劉 冬,丁兆忠,吳忠良,韓慕俊,胡 蕾
(滄州職業技術學院,河北滄州061000)
隨著人們對畜產品品質要求的提升,畜牧業的發展應朝著綠色、健康、可持續發展的方向邁進。在養殖生產中,綠色添加劑受到廣泛的關注和研究。茶多酚是茶葉提取物中主要的生物活性物質,其占茶葉干物質的20%~40%,其中不同種類的茶葉,其茶多酚含量不同(周巧儀等,2018;Khan等,2007)。研究表明,茶多酚其具有消炎、抗氧化、抗癌、抑菌、抗腫瘤等生物學功能,在飼料中可作為綠色、安全的抗氧劑使用,不僅能清除動物機體內因氧化應激產生的多余自由基,提高動物的抗氧化能力,并能對飼料品質起到抗氧化功能,防止飼料保存不當而氧化變質(周巧儀等,2018)。因此,本試驗在基礎日糧中添加一定量的茶多酚,探究其對育肥豬生長性能、肉品質及抗氧化功能的影響,進而確定其在生長育肥豬日糧中的適宜添加比例,為其更好地在畜牧養殖生產中應用提供可靠的參考依據。
1.1 試驗材料 試驗所用茶多酚純度含量為75%,購買于名山克魯尼茶葉有限責任公司。
1.2 試驗動物及設計 試驗選用胎次一致、體重(80.30±3.50)kg的健康杜長大生長育肥豬240頭。采用單因素完全隨機分組,將其分為5組,每組8個重復,每個重復6頭豬,試驗周期30 d;對照組飼喂玉米-豆粕型基礎日糧,試驗組依次在基礎日糧中添加300、400、500 mg/kg和600 mg/kg的茶多酚,基礎日糧組成及營養水平如表1所示。

表1 基礎日糧組成及營養水平
1.3 飼養管理 試驗地點在獻縣興健養殖有限責任公司,在開始試驗前一周對豬舍進行消毒,選用堿液噴灑消毒,第2天再用清水沖洗干凈。試驗期間豬只自由采食和飲水,每天清掃圈舍1次,每天對豬舍進行通風換氣。每天記錄采食量、溫濕度和腹瀉情況,定期進行消毒,按照常規免疫程序對豬只進行免疫。
1.4 樣品采集
1.4.1 血液樣品 在試驗第30天早上,每個組選10頭體重接近的豬用抗凝管和采血針靜脈采血15 mL,3000 r/min離心10 min,將分離的上層血清于EP管中,-20℃保存,用于測定試驗豬的血清抗氧化指標。
1.4.2 組織樣品 試驗結束的當天早上,每個組選擇體重相近的10頭豬電暈放血屠宰,按照屠宰流程進行屠宰。選取背最長肌樣品,用于肉品質指標的測定。屠宰后取肝臟樣品,用于組織中抗氧化酶的測定,其余樣品保存于-20℃冰箱中備用。
1.5 指標測定及方法
1.5.1 生長性能的測定 試驗開始和結束當天對試驗豬進行空腹稱重,用于計算平均日增重。記錄試驗期間的采食量,用于計算平均日采食量及料重比,計算公式如下:
平均日增重/g=(試驗末重-試驗初重)/試驗天數;
平均日采食量/g=總采食量/試驗天數;料重比=平均日采食量/平均日增重。
1.5.2 肉品質的測定 參照《畜禽肉品質測定方法》(NY-T 1333-2007)和《飼料中粗脂肪的測定》(GB/T 6433-1994)進行樣品的采集和測定。
大理石紋評分:肌肉在4℃冰箱放置24 h后,對照大理石紋評分圖(NPPC,1991)進行評定。脂肪呈痕量分布為1分;脂肪呈微量分布為2分;脂肪呈少量分布為3分;脂肪呈適量分布為4分;脂肪呈過量分布為5分。兩級之間可設0.5分。
pH:用便攜式酸度計直接測定宰后45 min內的pH。
滴水損失:將肉樣剪成長5 cm、寬3 cm、厚2 cm的肉塊,稱重為m1,用魚線掛住肉樣懸放于保鮮盒中,放在4℃條件下24 h后,用濾紙吸干肉樣表面的水分,再次稱重為m2。

