電化學發光免疫法與酶聯免疫法檢測標志物比較研究探究實踐

紀芳芳

（山東國欣頤養集團新汶中心醫院檢驗科,山東 泰安 271219）

乙肝病毒是誘發乙型肝臟類疾病的重要原因，不僅會引發肝炎、同時也會造成肝硬化、肝癌等疾病，嚴重時還會對患者生命造成影響。我國乙型肝炎病毒的攜帶人數呈不斷上升的趨勢，有效檢測病毒則成為了主要的研究方向[1]。傳統檢測采用酶聯免疫吸附法進行檢測，但受試劑保存與試劑效應的影響。這種檢測方法無法實現充分檢測的要求，電化學發光免疫檢測法在檢測方面具有一定優勢，但仍需要臨床研究加以考證?；诖?，本次研究選取我院于2019年10月至2020年9月收治的乙肝病毒感染者137例為觀察對象，分析不同檢測方法的檢測效果?，F報道如下：

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取我院于2019年10月至2020年9月收治的乙肝病毒感染者137例為研究對象。其中男性患者67例，女性患者70例，年齡介于24 歲至的67 歲之間，平均42.32±的2.34歲?；颊叩幕緮祿嬖诓町?，但不具有統計學意義。研究開始前已征得患者的同意，并簽署了相應文件。研究開始前，提交本院醫學倫理委員會進行審查，針對研究是否有效保護了患者的隱私，及檢測方法是否會對患者造成傷害等問題進行了審查。審查結果顯示：本次研究復合醫學倫理中關于尊重患者權益的要求，研究方法不會對患者造成傷害，可以進行研究。

依據乙肝病毒感染的特診與本次研究的需求，設定納入標準為：第一、經檢查與診斷確診為乙肝病毒感染者的患者；第二、臨床資料完整，且語言功能正常的患者；第三、同意參與研究，并簽署了相應的文件。設定排除標注為：第一、合并有腦部疾病、及其他臟器疾病的患者；第二、罹患惡性腫瘤的患者；第三、患有精神疾病，或存在語言功能障礙的患者；第四、臨床資料不完整，或不愿意參與研究的患者。

1.2 檢測方法

對患者行酶聯免疫吸附法與電化學發光免疫法進行檢測，主要檢測患者的血清標志物，包括HbsAg、HbsAb、HbeAg、HbeAb 及HbcAb 等。患者晨起后，維持空腹狀態進行采血，采血量為5mL。將采集到的血液分別至于兩支試管中，對血液樣本進行離心分離處理，維持離心處理機的轉速為3000r/min，設置離心時間為5min。完成離心處理后，對血清樣本進行檢查。

首先使用酶聯免疫吸附進行檢測，使用酶標儀（AWARENESS）及其配套試劑進行檢測，嚴格按照試劑盒提示的檢測過程進行操作，在檢測過程中精確記錄檢測數據[2]。其后使用電化學發光免疫法進行檢測，使用自動化發光免疫分析儀（cobas e 411）及其配套試劑進行檢測。按照試劑盒上提示的檢測過程進行操作，在檢測過程中精確記錄檢測數據[3]。

1.3 觀察指標

①統計兩種檢測方式血清標志物情況，②統計兩組患者檢測的準確率。

1.4 統計學分析

研究采用SPSS21.0 對數據進行分析，計數資料以n（%）形式表示，組間比較應用卡方檢驗，若P＜0.05，差異存在統計學意義。

2 結果

2.1 在血清標志物的檢測中，觀察組的檢出率高于對照組，其中HbsAg、HbsAb 檢出率具有統計學意義（P<0.05），但HbeAg、HbeAb 及HbcAb 的檢出率差異無統計學意義（P>0.05）。見表1。

表1 不同檢測方法通過血清標志物診斷結果統計表[n（%）]

