張傳運
希杰(聊城)生物科技有限公司 山東 聊城 252000
玉米皮由淀粉、纖維素及海量植物蛋白等物質構成,可用于蛋白飼料的加工發酵,以提升其適口性及營養價值[1]。通過酵母菌發酵的方法,實現玉米皮中各類物質的轉化,在酵母菌作用下轉化為單細胞蛋白,該過程主要依賴飼料化菌株接種至玉米糖化醪,經反復培養形成穩定菌液,與玉米皮產生固態發酵效果。由此,可在短時間內進入發酵狀態,提升單細胞蛋白的產出率。
1.1 原材料、試劑選擇 試驗涉及聚乙烯醇復合凝膠、玉米皮。聚乙烯醇復合凝膠由某生物公司提供。玉米皮購于市場。試劑:硫酸銨、磷酸二氫鉀、硫酸鎂,均為分析純。玉米皮以40目過篩,營養鹽液加入量為干料總量1%為宜,保持60%左右含水量,行滅菌處理,121℃下滅菌25min。
1.2 菌種選擇畢赤酵母菌。由微生物保藏中心提供。
1.3 儀器與設備選擇 LDZX―50KBS立式壓力蒸汽滅菌器、SW_CJ―1F超凈工作臺、MJ―160型霉菌培養箱、TVR強制循環蒸發器。
2.1 發酵工藝 準備30m L西林瓶24個為厭氧制備容器,取玉米皮0.6g,加入蒸餾水30m L。準備100m L三角瓶24個進行好氧培養,取玉米皮0.6g,加入蒸餾水30m L。均進行密封。置于121℃,15MPa高壓環境滅菌,再接入15m L酵母菌液,置于25℃菌種培養箱,150r/min,均培養一個時間梯度即24~48h。
2.2 測定方法 采用兩步法實施優化與測定通過PB設計,對影響玉米皮發酵因素進行篩選,再利用響應面優化中Box―Behnken中心組合設計,建立響應面模型,確定培養基組成[2]。
2.3 數據處理 使用DPS對本次試驗數據進行統一處理。
3.1 玉米皮組分分析 經試驗測定,玉米皮中含有蛋白質、淀粉、半纖維素、纖維素、木質素、脂肪等物質,具體含量見表1。

表1 玉米皮組分及含量
3.2 玉米皮制備菌體蛋白飼料的分析
3.2.1 麩皮添加量的控制 試驗通過玉米皮和麩皮混合物發酵,麩皮占比分別以O、2、5、10、15g/d L,在占比上升時可誘導酵母發酵,酶活力和蛋白質均呈上升趨勢,如圖1所示:

圖1 麩皮添加量
3.2.2 接種體積分數的控制 以不同接種體積分數酵母菌接入,其發酵效果存在差異性。當接種體積分數為10%左右時,其分數達到最高點,因此建議該區域作為關鍵控制點。具體如圖2所示:

圖2 接種體積分數
3.2.3 發酵時間的控制 發酵時間延長至7d左右,玉米皮中的木聚糖酶活和真蛋白產量大幅上升,達到了1000IU/g及20%以上,或在于兩菌株相互促進的效果,因此在玉米皮發酵時間上,可取7d值為宜。具體影響如表2所示:

表2 發酵時間影響
綜上所述,采用酵母菌發酵玉米皮制備菌體蛋白飼料,應注重對麩皮添加量、接種體積分數及發酵時間控制,以提升發酵效率和降低成本,達到良好的發酵質量。