子癇前期孕婦血清中輔助性T細胞17相關細胞因子的表達水平及其相關性研究

郭霞

（濮陽市婦幼保健院 產科，河南 濮陽 457000）

據統計，孕婦發生子癇前期的概率為10%，是妊娠期的特有疾病，一旦發病就會累及多種器官功能，從而引發一系列并發癥，國內外研究認為子癇前期是導致孕產婦不良妊娠結局或死亡的主要原因之一［1-2］。隨著臨床對該疾病研究的不斷深入，醫學者發現其發生與免疫因素具有密切聯系，輔助性T 細胞17（Th17）屬于介導炎性反應的細胞亞群，可分泌出IL-17、IL-21、IL-23 等多種細胞因子，通過大量釋放活性物質（如過氧化氫、氧自由基等）損害血管內皮細胞，由此可以推測出在子癇前期孕婦的發病及發展過程中，Th17 可能參與了炎性病理機制［3］。但目前對于子癇前期孕婦血清中Th17 相關細胞因子的變化與發病機制的關系尚未明確，因此，本文通過研究檢測，分析了子癇前期孕婦血清中Th17 相關細胞因子的表達水平與病情發展的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇濮陽市婦幼保健院產科2018 年10 月至2020 年6 月收治的90 例子癇前期孕婦作為此次研究的觀察組。納入標準：經診斷確診為子癇前期者；單胎妊娠者；對此次研究的目的、方法、過程均有清晰了解并自主參與研究者。排除標準：合并免疫系統疾病、高血壓、糖尿病、心臟系統疾病、惡性腫瘤、慢性血管疾病或其他產科并發癥者；存在慢性肝腎功能不全者；存在腹痛、見紅、陰道流血等癥狀者；多胎或胎兒畸形者；胎兒染色體數目存在異常者；以往存在免疫治療史、器官移植史者。再分別選擇同期入院進行孕檢的健康孕婦和體檢的健康女性作為對照組1、對照組2，各80 例。本次研究已獲得本院倫理委員會批準。觀察組年齡23～31 歲，平均（27.36±1.22）歲；孕周27～37 周，平均（31.69±2.33）周；體重指數（BMI）24～30 kg/m2，平均（27.30±2.59）kg/m2；初產婦71 例。對照組1 年齡23～32 歲，平均（27.69±1.58）歲；孕周26～37 周，平均（31.41±2.07）周；BMI 25～31 kg/m2，平 均（27.67±2.87）kg/m2；初產婦63 例。對照組2 年齡23～32歲，平均（28.13±1.50）歲；BMI 20～24 kg/m2，平均（22.38±1.61）kg/m2；均未生育。經比較，觀察組與對照組1、對照組2 的年齡比較差異無統計學意義（P>0.05），觀察組與對照組1 的孕周、BMI及初產婦例數比較差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

抽取所有入選受試者清晨空腹狀態下靜脈血，并以3 000 r/min 速度離心后取血清樣本，置于零下80℃冰箱保存；然后由同一位技術人員采用酶聯免疫吸附定量試驗法（ELISA）檢測受試者血清中的白細胞介素（IL）-17、IL-21、IL-23、轉化生長因子-β（TGF-β）水平。具體步驟如下：使用ELISA 試劑將樣本連續稀釋后產生7 個點的標準曲線，將樣本加入每個孔中孵育過夜，溫度設置為4℃；經孵育、洗滌后，在每個孔中加入預混合的檢測抗體，于室溫下溫育2 h，經再次洗滌后于各孔中加入辣根過氧化物酶（HRP）標記鏈霉親和素，20 min 后終止溫育；將終止溶液加入各孔中，使用酶標儀對各孔的光密度進行測定，酶標儀設置為450 nm，最終獲得IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 含量。

