安羅替尼治療晚期卵巢癌對血清細(xì)胞凋亡分子和血管生成因子的影響

夏婷婷

卵巢癌是女性常見的惡性腫瘤，是婦科死亡的主要原因，早期癥狀不典型且不明顯，當(dāng)癥狀明顯來院治療時已經(jīng)屬于晚期，錯過了手術(shù)時機(jī)。因此，保守治療時延長晚期卵巢癌患者生存時間和提高生活質(zhì)量的關(guān)鍵[1]。其中靜脈化療在臨床上最為廣泛，在殺滅腫瘤細(xì)胞的同時對正常組織和器官具有一定的損傷[2]。在常規(guī)化療的基礎(chǔ)上聯(lián)合靶向藥物治療是治療晚期腫瘤的新的治療策略，最為被臨床推崇[3]。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和血管內(nèi)皮生長因子受體(VEGFR)是血管生成的重要蛋白，是抑制腫瘤的有效靶點(diǎn)，已經(jīng)廣泛運(yùn)用于晚期非小細(xì)胞肺癌[4]，晚期結(jié)腸癌[5]等惡性腫瘤，并且取得了良好的效果。對于晚期卵巢癌的使用剛剛起步，是否具有良好效果需要更為系統(tǒng)的研究。本研究采用安羅替尼聯(lián)合常規(guī)化療治療晚期卵巢癌的療效顯著，并且對血清細(xì)胞凋亡分子和血管生成因子具有影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2017年1月至2019年6月在我院就診的晚期卵巢癌患者86例，按照隨機(jī)數(shù)字法患者分為觀察組和對照組，每組43例。觀察組：年齡45～79歲，平均年齡(56.37±8.29)歲；體重44～72 kg，平均體重(56.38±8.19)kg；對照組：年齡43～79歲，平均年齡(55.92±7.68)歲；體重45～71 kg，平均體重(57.15±7.86)kg。2組年齡和體重等基線資料差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn)：均行CT和病理確診為晚期卵巢癌；未接受系統(tǒng)性的放化療或者靶向治療；卡氏評分>60分，預(yù)計生存期>3個月；均簽署知情同意書和經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審核通過。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn)：合并或者其他部位原發(fā)惡性腫瘤；合并心肝腎等重要臟器的功能不全；血液性和免疫性疾病；有藥物過敏的患者；智力障礙和精神性疾病患者。

1.3 治療方法 對照組予以TP方案化療，觀察組在對照組的基礎(chǔ)上予以安羅替尼治療。2組在化療前予以地塞米松20 mg，奧美拉唑注射液40 mg和苯海拉明50 mg靜脈推注。TP化療方案：多西他賽注射液70 mg/m2加入250 ml 0.9%氯化鈉溶液中，靜脈滴注1 h；第2天卡鉑50 mg/m2加入5%葡萄糖水500 ml靜脈滴注1 h。3周為1個療程，共6個療程。觀察組在對照組的基礎(chǔ)上予以口服安羅替尼12 mg，1次/d，連續(xù)服用2周后，停1周，為1個療程，共6個療程。

1.4 療效評價 2組6個療程結(jié)束后評價療效。癥狀消失且保持≥4周為完全緩解；病灶直徑較治療前降低≥30%，并且保持4周為部分緩解；病灶直徑降低<30%但不超過20%為穩(wěn)定；出現(xiàn)新的病灶或者病灶直徑≥20%為進(jìn)展。總有效率=(完全緩解+部分緩解)/總例數(shù)×100%。

1.5 血液標(biāo)本保存與檢測 患者入院時和6個療程結(jié)束時抽取肘靜脈血2 ml。采用離心機(jī)將血液離心，離心半徑15 cm，離心速度3 000 r/min，離心15 min，抽取上清液放置在除酶管內(nèi)，放置在-70℃冰箱中保存。血清標(biāo)本癌抗原(CA)153、CA125、人附睪蛋白4(HE4)、β-人絨毛膜促性腺激素(β-HCG)、B細(xì)胞CLL/淋巴瘤2關(guān)聯(lián)凋亡基因1(Bag-1)、生存素(Survivin)、B細(xì)胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相關(guān)X蛋白(Bax)、基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)、VEGF、乏氧誘導(dǎo)因子(HIF)-1ɑ和人血管生成素2(Ang-2)的檢測采用酶聯(lián)免疫法檢測，試劑盒采用羅氏公司生產(chǎn)。

