拜城油雞生產性能及遺傳多樣性分析

楊速，操勇清，李海英，盧立志，李國勤，曾濤，陳黎，黃希東，沈軍達，陶爭榮，田勇*

(1.浙江省農業科學院 畜牧獸醫研究所，浙江 杭州 310021；2.浙江師范大學 化學與生命科學學院，浙江 金華 321004；3.甘肅農業大學 動物科學技術學院，甘肅 蘭州 730070；4.新疆農業大學 動物科學學院，新疆 烏魯木齊 830052；5.拜城縣牧村拜城油雞原種保護場，新疆 拜城 842314)

我國地大物博，不同的自然環境、社會經濟條件和地區文化馴化出各具特色的地方雞品種，2012年《中國畜禽遺傳資源志·家禽志》中收集了189個家禽品種，其中有116個雞品種，農業部最新公布的國家保護名錄中包含28個雞品種[1]。眾多的雞品種滿足了人們多樣的生活需要，如雞肉、雞蛋的營養價值，特殊品種的藥用價值，雞毛制品的實用價值以及羽毛和斗雞的觀賞價值。但隨著人們對畜禽產品需求的增加，一味地提高生產效益，引入外來品種(如來航雞、星布羅肉雞等[2])與本地雞種雜交，導致遺傳資源的污染，甚至一些地方品種的滅絕[3]。禽類遺傳資源是不可再生的寶貴資源，是家禽業可持續發展的根基。國家和地方政府正在積極出臺禽類遺傳資源的保護政策，對我國地方雞品種種質特性和遺傳資源的評估和保護十分重要。

拜城油雞原產于新疆阿克蘇地區，是我國珍品油雞禽品種資源之一，為肉蛋兼用型。其具有肉味鮮美、骨細肉多、抗病力強等諸多優點。因皮膚和肌肉間有一層很薄的脂肪且散發出特殊的香味而得名油雞[4]。此外，雞皮中還含有多種脂質成分，包括磷脂、鞘磷脂、酰脂等，能夠預防多種心腦血管疾病，促進新陳代謝[5-6]。本研究對300日齡拜城油雞體重、體尺和蛋品質進行測定，同時采用微衛星標記進行遺傳學分析，擬從種質特性和遺傳多樣性角度對拜城油雞進行評估，為拜城油雞的保種育種提供參考資料和科學依據。

1 材料與方法

1.1 材料

拜城油雞及雞蛋由拜城縣牧村拜城油雞原種保護場提供。

1.2 體尺性狀測定

隨機選取300日齡拜城油雞公母各30只，測量指標包括體重、體斜長、龍骨長、胸寬、胸深、盆骨寬、脛長和脛圍8項體尺指標。以上所有指標均參照NY/T 823—2004《家禽生產性能名詞術語和度量統計方法》[7]進行。

1.3 蛋品質測定

取300日齡拜城油雞雞蛋45枚，測量其蛋重、蛋黃色澤、蛋殼強度、蛋形指數、哈氏單位和蛋殼厚度6項指標。測量儀器包括多功能蛋品質測定儀、蛋殼強度測定儀、蛋殼厚度測定儀和游標卡尺。

1.4 PCR程序與測序

1.4.1 血樣采集

隨機選取100只拜城油雞進行翅下靜脈采血，用含乙二胺四乙酸(EDTA)真空采血管進行封裝，置于-20 ℃保存，用于DNA提取。

1.4.2 DNA提取與檢測

使用杭州新景公司生物試劑開發有限公司的全血DNA小量提取試劑盒進行DNA提取，使用紫外分光光度計檢測DNA純度(D260/280)和濃度。

1.4.3 引物設計與PCR擴增

使用Premier 5.0進行用于基因多態性檢測的引物設計或對相關文獻中引物進行篩選，優先選擇多態性高、核心序列重復次數多的位點，部分引物序列參考黃玲玲的研究[8]。最終使用28對引物進行擴增(表1)。引物交由上海捷瑞生物工程有限公司合成。

表1 28個微衛星位點PCR擴增引物

PCR擴增程序參考操勇清等[9]的方法，PCR循環條件：預變性3 mim，95 ℃；變性20 s，94 ℃，退火20 s，58 ℃，延伸40 s，72 ℃，35個循環；修復延伸5 mim，72 ℃。采用ABI 3730XL DNA分析儀對含熒光標記的PCR產物進行毛細管電泳，參照劉雅麗等[10]的方法進行。PCR產物由上海杰瑞生物工程有限公司進行DNA直接測序。

1.5 統計與分析

采用Excel對拜城油雞體尺和蛋品質數據進行統計整理，IBM SPSS 21獨立樣本T檢驗進行體尺差異比較，結果采用平均數±標準差表示。采用POPGENE 1.32對多態位點進行有效等位基因和雜合度計算，LittlePrograme 0.6計算多態信息含量。

2 結果與分析

2.1 體尺

拜城油雞公雞的體重、體斜長、龍骨長、胸寬、胸深、盆骨寬、脛長和脛圍8項指標均顯著高于母雞，公雞體重比母雞高24.35%，在體型上，公雞與母雞存在明顯差異(表2)。