剪切力:取6 cm×3 cm×3 cm的肉樣,用嫩度剪切儀測定剪切力值。
肉色:屠宰后當場用肉色儀測定45 min內的背最長肌的肉色亮度(L*)、紅度(a*)和黃度(b*)值。
肌內粗脂肪:取鮮樣100 g左右的外表無脂肪的肌肉樣本,剪碎,在65℃烘箱烘24 h,粉碎后取1 g左右肌肉粉樣用索氏提取器方法進行粗脂肪含量的檢測。
1.5.3 抗氧化指標的測定 采用南京建成的試劑盒測定血清和肝臟的總超氧化物歧化酶(TSOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)和過氧化氫酶(CAT)的活性,總抗氧化能力(T-AOC)以及還原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的含量。具體操作步驟按說明書進行。
1.6 數據統計與分析 試驗數據采用SPSS 18.0統計軟件進行單因素方差分析,并用Duncan’s法進行組間數據的多重比較,數據結果以“平均數±標準差”表示,P<0.05表示組間數據差異顯著。
2.1 不同水平茶多酚對育肥豬生長性能的影響從表2數據可知,與對照組相比,試驗2組和3組的平均日增重顯著增加11.44%、9.78%(P<0.05),試驗1組和試驗4組與對照組相比差異不顯著(P>0.05);試驗2組的料重比較對照組顯著降低8.02%(P<0.05),其他試驗組的料重比略低于對照組,但差異不顯著(P>0.05);各組間的末重、平均日采食量差異不顯著(P>0.05)。

表2 不同水平茶多酚對育肥豬生長性能的影響
2.2 不同水平茶多酚對育肥豬肉品質的影響由表3可知,在生長育肥豬日糧中添加茶多酚后,對pH、滴水損失、肌內脂肪含量及肉色等肉品質指標無顯著影響(P>0.05)。但對大理石紋評分和剪切力有顯著影響,試驗2組的大理石紋評分較對照組顯著提高29.34%(P<0.05),其他試驗組較對照組略有提高,但差異不顯著(P>0.05);試驗2組和3組的剪切力較對照組顯著降低11.69%、9.00%(P<0.05),試驗1組和4組略低于對照組,但差異不顯著(P>0.05)。

表3 不同水平茶多酚對育肥豬肉品質的影響
2.3 不同水平茶多酚對育肥豬抗氧化功能的影響 由表4可見,與對照組相比,試驗2、3、4組的總抗氧化能力顯著提高27.03%、22.70%、27.57%(P<0.05),試驗1組略有提高,但差異不顯著(P>0.05);試驗1、2、3、4組的谷胱甘肽過氧化物酶含量較對照組顯著提高7.35%、9.38%、8.45%、7.79%(P<0.05);試驗2組的丙二醛含量較對照組顯著降低8.01%(P<0.05),其他試驗組略低于對照組,但差異不顯著(P>0.05)。說明在生長育肥豬日糧中添加茶多酚可以顯著提高其血液抗氧化能力。

表4 不同水平茶多酚對育肥豬血液抗氧化功能的影響
由表5可見,與對照組相比,試驗1、2、3、4組的總抗氧化能力較對照組顯著提高10.42%、22.92%、41.67%、31.25%(P<0.05);試驗2、3、4組的谷胱甘肽過氧化物酶含量較對照組顯著提高13.16%、12.40%、12.33%(P<0.05),試驗1組略高于對照組,但差異不顯著(P>0.05);試驗2、3、4組的丙二醛含量較對照組顯著降低27.24%、24.73%、25.45%(P<0.05),試驗1組略低于對照組,但差異不顯著(P>0.05)。說明在生長育肥豬日糧中添加茶多酚可以顯著提高其肝臟抗氧化能力。

