
綜上所述,本院腹瀉患兒中NoV及RV陽性率較高,且具有流行病學特征,RV及NoV+RV混合感染好發于2歲以下患兒,本研究對積累相關資料,為當地兒童腹瀉防治工作提供了可靠依據。