1.3 觀察指標

詳細記錄并比較3 組受試者的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平，同時根據子癇前期患者的病情嚴重程度劃分為輕、重度，對比輕、重度患者的上述指標，分析IL-17 與IL-21、IL-23、TGF-β水平的相關性。其中，若子癇前期孕婦的血壓水平>140/90 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa），且尿蛋白定量>300 mg，尿蛋白/肌酐比>0.3，或隨機尿蛋白>300 mg/L，則判斷為輕度。若子癇前期孕婦符合以下1 條或以上條件，則判斷為重度：①存在頭暈、頭痛、視力模糊或中樞神經系統異常，或腹部不適等情況；②血清轉氨酶升高；③血壓水平>160/110 mmHg；④血小板<100×109/L，24 h 尿蛋白定量>2 g，24 h 尿量<500 mL；⑤存在血管內溶血、肺水腫、腦血管意外、凝血功能障礙、嬰兒生長受限等情況［4］。

1.4 統計學方法

使用SPSS 22.0 統計學軟件進行數據分析。符合正態分布的計量資料以均數±標準差（）表示，采用t檢驗；計數資料以百分率（%）表示，采用χ2檢驗；相關性分析采用Spearman 進行。P<0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 3 組的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平比較

3 組的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平如表1所示，觀察組的IL-17、IL-21、TGF-β 均高于對照組1、對照組2，差異有統計學意義（P<0.05），而對照組1、對照組2 比較差異無統計學意義（P>0.05）；觀察組的IL-23 水平與對照組1 比較差異無統計學意義（P>0.05），但明顯低于對照組2，差異有統計學意義（P<0.05）。

表1 3 組的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平比較（）

表1 3 組的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平比較（）

注：?與觀察組比較，P<0.05。

2.2 輕、重度子癇前期患者的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平比較

輕、重度子癇前期患者的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平如表2 所示，輕度患者的IL-17、TGF-β均低于重度患者，差異有統計學意義（P<0.05），輕、重度患者的IL-21、IL-23 水平差異無統計學意義（P>0.05）。

表2 輕、重度患者的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平比較（）

表2 輕、重度患者的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平比較（）

2.3 相關性分析

由表2 可知，子癇前期患者的血清IL-17 與IL-21、IL-23 無相關性（r=0.08、0.11,P=0.521）；IL-17 與TGF-β 呈正相關（r=0.57,P=0.006）。

3 討論

子癇前期是一種母體與胎盤之間的免疫失衡反應，以往認為免疫答應所介導的炎癥反應是被母體的Th1/Th2 失衡所介導，而本文研究結果顯示，通過對比子癇前期患者、健康孕婦和健康女性的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平，發現觀察組的IL-17 水平均高于對照組1、對照組2，由此可見，Th17 細胞亞群與子癇前期的發生、發展有關。此外，本文結果還顯示，輕度子癇前期患者的IL-17 水平低于重度患者，說明Th17 還可反映子癇前期患者的病情嚴重程度。子癇前期患者的IL-17 與TGF-β 呈正相關，表明患者的Th17 功能主要由TGF-β 介導。有研究發現［5］，在子癇前期患者的臨床檢測中，IL-17 水平提升會促進廣泛性血管內炎癥反應的發展，從而將該指標作為診斷子癇前期的主要指標。因為IL-17 水平升高會使炎癥效應因子、細胞因子的表達抗原、多種趨化因子等細胞因子也隨之升高，相互之間發揮作用，形成促炎狀態。以往研究也表示［6］，子癇前期患者血液中的多種促炎癥相關因子均有所升高，所以由此得出，子癇前期患者的炎癥反應在發展過程中有IL-17 的參與。TGF-β 因子是促使Th17 細胞誘導、分化的主要刺激，這可能是兩者呈正相關的主要機制與原因。在本次研究中，雖然子癇前期患者的IL-21 水平較對照組1、對照組2 高，但是卻與患者的病情嚴重程度無關，雖然IL-21 水平在某些疾病中可以對CD4+細胞中的IL-17 進行誘導，但在本次研究中，IL-21 并未參與到Th17細胞的調控中。子癇前期患者和健康孕婦的IL-23水平均低于對照組2，以往有研究表明該指標水平下降可能是因為孕婦在孕期的Th2 細胞發揮主導功能，從而產生反應，但是并未參與到子癇前期的病情發生、發展中［7-8］。

綜上所述，在孕婦子癇前期的發病和發展過程中，血清中的Th17 相關細胞因子發揮了重要作用，TGF-β 升高會促使IL-17 升高，兩者呈正相關，從而促進Th17 活化，并參與到子癇前期孕婦的炎癥反應中，是導致疾病發生的主要原因。