喉癌患者癌組織P53 Cdc2蛋白與放療預后的關系

劉祥鵬 陳佳文 曹春華 江麗仕

喉癌是臨床上發(fā)病率較高的惡性腫瘤，病理類型以鱗癌為主。喉癌病因復雜，普遍認為與吸煙、飲酒、空氣污染、病毒感染及性激素等有關，影響患者生存情況。P53是人體的抑癌基因，既往研究表明，P53蛋白在喉癌患者中表達異常，其陽性率與疾病嚴重程度有關，亦與喉癌復發(fā)相關。Cdc2是細胞中的周期調節(jié)基因，當Cdc2表達水平異?；蛭蓙y后，會引起細胞異常分化并引起癌變。目前喉癌在臨床上仍缺乏有效的治療方法，基于P53、Cdc2蛋白在喉癌的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮的重要作用，其有望成為喉癌治療的新靶點。本研究探討喉癌患者P53、Cdc2蛋白的表達情況及其與放療預后的關系，旨為喉癌治療提供參考依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2018年5～12月郴州市第一人民醫(yī)院收治的喉癌患者160例，其中男85例，女75例；年齡43～72歲，平均(58.67±5.39)歲；身體質量指數20～26 kg/m，平均(23.15±2.41)kg/m；腫瘤部位：聲門上型41例，聲門型101例，聲門下型18例；病理分級：高分化67例，中分化71例，低分化22例；腫瘤分期：Ⅰ～Ⅱ期94例，Ⅲ～Ⅳ期66例。

納入標準：符合喉癌診斷標準，均經病理確診；病灶標本與正常組織標本完整；患者均進行了放射治療，隨訪資料完整。排除標準：行放化療、生物免疫治療者；精神異常、應激反應強烈或伴有凝血功能異常者；伴有全身感染性疾病或妊娠期哺乳期者。

1.2 方法 比較所有患者病灶組織及癌旁正常組織(距離病灶≥3 cm)P53、Cdc2蛋白表達的差異；同時比較不同性別、年齡(≥60歲、<60歲)、腫瘤直徑(≥3 cm、<3 cm)、分化類型(高分化、中分化、低分化)、腫瘤分期(Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期)、腫瘤部位(聲門上型、聲門型、聲門下型)等患者P53、Cdc2蛋白陽性率的差異；患者行放射治療后隨訪24個月，統(tǒng)計其復發(fā)、轉移及死亡情況，并對P53、Cdc2蛋白表達情況與預后進行相關性分析。

1.3 P53、Cdc2蛋白檢測及陽性標準 采用免疫組織化學法測定病灶組織、正常組織中P53、Cdc2蛋白陽性率。判定標準：參考半定量方法對結果進行判讀，對每個切片常規(guī)取5個不同的高倍視野，分別從陽性細胞百分率(1～4分)、陽性強度(0～3分)等方面進行評分，將細胞陽性率與染色強度相乘，陰性(-)為0分，弱陽性(+)為1～2分，中度陽性(++)為3～5分，強陽性(+++)為6～8分。

2 結果

2.1 患者病灶組織與正常組織P53、Cdc2蛋白陽性率比較 160例患者中，病灶組織P53、Cdc2蛋白陽性率分別為92.50%(132/160)、80.0%(128/160)，高于正常組織的19.38%(31/160)、23.13%(37/160)，差異有統(tǒng)計學意義(

χ

=6.291、7.241，

P

=0.031、0.029)。免疫組化染色結果顯示，P53、Cdc2蛋白在喉癌組織中呈高水平表達，且多定位于細胞膜與細胞質中，而其在正常組織中表達水平較低。見圖1。

圖1 P53、Cdc2蛋白免疫化學染色(×200)

2.2 不同臨床病理特征患者P53、Cdc2蛋白陽性率比較 不同腫瘤直徑、分化類型、腫瘤分期患者喉癌組織中P53、Cdc2蛋白陽性率比較，差異有統(tǒng)計意義(

P

<0.05)。見表1。

表1 不同臨床病理患者P53、Cdc2蛋白陽性率比較

2.3 P53、Cdc2蛋白陽性率與預后的相關性 所有患者放療后隨訪24個月，32例(20.00%)復發(fā)，29例(18.13%)轉移， 47例死亡(29.38%)。Pearson 相關性分析顯示，P53、Cdc2蛋白表達陽性率與復發(fā)(

r

=0.681、0.713，

P

<0.001、<0.001)、轉移(

r

=0.725、0.583，

P

<0.001、<0.001)、死亡(

r

=0.701、0.602，

P

<0.001、<0.001)均呈正相關性。

3 討論

喉癌發(fā)病率占惡性腫瘤的1%～22%，放射治療能獲得較好的結果，但部分患者放療后預后較差，再加上治療過程中缺乏有效的預測、評估方法，導致患者5年生存率較低。因此，尋找新的腫瘤標志物、新的治療靶點對改善患者預后，提高其生存期意義重大。本文探討喉癌患者P53、Cdc2蛋白陽性表達情況及其與放療預后的關系，以其為喉癌治療提供新的靶點。

P53基因屬于與人類緊密相關的致癌基因，亦是人類腫瘤突變頻率較高的抑癌基因(幾乎存在于所有腫瘤中)。臨床上將P53基因分為野生型和突變型兩種，前者能誘導細胞凋亡，而后者則能抑制細胞凋亡。突變型P53與腫瘤的發(fā)生、生長調控及凋亡存在緊密聯系，能作為免疫系統(tǒng)的靶抗原，引起免疫系統(tǒng)失耐受，從而產生P53抗體。本研究中，喉癌患者病灶組織中P53、Cdc2蛋白陽性率顯著高于正常組織(

P

<0.05)，表明P53、Cdc2蛋白在喉癌組織中呈高表達，該結果與李建華等研究結果相符。不同腫瘤直徑、分化類型、腫瘤分期患者喉癌組織中P53、Cdc2蛋白陽性率比較，差異顯著(

P

<0.05)，提示可以通過P53的表達情況，反映患者的疾病嚴重程度和進展情況，指導臨床治療。Cdc2屬于Ser/Thr蛋白激酶家族重要成員之一，能調節(jié)細胞周期并發(fā)揮正性調控作用。但當Cdc2失調控后，則會引起腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。研究表明，喉癌細胞增殖過程中，腫瘤細胞周期調控機制破壞，導致細胞生長失控、分化受阻，并引起凋亡異常。而Cdc2是細胞周期調控的中心環(huán)節(jié)，在細胞生長和分化過程中發(fā)揮重要作用。本組所有患者放療后隨訪24個月，32例(20.00%)復發(fā)，29例(18.13%)轉移，47例死亡(29.38%)；Pearson相關性分析顯示， P53、Cdc2蛋白表達陽性率與復發(fā)、轉移、死亡均呈正相關性，表明P53、Cdc2蛋白陽性表達越高，患者復發(fā)、轉移及死亡等發(fā)生風險越高。此與陳國群的研究相似，可能是由于P53、Cdc2蛋白能參與實體瘤的發(fā)生、發(fā)展有關，其表達水平能評估患者疾病嚴重程度，亦可評價患者預后。

綜上所述，P53、Cdc2蛋白在喉癌患者癌組織中呈高表達，其陽性表達情況與患者放療后預后相關，有望成為喉癌治療的新靶點。