桉葉油抗金黃地鼠皮脂腺斑增生的研究

魏露　朱明芳

〔摘要〕 目的 觀察桉葉油對金黃地鼠皮脂腺斑的影響，探討外用桉葉油乳膏治療痤瘡的機制。方法 將24只雄性金黃地鼠隨機分為空白組、基質組、桉葉油乳膏組、陽性對照組，每組6只，分別于雙側皮脂腺斑處涂抹蒸餾水、基質、桉葉油乳膏、0.025%維A酸乳膏，連續給藥4周后，觀察各組金黃地鼠皮脂腺斑面積變化及組織病理學改變。結果 給藥后，與空白組、基質組相比，各治療組金黃地鼠同側皮脂腺斑面積均減小，差異有統計學意義（P<0.05），同時皮脂腺厚度減少，腺體萎縮，腺葉數量減少，排列疏松;與陽性對照組相比，桉油乳膏組右側皮脂腺斑的面積縮小，差異有統計學意義（P<0.05），同時皮脂腺腺體較小，排列松散。結論 桉葉油能有效抑制皮脂腺增生，可能是其治療痤瘡的作用機制之一。

〔關鍵詞〕 皮脂腺斑;痤瘡;桉葉油;金黃地鼠

〔中圖分類號〕R285.5? ? ? ?〔文獻標志碼〕A? ? ? ?〔文章編號〕doi：10.3969/j.issn.1674-070X.2021.03.006

〔Abstract〕 Objective To observe the effect of eucalyptus oil on sebaceous gland spots in golden hamsters， and explore the mechanism of external use of eucalyptus oil cream in the treatment of acne. Methods 24 male golden hamsters were randomly divided into blank group， matrix group， eucalyptus oil cream group and positive control group， with 6 rats in each group. Distilled water， matrix， eucalyptus oil cream and 0.025% vitamin A cream were applied to bilateral sebaceous gland spots. After continuous treatment for 4 weeks， the change of sebaceous gland spots area of golden hamster in each group and histopathological changes were observed. Results After administration， compared with blank group and matrix group， the ipsilateral sebaceous plaque area of golden hamsters in each treatment group decreased， and the difference was statistically significant （P<0.05）. At the same time， the thickness of sebaceous gland spots decreased， the gland atrophic， the number of glandular leaves decreased， and the arrangement was loose. Compared with the positive control group， the area of sebaceous spots on the right side of the eucalyptus oil cream group was reduced， and the difference was statistically significant （P<0.05）. Meanwhile， the sebaceous gland spots were small and loosely arranged. Conclusion Eucalyptus oil can effectively inhibit sebaceous gland spots hyperplasia， which may be one of the mechanisms of acne treatment.

〔Keywords〕 eucalyptus oil; acne; golden hamsters; sebaceous gland spots

痤瘡是多因素介導的毛囊皮脂腺單位的慢性炎癥性皮膚病，多發生于油性皮膚[1]。由于發病率高、局部疼痛和永久性疤痕的產生，對患者的社交、心理健康造成了極大的影響。調查顯示，痤瘡患者的依從性及治療滿意度并不理想[2]。目前尚無理想藥物滿足臨床需求，因此，尋找療效確切、安全性高的藥物，是皮膚科同道共同努力的方向。桉葉油是桃金娘科植物藍桉、樟科植物樟或是上述兩科同屬其他植物經水蒸氣蒸餾得到的揮發油，有特殊的芳香氣味。桉葉油具有抗菌、抗氧化、保濕、修復皮膚屏障、促滲、殺蟲及防腐等作用[3-6]，在醫藥、化妝品、食品加工等領域應用廣泛。課題組前期研究表明桉葉油對痤瘡丙酸桿菌（Cutibacterium acnes， C. acnes）具有抑制作用[7]。動物皮膚毒理實驗顯示40%桉葉油無刺激性、急性毒性、過敏性，安全性高[4]。在此基礎上，課題組成功申請了專利：一種桉葉乳膏及其制備方法（專利號：ZL201510367377.5）。基于良好的促滲透性，桉葉油在平衡皮脂穩態中極具潛力。皮脂是由皮脂腺脂質和細胞間脂質組成的混合物，主要由皮脂腺分泌。本研究以雙側腹部出現皮脂腺斑的金黃地鼠為實驗對象，初步探討桉葉油對皮脂腺斑組織形態學的影響。

1 材料與方法

1.1? 實驗材料

1.1.1? 動物? 雄性SPF級金黃地鼠24只[實驗動物許可證號：SCXK（京）2016-0011]，體質量110～130 g，由中南大學實驗動物學部購自北京維通利華實驗動物技術有限公司，適應性飼養1周后開始實驗。

1.1.2? 主要藥物與試劑? 桉葉油（批號：20190612，吉安市青原區惜緣香料油有限公司）;自制桉葉油乳膏，其制作方法及步驟參考課題組的前期研究[7]。10%水合氯醛（分析純，上海山浦化工有限公司）;蘇木素-伊紅染色液（貨號：3201121，2 500 mL，廣州維格斯生物科技有限公司）;0.025%維A酸乳膏（商品名：迪維，規格：15 g/支，重慶華邦制藥有限公司）

1.1.3? 主要儀器? JK-6生物組織攤烤片機（武漢俊杰電子有限公司）;輪轉石蠟切片機[型號：RM2235，徠卡顯微系統（上海）貿易有限公司];冰箱（型號：BCD-226SKA，青島海爾股份有限公司）;顯微鏡（型號：DM2000 LED，德國Leica公司）。