1.6 觀察指標(biāo) 觀察2組的療效和不良反應(yīng)，及治療前后血清CA153、CA125、HE4、β-HCG、Bag-1、Survivin、Bcl-2、Bax、MMP-2、VEGF、HIF-1α和Ang-2水平的變化。

2 結(jié)果

2.1 2組患者療效比較 觀察組的總有效率為86.05%，對照組總有效率為62.79%，觀察組療效明顯優(yōu)于對照組(χ2= 4.947，P<0.05)。見表1。

表1 2組患者療效比較 n=43，例(%)

2.2 2組患者不良反應(yīng)情況比較 2組患者不良反應(yīng)情況差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 2組患者不良反應(yīng)情況比較 n=43，例(%)

2.3 2組患者治療前后血清CA153、CA125、HE4和β-HCG水平比較 2組患者治療前血清CA153、CA125、HE4和β-HCG水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；治療后2組均較治療前明顯降低，且觀察組較對照組降低更明顯，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。見表3。

表3 2組患者治療前后血清CA153、CA125、HE4和β-HCG水平的變化

2.4 2組患者治療前后血清凋亡因子含量比較 2組患者治療前血清Bag-1、Survivin、Bcl-2和Bax水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；治療后2組血清Bag-1、Survivin和Bcl-2水平較治療前明顯降低(P<0.01)，而血清Bax水平較治療前明顯升高(P<0.01)，觀察組較對照組降低或升高更明顯，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。見表4。

表4 2組患者治療前后血清凋亡因子含量比較

2.5 2組患者治療前后血清血管生成相關(guān)因子水平比較 2組治療前血清MMP-2、VEGF、HIF-1α和Ang-2水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；治療后2組均較治療前明顯降低(P<0.01)，而觀察組較對照組降低更明顯(P<0.01)。見表5。

表5 2組患者治療前后血清血管生成相關(guān)因子水平比較

3 討論

晚期卵巢癌的治療主要予以鉑類為主的TP方案化療，患者緩解后有高達(dá)85%的患者出現(xiàn)復(fù)發(fā)[2]，故尋找更為有效，患者耐受的治療方法異常成為晚期腫瘤治療的熱點(diǎn)。目前靶向治療已成為惡性腫瘤尤其晚期惡性腫瘤治療開辟了治療的新時代。腫瘤的生長過程中，血管生成對腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移具有重要作用。腫瘤在生長過程中分泌多種細(xì)胞因子如VEGF、成纖維細(xì)胞生長因子和血小板生長因子，并與相應(yīng)的受體結(jié)合后，激活信號通路促進(jìn)腫瘤新生血管生成，促進(jìn)腫瘤增殖和轉(zhuǎn)移[6]。針對血管生成方面的靶向藥物安羅替尼明顯優(yōu)于傳統(tǒng)的索拉菲尼和舒尼替尼，不僅能夠阻斷多個血管生成途徑的絡(luò)氨酸激酶抑制劑而且能夠通過對血管內(nèi)皮生長因子受體[7]。本研究發(fā)現(xiàn)安羅替尼聯(lián)合TP方案治療晚期卵巢癌的療效明顯優(yōu)于單純TP方案化療，并且在不良反應(yīng)方面2組無明顯差別，說明安羅替尼能夠明顯提高治療晚期卵巢癌的治療效果，并且不增加不良反應(yīng)的發(fā)生。本研究發(fā)現(xiàn)安羅替尼聯(lián)合TP方案與單純TP方案治療晚期卵巢癌降低機(jī)體血清的CA153、CA125、HE4和β-HCG水平更為明顯。CA153和CA125均屬于糖類抗原，屬于光譜腫瘤標(biāo)記物，在多種惡性腫瘤中呈高表達(dá)，并且是預(yù)后的重要指標(biāo)[8]。本研究表明卵巢癌患者血清CA153和CA125水平呈明顯升高，治療后其水平出現(xiàn)明顯降低，說明兩者也是腫瘤負(fù)荷的重要指標(biāo)。HE4是一種與精子成熟相關(guān)的蛋白酶抑制劑，在胚胎的發(fā)育過程中存在于體腔上皮化生組織的表面，在卵巢癌組織和患者血清中呈HE4高表達(dá)，并且是卵巢癌預(yù)后的獨(dú)立預(yù)后因素，其水平升高預(yù)示著卵巢癌預(yù)后不良[9]。β-HCG是滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌，是生殖系統(tǒng)惡性腫瘤的腫瘤標(biāo)記物，在惡性腫瘤的診斷和預(yù)后判斷方面具有重要作用[10]。結(jié)合本研究安羅替尼治療能夠更加明顯降低機(jī)體血清CA153、CA125、HE4和β-HCG水平，說明安羅替尼對晚期卵巢癌的療效顯著。

