桂枝茯苓膠囊內容物正丁醇和醋酸乙酯萃取部位的化學成分研究

鄭睿伶

(溫州醫科大學藥學院 浙江溫州 325035)

為了進一步闡明桂枝茯苓膠囊復方的藥效物質基礎，本研究運用現代中藥化學方法分離純化了其中的化學成分并鑒定了其結構，以期將其藥效物質基礎及藥物配伍后新的化學成分產生情況探索出來。在前期研究基礎上，本實驗進一步研究了桂枝茯苓膠囊的化學成分，從該方的醋酸乙酯層分離將2個單體化合物獲取過來，分別鑒定為白芍苷R1、paeonidanin B；從正丁醇層中分離將2個化合物獲取過來，分別鑒定為isomaltopaeoniflorin、羥基芍藥苷。白芍苷R1、paeonidanin B、isomaltopaeoniflorin首次從該復方中分離獲取，現報道如下。

一、方法

用95%乙醇對15.0kg桂枝茯苓膠囊內容物進行4次回流提取，每次2h，減壓濃縮提取液到浸膏，將水混懸液制作出來后先用石油醚進行4次萃取，然后用氯仿進行4次萃取，之后用醋酸乙酯進行4次萃取，最后用正丁醇進行4次萃取，將萃取液合并后蒸干備用。將300g醋酸乙酯萃取部位浸膏提取出來，經硅膠柱色譜后對其進行梯度洗脫，梯度洗脫過程中用二氯甲烷-甲醇，將9個瘤份Fr.A1-A9獲取過來。經Sephadex LH-20柱色譜處理Fr.A3，對其進行洗脫，洗脫過程中用1:1比例的二氯甲烷-甲醇，然后經制備型HPLC，將流動相設定為32%乙腈，將化合物1獲取過來，為40mg。經Sephadex LH-20柱色譜處理Fr.A4，對其進行洗脫，洗脫過程中用1:1比例的二氯甲烷-甲醇，然后經制備型HPLC分離，之后對其進行反復純化，純化過程中用27%乙腈，將化合物2獲取過來，為110mg。將100g正丁醇萃取部位浸膏取出來，經硅膠柱色譜，然后對其進行梯度洗脫，梯度洗脫過程中用醋酸乙酯-甲醇，將6個瘤份Fr.B1-B6獲取過來，其中經Sephadex LH-20對Fr.B3進行洗脫，洗脫過程中用1:1二氯甲烷-甲醇，然后經制備型HPLC進行等度洗脫，等度洗脫過程中將流動相設定為13%乙腈-水，將30mg化合物3獲取過來；經Sephadex LH-20色譜處理Fr.B2，對其進行洗脫，洗脫過程中用1:1比例的二氯甲烷-甲醇，然后經制備HPLC進行0-1h的梯度洗脫，洗脫過程中用10%-20%乙腈，將化合物4獲取過來，為120mg[1]。

二、結構鑒定

三、討論

桂枝茯苓膠囊的組成成分為5味中藥，即桂枝、涪陵、赤芍、牡丹皮、桃仁，主要功效為活血化瘀等，在卵巢囊腫、痛經、子宮內膜異位等婦科疾病的治療中得到了極為廣泛的應用[2][3]。表1中化合物1、2、3、4數據均和相關醫學學者研究結果一致，因此，分別鑒定為白芍苷R1、paeonidanin B、isomaltopaeoniflorin及羥基芍藥苷。從本研究中我們可以看出，白芍苷R1、paeonidanin B、isomaltopaeoniflorin首次從該復方中分離獲取，白芍苷R1、paeonidanin B、isomaltopaeoniflorin及羥基芍藥苷屬于芍藥苷類化合物，值得臨床充分重視。

表1 化合物1、2、3、4的狀態、mp、ESI-MSm/z情況