1.2? 分組與給藥

受試動物按隨機數字表分為空白組、基質組、桉葉油乳膏組[0.65 g生藥/（kg·d）]、陽性對照組[0.025%維A酸乳膏，5.24 g/（kg·d）]，給藥方法為外用，給藥部位為雙側皮脂腺斑處，2次/d，連續用藥4周。空白組不予任何藥物處理?！吨兴幋筠o典》中桉葉的用法用量：“內服：煎湯，6～15 g;或研末，每次1 g，每日4次。”根據人和金黃地鼠的等效劑量換算公式[8-9]：

非標準體質量劑量（Db）=標準體質量劑量（Da）×換算系數（Rab）×校正系數（Sb）。

得金黃地鼠桉葉油乳膏的等效劑量為0.65 g/kg。

1.3? 皮脂腺斑大小測量

給藥前及末次給藥24 h后，用剃須刀剔除金黃地鼠雙側側腹部毛發，使皮脂腺斑充分暴露，金黃地鼠取俯臥位，在強光照射下，用照相機以同一焦距記錄皮脂腺斑大體照片，并用游標卡尺測量并記錄皮脂腺斑的最大橫徑（DT）、最大縱徑（DL），計算DT×DL。

1.4? 組織病理學

末次用藥24 h后，剪下每組鼠左側腹部皮脂腺斑，放入10%甲醛固定液中固定，經脫水、石蠟包埋、切片、HE染色后，光鏡下觀察組織病理學變化。

1.5? 統計學處理

采用SPSS 26.0統計軟件分析數據，計量資料采用“x±s”表示，數據符合正態分布及方差齊性時，組間多重比較采用單因素方差分析，并以LSD法進行兩兩比較，以P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1? 皮脂腺斑面積比較

治療前，空白組、基質組、桉葉油乳膏組、陽性對照組4組皮脂腺斑大小比較，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。治療后，各組皮脂腺斑大小較治療前均增大，考慮與飼養致體表面積增大有關。治療后，與空白組相比，陽性對照組和桉葉油乳膏組同側皮脂腺斑面積均明顯縮小，差異有統計學意義（P<0.05）;與陽性對照組相比，桉葉油乳膏組右側皮脂腺斑的面積縮小，差異有統計學意義（P<0.05）。詳見表1、圖1。

2.2? 組織病理學觀察

空白組：金黃地鼠皮脂腺呈多層分葉狀，腺體體積大，排列緊密;基質組：部分皮脂腺較大，排列較厚;桉葉油乳膏組：皮脂腺腺體萎縮，較空白組數量減少，排列疏松，出現液化小囊;陽性對照組：皮脂腺腺葉小，排列松散。詳見圖2。

3 討論

痤瘡病因復雜，傳統觀念認為其發病與痤瘡丙酸桿菌感染引起的炎癥反應、雄激素誘導的皮脂分泌過量、毛囊角化過度、遺傳等因素有關[11-12]。隨著生活水平的提高，國人的飲食習慣正在向西方飲食轉變，其特點是紅肉、含糖飲料的攝入增加，同時，谷類、蔬菜的攝入減少[13]。最新研究[14-16]表明，痤瘡是一種發生于毛囊皮脂腺的代謝綜合征。皮脂含量增加、皮脂成分改變等皮脂穩態失衡與痤瘡發病密切相關[17-18]。皮脂腺是痤瘡的主要靶器官，其結構變化對皮脂分泌功能的影響巨大。課題組前期研究表明桉葉油對C. acnes有良好的抑菌活性[7]，根據痤瘡的發病機制，現進一步研究其對皮脂腺斑組織形態學的影響。

桉葉別名桉樹葉、藍桉葉、羊草果葉，其味辛、涼，《中華本草》謂“疏風解表、清熱解毒;化痰理氣、殺蟲止癢”。Lin等[19]通過芳香療法，發現桉葉油可以抗疲勞、抗氧化、抗炎。同時，Alam等[20]研究表明在大鼠燒傷模型中桉葉油納米乳具有促進創面修復的優勢。為了防止皮脂分泌過量堵塞毛孔、影響皮膚屏障，Isoda等[21]研發了含有外源神經酰胺及桉葉提取物的弱酸性溫和泡沫潔面乳用于痤瘡患者的護理，結果顯示，與對照組相比，痤瘡患者經皮水分丟失量顯著下降，神經酰胺水平顯著增加，癥狀改善明顯。

金黃地鼠側腹部皮脂腺斑的生物學特征與人相似，是國內外學者公認的研究藥物抗雄激素及皮脂腺增生活性的動物模型[22-23]。金黃地鼠皮腺腺斑面積與雄激素含量有關，可以反應藥物作用強弱。本研究結果顯示，與空白組相比，陽性對照組、桉葉油乳膏能使皮脂腺斑面積縮小，差異具有統計學意義（P<0.05）。據實驗結果可見，與陽性對照組相比，桉葉油乳膏減少金黃地鼠皮脂腺斑大小的作用更強。組織病理學結果顯示，桉葉油乳膏能使皮脂腺體積、厚度、腺層、數目減少，腺體萎縮，組織結構改變明顯。因此，桉葉油具有抑制皮脂腺增生的作用，使皮脂腺斑萎縮，進而發揮防治痤瘡的作用。

本研究以金黃地鼠皮脂腺斑面積及組織病理學變化直觀地反映了桉葉油對痤瘡的治療作用，結果表明桉葉油其能夠有效抗皮脂腺斑增生，然而其對皮脂分泌的影響及防治痤瘡的作用機制有待進一步研究發現。

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