腫瘤的生長與腫瘤血管生成和凋亡失衡具有重要關(guān)系，凋亡失衡是導(dǎo)致腫瘤持續(xù)增殖的根本機(jī)制，檢測凋亡分子表達(dá)水平是評估腫瘤惡性程度和臨床療效的重要指標(biāo)。Bag-1是抗凋亡家族成員，位于染色體9q12，是一種多功能蛋白，在正常組織中不表達(dá)，在多種腫瘤中呈高表達(dá)，與腫瘤分化，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床分期具有明顯相關(guān)性[11]。Bcl-2也是一種抗凋亡基因，具有抑制腫瘤的凋亡，在腫瘤的發(fā)生發(fā)展具有促進(jìn)作用，與腫瘤的分級，分期和預(yù)后具有明顯相關(guān)性。Bcl-2與Bag-1具有高度同源性，兩者可以形成復(fù)合物，增強(qiáng)抗凋亡的功能，與影響蛋白的穩(wěn)定性有關(guān)[11]。本研究發(fā)現(xiàn)安羅替尼聯(lián)合TP方案治療晚期卵巢癌能夠明顯降低血清Bag-1和Bcl-2水平，抑制腫瘤細(xì)胞的凋亡，從而達(dá)到抑制腫瘤的作用。Survivin是一種抗凋亡基因，在多種惡性腫瘤中呈高表達(dá)，通過調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移、凋亡和細(xì)胞耐藥的過程中具有重要作用[12]。Bax蛋白主要引起線粒體細(xì)胞膜的通透性，促進(jìn)細(xì)胞色素C進(jìn)入胞質(zhì)，而Bcl-2主要維持線粒體膜的完整性，抑制細(xì)胞色素C的釋放，故Bcl-2和Bax的比例調(diào)節(jié)細(xì)胞死亡和存活的動態(tài)平衡[13]。本研究發(fā)現(xiàn)安羅替尼聯(lián)合TP方案治療晚期卵巢癌能夠明顯降低血清Survivin和提高Bax水平，說明安羅替尼能夠調(diào)整促凋亡因子和凋亡因子之間的平衡，從而達(dá)到抑制腫瘤的目的。

正常生理?xiàng)l件下血管生成在胚胎發(fā)育和組織修復(fù)階段，而異常的新生血管是惡性腫瘤的特異性標(biāo)志之一。VEGF是一種多功能的二聚體糖蛋白，與血管內(nèi)皮細(xì)胞特異性結(jié)合，加速血管內(nèi)皮細(xì)胞的分裂。在正常機(jī)體呈低表達(dá)，而在發(fā)生癌變是出現(xiàn)高表達(dá)，并且與腫瘤的預(yù)后具有重要的聯(lián)系[14]。Ang-2是新生血管形成的強(qiáng)化因素，具有降低血管的穩(wěn)定性，增強(qiáng)血管的可塑性，對血管形成過程具有明顯的調(diào)節(jié)作用，參與了腫瘤血管的形成，促進(jìn)腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移[15]。HIF-1α在多種腫瘤中呈高表達(dá)，促進(jìn)靶基因的表達(dá)如VEGF等，從而增加腫瘤血管形成，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移，因此對調(diào)控VEGF的表達(dá)具有重要調(diào)控作用[16]。MMP-2在腫瘤血管形成中扮演著重要角色，能夠降低血管基底膜和細(xì)胞外基質(zhì)，參與血管內(nèi)皮細(xì)胞的遷移過程[17]。在卵巢癌的研究中發(fā)現(xiàn)卵巢癌組織中表達(dá)明顯高于正常卵巢組織，并且發(fā)現(xiàn)MMP-2對卵巢癌的診斷和浸潤具有重要作用[18]。本組研究發(fā)現(xiàn)安羅替尼聯(lián)合TP方案化療較單純化療比較更加能夠明顯降低血清MMP-2、VEGF、HIF-1α和Ang-2水平，說明安羅替尼具有降低血清MMP-2、VEGF、HIF-1α和Ang-2的作用。

綜上所述，安羅替尼聯(lián)合TP方案治療晚期卵巢癌的療效顯著，其機(jī)制與安羅替尼調(diào)整細(xì)胞凋亡分子和血管生成因子有關(guān)。