不同殺菌劑對柑橘果實采后炭疽病菌室內毒力測定

張亞男，王印寶，陳 秀，羅震宇，向妙蓮，陳 明

不同殺菌劑對柑橘果實采后炭疽病菌室內毒力測定

張亞男，王印寶，陳 秀，羅震宇，向妙蓮，陳 明*

（江西農業大學 農學院/江西省果蔬采后處理關鍵技術與質量安全協同創新中心/江西省果蔬保鮮與無損檢測重點實驗室，江西 南昌 330045）

【目的】為篩選出防治柑橘炭疽病的有效藥劑。【方法】采用菌絲生長速率法測定了9種殺菌劑對柑橘炭疽病菌（）的毒力作用。【結果】25%吡唑醚菌酯、95%肟菌酯、96%戊唑醇、95%苯醚甲環唑、40%雙胍三辛烷基、75%百菌清、75%肟菌酯戊唑醇、80%代森錳鋅和70%甲基硫菌靈的EC50分別為0.258 1，0.542 7，0.849 2，0.917 4，1.572 1，3.736 2，4.009 8，5.761 6，17.041 7 mg/L。【結論】供試9種殺菌劑對均有一定的抑菌作用，其中25%吡唑醚菌酯毒力最強，70%甲基硫菌靈的毒力最弱。

柑橘炭疽病菌；毒力測定；殺菌劑

【研究意義】由引起的柑橘炭疽病是柑橘產區普遍發生的一種真菌性病害，該病發生快蔓延廣，給柑橘生產造成巨大經濟損失[1-2]。【前人研究進展】可使柑橘在生長季節中整個植株葉片卷曲脫落、枝梢壞死干枯、花柱發褐腐爛，果柄形成“枯蒂”、果實腐爛干縮[3-5]，或使果實腰部呈現圓形或近圓形褐色病斑凹陷，病斑革質或硬化，同時病斑上還分布著大量黑色或朱紅色點狀分生孢子盤及由其分泌的分生孢子，嚴重時病斑擴大可致發病果實脫落[5-6]。此外，屬于典型潛伏型侵染菌，潛伏在柑橘果實內隨采后貯運導致采后腐爛變質，商品價值下降[7-9]。【本研究切入點】化學殺菌劑是目前控制柑橘果實采后炭疽病的主要途徑，在生產中主要應用多菌靈和甲基硫菌靈等苯并咪唑類殺菌劑防治該病害[10-12]。但是隨著此類殺菌劑的大量重復使用，由其導致病原菌的抗藥性等問題越來越嚴重，急需篩選更多高效低毒的殺菌劑交替使用，避免產生抗藥性。【擬解決的關鍵問題】研究以25%吡唑醚菌酯、95%肟菌酯、96%戊唑醇、95%苯醚甲環唑、40%雙胍三辛烷基、75%百菌清、75%肟菌酯戊唑醇、80%代森錳鋅和70%甲基硫菌靈等9種殺菌劑為材料，測定其室內毒力作用，以期為柑橘果實采后炭疽病的防治提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 供試病菌

柑橘炭疽病菌（）由江西農業大學農學院植物病理實驗室提供，-80 ℃保存，試驗前活化待用。

1.2 供試藥劑

80%代森錳鋅400 g/L WP、70%甲基硫菌靈100 g/L WP、75%百菌清400 g/L WP、25%吡唑醚菌酯250 g/L EC、75%肟菌酯戊唑醇WG、95%肟菌酯WG、96%戊唑醇WP、95%苯醚甲環唑WP和40%雙胍三辛烷基WP，由江西農業大學農學院植物保護系農藥實驗室提供。

1.3 供試藥劑對病原菌的毒力測定

本試驗采用菌絲生長速率法，先將各供試藥劑用無菌水配成母液，再用無菌水稀釋，配置成7個不同濃度（每個藥劑的濃度經預備試驗抑制率均在5%～95%）梯度的藥液。用取液器分別吸取2 mL藥液與6 mL PDA培養基（培養基溫度為50 ℃左右），然后在直徑為9 cm的培養皿內均勻混合成帶藥平板培養基，試驗同時設置無菌水空白對照。

活化-80 ℃保存的柑橘炭疽病菌株，置25 ℃黑暗環境培養，7 d后用滅菌打孔器取直徑為7 mm邊緣的菌絲塊，分別轉移到帶藥平板培養基上，每處理3次重復，置于25 ℃恒溫培養箱。當菌絲培養約培養皿直徑2/3時，即可采用十字交叉法測量菌落直徑，取其平均值計算出菌絲生長抑制率。菌絲生長抑制率計算公式如下。