表5 不同水平茶多酚對育肥豬肝臟抗氧化功能的影響
3.1 不同水平茶多酚對育肥豬生長性能的影響本試驗研究結果表明,在生長育肥豬飼糧中添加茶多酚可以顯著提高平均日增重,顯著降低料重比,有效地提高了育肥豬的生長性能。陳明等(2019)也得到茶多酚可以顯著提高蘇姜育肥豬生長性能的結果,且最適添加量為300 mg/kg。而晁婭梅等(2016)的研究結果表明,在育肥豬基礎日糧中添加400 mg/kg的茶多酚能夠提高其生長性能。徐坤等(2009)研究結果表明,在育肥豬日糧中添加0.1%、0.3%、0.5%的茶多酚,育肥豬平均日增重分別提高了7.8%、11.9%、14.0%。但王建華等(2011)和王玉龍等(2014)的研究結果發現,0.5%、1.0%的茶多酚和250、500 g/t茶葉提取物對生長育肥豬的生長性能卻無顯著影響。以上試驗不同的結果可能與試驗所用茶多酚純度及添加量,或者豬的品種及生長階段不同有關。茶多酚提高生長育肥豬的機理主要是茶多酚能夠改善谷胱甘肽過氧化物酶等的活性,并能協同維生素C增強動物機體的抗氧化水平;除此之外,茶多酚可以和病毒蛋白等物質結合,其代謝產生過氧化氫可以殺滅病原菌,茶多酚還能促進動物腸道內有益菌的生長,調節腸道環境,從而促進生長(孫朋朋等,2014)。
3.2 不同水平茶多酚對育肥豬肉品質的影響有關茶多酚改善生長育肥豬肉品質的報道較多。茶多酚可以通過提高動物機體的抗氧化功能,減輕動物機體氧化狀態,減少肌肉中乳酸含量,降低肌肉滴水損失,提高肌肉嫩度;并且可以抑制肉中脂肪酸氧化,降低膽固醇含量,從而改善肉質。蔡海瑩等(2007)研究結果表明,在育肥豬日糧中添加400 mg/kg的茶多酚,可以提高豬肉的抗氧化能力,增強豬肉的系水力,穩定豬肉的肉色,對貨架期具有很好的效果。王玉龍等(2014)的研究結果發現,試驗添加500 g/t的茶葉提取物可顯著降低滴水損失,穩定肉色;同時,對嫩度、pH和大理石紋評分也具有改善作用。本試驗研究結果表明,在生長育肥豬日糧中添加茶多酚,可以顯著改善大理石評分,顯著降低肌肉的剪切力,pH、滴水損失和肉色(L*、a*、b*)值略有提高,說明茶多酚很好地改善了豬肉品質,與陳君君(2019)在生長豬上的研究結果相似。L*為肌肉亮度,茶多酚可以保護細胞膜脂質過氧化的損傷,保護其完整性和穩定性,進而減少肉質表面滲水現象的出現,降低肉質表面反光,從而保證L*值的穩定(蔡海瑩等,2007);a*值可間接反映肌肉內肌紅蛋白的含量,而茶多酚可以減緩肌紅蛋白轉換為高鐵蛋白;b*代表黃度,可反映肌肉被氧化的程度。以上結果表明,茶多酚可以起到穩定肉色的效果,結果略微的差異,可能與茶多酚的添加量有關,但是整體趨勢一致。動物被屠宰后,其肌肉中大量的脂質過氧化物會發生氧化反應,細胞膜嚴重受損,導致pH降低、肉色變淡和系水力下降等問題,而茶多酚可以有效地清除脂質氧化產生的自由基,保護細胞的完整性,進而改善豬肉品質。當肌肉pH降低的時候,肌漿蛋白和肌原纖維蛋白會被降解,導致肉質顏色變白、肉質松軟和液體滲出而形成PSE肉(陳艷珍,2012)。
3.3 不同水平茶多酚對育肥豬抗氧化功能的影響 機體內存在的各種抗氧化酶能夠互相合作,共同構成機體對抗自由基的第一道防線,其中SOD、GSH-Px和CAT是最重要的抗氧化酶(趙嬌,2013)。本試驗研究結果表明,在生長育肥豬日糧中添加一定量的茶多酚可以顯著提高血液和肝臟中的總抗氧化能力和谷胱甘肽過氧化物酶活性,降低丙二醛含量。說明茶多酚可通過提高動物機體抗氧化酶活性的途徑有效地改善動物機體的抗氧化功能。張幸彥等(2016)在后背母豬的試驗中得出,添加100 mg/kg的茶多酚,母豬妊娠90 d及產后10 d血清總抗氧化能力分別顯著提高22.73%、11.14%,丙二醛含量分別顯著降低28.68%、12.38%。在生長育肥豬日糧中添加400 mg/kg茶多酚顯著提高了影響抗氧化功能的相關基因的表達(晁婭梅等,2016)。在仔豬日糧中添加0.8%的茶粉,奶仔豬血清中CAT、GSH、SOD含量顯著提高73.9%、477.8%、84.6%,丙二醛含量顯著降低17.9%(嚴理等,2017);茶多酚也可顯著提高小腸黏膜中CAT、GSH、SOD活性(薛菠等,2017)。由此可見,茶多酚能夠很好地改善動物各個階段及各種組織的抗氧化能力。茶多酚提高動物機體抗氧化功能的機理包括以下幾方面:酚羥基提供的H+與氧自由基結合發生氧化還原反應,中止了氧化連鎖反應;能夠有效抑制自由基脂氧化酶、過氧化酶等的活性;可以增強GSH-Px、T-SOD等抗氧化酶活性(付石軍等,2014);調控Nrf2、MAPK等信號通路(嚴理等,2017)。茶多酚不僅可以降低氧化酶對氧化反應的催化作用 (陳小雷等,2016),而且其多酚結構可與鐵、鈣和銅等多種金屬離子結合,進而抑制由金屬離子催化的相關脂蛋白氧化反應,從而保護抗氧化酶活性(王來娣等,2012)。
在生長育肥豬飼糧中添加茶多酚可以提高其生長性能,改善肉品質;提高血液和肝臟中總抗氧化能力、谷胱甘肽過氧化物酶活性,降低丙二醛含量,綜合各項指標數據結果,在生長育肥豬日糧中添加400 mg/kg的茶多酚較適宜。