2.2 對照組檢測的準確率超過85%，接近90%，觀察組的檢測準確率接近100%，僅1例未檢出，差異具有統計學意義（P<0.05）。見表2。

表2 不同檢方法檢測準確率情況統計表n（%）

3 討論

乙肝病毒是誘發乙型肝炎的主要原因，病毒傳播渠道較多，感染后果也較為嚴重。乙肝病毒屬于DNA 病毒，具體屬于嗜肝DNA 病毒科目。病毒具有耐高溫、耐低溫的特征，在不同季節中均能存活且活性較高。同時，乙肝病毒抗紫外線能力也較強，難以被徹底消除，臨床治療難度較大[4]。而當乙型肝炎侵入患者機體后，會首先攻擊患者的肝臟細胞，在病毒進入肝臟后能夠迅速實現定植，并在此基礎上進行復制與繁殖，從而干擾細胞功能，引發干細胞的損傷，最終導致乙型肝炎或其他肝臟疾病的發生。在目前的臨床研究中，提示乙型肝炎病毒誘發肝臟類疾病的基礎上，還具有一定的泛酸性，因而病毒侵入機體后不僅會損傷患者的肝臟細胞，還會對患者胃部細胞造成損害[5]。

在臨床檢測中，血清標志物的免疫反應是檢測乙肝病毒的重要指標，針對乙肝病毒的特征與患者的機體情況，臨床中的檢測項目主要包括HbsAg、HbsAb、HbeAg、HbeAb 及HbcAb 等[6]。其中HbsAg 為乙肝病毒的外殼蛋白，這種蛋白不具備傳染性，患者在感染乙肝病毒后，在1 周至2 周的范圍內，患者血清中會出現HbsAg，患者感染2 個月至6 個月范圍內，患者HbsAg 的水平會發生顯著升高，但這種升高一般不會超過檢測值，但部分患者的HbsAg 水平也會突破檢查值，呈現出持續陽性的狀態。在HbsAg 的刺激下，患者機體會產生HbsAb 進行對抗，HbsAb 能夠與HbsAg 機進行結合，并在機體內其他免疫系統的協助下，共同發揮清除機體病毒的作用[7]。HbsAb 屬于中和性抗體類型，能夠有效反映出患者被感染后，機體的自主免疫情況，是檢測乙肝病毒感染的重要指標[8]。

電光化學發光免疫法與酶聯免疫吸附法是臨床中常用的血清檢測方法。酶聯免疫吸附住法主要結合樣本與酶標抗原所發生的特定反應進行判斷。這一檢測方法的檢測過程中較為簡單，檢測成本也較低，因而在臨床中被廣泛應用。電化學發光免疫法充分發揮儀器檢測作用的一種方法，基于化學檢測中不同待檢樣本的濃度多對應的發光體系不同，而實現檢測效果的檢測方法。這一檢測方法具有檢測范圍廣，操作簡單的優勢，在臨床中使用范圍較廣。針對兩種檢測方式對乙肝病毒的檢測效果臨床中存在較多不同的報道。部分報道提示酶聯免疫吸附檢法因突出了試劑的作用，因而檢測結果精確性較高。但部分報道也提示了電化學發光免疫法發揮儀器的作用，因而其檢測結果更為穩定。這兩種檢測方法具有不同的優勢，臨床效果也不同。本次研究中觀察組的血清標志物檢出率高于對照組，其中HbsAg、HbsAb 檢出率具有統計學意義（P<0.05），但HbeAg、HbeAb 及HbcAb 的檢出率差異無統計學意義（P>0.05）。同時觀察組的檢測準確率接近100%，僅1例未檢出。而對照組檢測的準確率超過85%，接近90%。這一結果提示：電化學發光免疫檢測法的靈敏度較高，檢查效果也較好，基本實現了100%檢測的目的。分析導致這一差異的原因，應為酶聯免疫吸附法的無法對檢測試劑的依賴較重。而每次檢測的結果均會受到試劑質量的影響，而電化學發光免疫檢測法對試劑的依賴較弱，因而實現的檢測效果較好。

綜上，電化學發光免疫檢測法能夠實現充分檢測的要求，應在臨床中推廣使用。