表2 300日齡拜城油雞體尺測定

2.2 蛋品質

本研究測定了拜城油雞蛋重、蛋黃色澤、蛋殼強度、蛋形指數、哈氏單位和蛋殼厚度6項蛋品質指標(表3)。

表3 拜城油雞及其他雞蛋品質

2.3 遺傳參數分析

本試驗利用微衛星標記位點對拜城油雞進行了多個遺傳多樣性參數統計，28微衛星位點中，ADL136位點有效等位基因、雜合度和多態信息含量均最高，分別為8.12、0.83和0.81(表4)。除上述3個指標均為0的MCW294位點外，ADL201位點多態性最低，有效等位基因、雜合度和多態信息含量分別為0.96、0.06和0.05。28個微衛星位點中，23個位點為高度多態位點(多態信息含量>0.5)，4個位點為中度多態位點(多態信息含量0.25～0.5)，1個位點未顯示出多態性，平均多態信息含量為0.57，整體表現為高度多態。

表4 拜城油雞各基因位點遺傳多態性

3 小結與結論

3.1 體重體尺

體重體尺是家禽育種過程中重要的參考指標，不僅可以衡量家禽的生長發育程度和群體的均勻度[14]，還直接或間接影響家禽的生產性能[15]。本試驗表明，拜城油雞的體重體尺存在性別差異，公雞體重體尺8項指標均顯著高于母雞。鄧雨英等[16]、李俊營等[17]分別對黃麻羽雪峰烏骨雞和黃山黑雞進行體重體尺測定，同樣表明公雞各項指標均高于母雞。說明公雞更具生長優勢，在實際生產中應將公母區別飼喂，充分發揮公雞的生長潛能。拜城油雞的體重高于藏雞[18]、絲羽烏骨雞[19]、烏蒙鳳雞[20]，與宮廷黃雞[12]相當，但小于浦東雞[21]，同時體尺各項指標也有不同程度的差異，而不同品種間體型外貌差異的決定性因素是遺傳基礎。整體而言，拜城油雞屬于體型較大的雞品種。

3.2 蛋品質

禽類蛋品質是一個綜合指標，不僅影響養禽業的經濟效益，也與禽類繁殖性能密切相關[22]。蛋品質主要包括蛋重、蛋黃色澤、蛋殼強度、蛋形指數、哈氏單位、蛋殼厚度等指標。蛋重是消費者在挑選雞蛋過程中最直觀的指標，有研究表明，蛋重對繁殖力和總孵化率有顯著影響[23]，且在一定范圍內，蛋重與孵化率呈正相關[24]。拜城油雞蛋重52.09 g，高于南丹瑤雞和廣西麻雞[25]，但低于宮廷黃雞和羅曼雞。楊寧[26]研究表明，蛋形指數最好為1.35，本研究顯示，拜城油雞的蛋形指數與該值接近。蛋殼強度與蛋殼厚度會影響蛋在運輸加工過程中的破損率，拜城油雞蛋殼強度和厚度大于白來航雞、宮廷黃雞和羅曼雞，可以保證在運輸加工過程中有較低的破損率。哈氏單位是衡量雞蛋新鮮程度的指標，哈氏單位越高表示蛋越新鮮。本研究中，拜城油雞哈氏單位為55.32，明顯低于白來航雞、宮廷黃雞和羅曼雞，這可能是檢測前存放時間過長的緣故。蛋黃顏色是影響消費者選擇偏好的性狀之一，顏色越深越受消費者青睞。研究表明，蛋黃顏色與母雞不同產蛋階段有關[27]。拜城油雞蛋黃顏色為9.28，蛋黃顏色較深，符合消費者消費偏好。

3.3 遺傳多樣性

群體的遺傳多樣性是指群體內所有個體的遺傳變異總和。一個群體的遺傳多樣性越豐富，表明該群體適應環境變化的能力越強，即進化的潛力越大[28]。有效等位基因是反映群體遺傳變異大小的指標，能較好地反映群體中起作用的基因數，其值越大則遺傳多樣性越高。雜合度即基因的多樣性，指某個位點雜合子所占的比例[29]。多態信息含量可直接反映位點的多態性，多態信息含量>0.5的位點為高度多態信息位點，0.25<多態信息含量<0.5的位點為中度多態信息位點，多態信息含量<0.25的位點為低度多態信息位點。莫國東等[30]對廣西三黃雞進行微衛星標記分析，共檢測到144個等位基因，平均有效等位基因數為3.58，18個位點中15個為高度多態位點，3個為中度多態位點，平均多態信息為0.639 3。曲魯江等[31]利用微衛星對我國78個雞品種進行遺傳多樣性分析，平均多態信息含量為0.573，其中雙蓮雞最高，為0.633，狼山雞最低，為0.456。吾買爾江·艾孜木等[32]對拜城油雞的遺傳多樣性進行分析，結果顯示多態信息含量為0.722，高于本研究結果，原因可能是選取的微衛星位點不同或者試驗雞群存在差異，但均為高度多信息位點，表明拜城油雞具有豐富的遺傳多樣性。

拜城油雞為肉蛋兼用型，其肉味鮮美、骨細肉多。本試驗對拜城油雞體重體尺和蛋品質進行測定分析，同時采用微衛星標記進行遺傳多樣性分析，為拜城油雞種質資源的開發利用和保護提供參考資料。