菌絲生長抑制率=[1-(處理菌落直徑-菌餅直徑)/(對照菌落直徑-菌餅直徑)]×100% （1）

1.4 數據處理

利用SPSS 22.0對數據進行統計分析，應用最小二乘法，建立“質量濃度對數-幾率值”的直線方程，其中因變量（）為抑菌率換算而成的幾率值，而自變量（）為實驗藥劑濃度對應的對數值，并分別得出各供試藥劑的EC50值和其相關系數2。

2 結果與分析

9種殺菌劑對的室內毒力測定結果見表1。25%吡唑醚菌酯EC對菌絲生長的抑菌活性最高，EC50為0.258 1mg/L，而70%甲基硫菌靈WP對的毒力最弱，其EC50為17.041 7 mg/L。75%百菌清WP、75%肟菌酯戊唑醇WG、80%代森錳鋅WP、95%肟菌酯、96%戊唑醇WP、95%苯醚甲環唑WP、40%雙胍三辛烷基WP和80%代森錳鋅WP對菌絲抑菌活性次之，其EC50分別為0.542 7，0.849 2，0.917 4，1.572 1，3.736 2，4.009 8，5.761 6 mg/L，EC50值在10 mg/L以下，均有較好的抑菌活性。

表1 9種殺菌劑對柑橘炭疽病菌的室內毒力測定

3 結論與討論

試驗采用菌絲生長速率法分析了9種殺菌劑對柑橘炭疽病菌的毒力，結果表明，除70%甲基硫菌靈對的毒力相對較弱，其它8種殺菌劑對柑橘炭疽病菌均具有較好的抑菌效果，其中25%吡唑醚菌酯對菌絲生長的抑菌效果最好，其EC50僅為0.258 1mg/L。吡唑醚菌酯屬于甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑，該試劑會阻止細胞色素傳遞，導致線粒體不能生產細胞正常代謝所需的能量，細胞死亡，從而抑制孢子萌發和菌絲生長。大量研究表明，炭疽病菌對不同殺菌劑的敏感性存在顯著差異，不同殺菌劑通過一定比例配比也可表現較好的抑菌作用[1,13-14]。王賢達等[1]試驗證實，45%咪鮮胺和60%唑醚·代森聯對的抑菌效果較好，其EC50值依次為0.05，0.11 μg/mL。而陳怡志等[9]采用25%咪鮮胺微乳劑和25%苯醚甲環唑微乳劑質量比6:4復配劑1 000倍液、2 000倍液、3 000倍液均對柑橘炭疽病表現出較好的防治效果。此外，唑胺菌酯與咪鮮胺以5:1的配比對亦有較好的抑菌作用[14]。

基于本試驗室內毒力測定結果，在柑橘果實采后炭疽病防治中，建議優先使用25%吡唑醚菌酯，而95%肟菌酯、96%戊唑醇和95%苯醚甲環唑可作為交替使用殺菌劑。因室內試驗和實踐環境存在較大差異，上述9種殺菌劑對柑橘果實采后炭疽病的貯藏效果，有待后續試驗進一步驗證。

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Toxicity Tests of Different Fungicides Againstof Postharvest Citrus Fruits

ZHANG Ya’nan, WANG Yinbao, CHEN Xiu, LUO Zhengyu, XIANG Miaolian, CHEN Ming*

(Collaborative Innovation Center of Postharvest Key Technology and Quality Safety of Fruits and Vegetables of Jiangxi Province/Jiangxi Key Laboratory for Postharvest Technology and Non-destructive Testing of Fruits & Vegetables, School of Agronomy, Jiangxi Agricultural University, Nanchang 330045, China)

[Objectives] The study was conducted to screen effective fungicides to control citrus anthracnose caused by. [Methods] The toxicity tests of 9 fungicides againstwere compared by using the mycelial growth rate method under laboratory conditions. [Results] The results showed that EC50of 25% Pyraclostrobin, 95% Trifloxystrobin, 96% Tebuconazole, 95% Difenoconazole, 40% Biguanide trioctyl, 75% Chlorothalonil, 75% Trifloxystrobin tebuconazole, 80% Mancozeb and 70% Thiophanate methyl were 0.2581 mg/L, 0.5427 mg/L, 0.8492 mg/L, 0.9174 mg/L, 1.5721 mg/L, 3.7362 mg/L, 4.0098 mg/L, 5.7616 mg/L and 17.0417 mg/L, respectively. [Conclusion] All 9 fungicides had certain inhibition effects on, of which 25% Pyraclostrobin had the best one, while 70% Thiophanate methyl had the weakest.

; toxicity test; fungicide

S436.66

A

2095-3704（2021）02-0150-03

2021-03-10

2021-04-15

江西省自然科學基金項目(20192BAB204018)和江西省果蔬采后處理關鍵技術及質量安全協同創新中心項目(JXGS-03)

張亞男（1993—），女，碩士生，主要從事果實采后生理研究，zyn781246@163.com，*通信作者：陳明，副教授，博士，mingchen@jxau.edu.cn。