特殊醫學用途配方食品中維生素C含量的測定

郭文韜，梁喜玲

（陜西省產品質量監督檢驗研究院，陜西西安 710048）

維生素C是一種水溶性維生素，是人體必需的營養素之一，在維持正常的人體機能方面有著重要的作用。它參與了神經介質、激素的生物合成，促進膠原蛋白的合成，具有抗癌的功效。在促進膽固醇排泄防止其在動脈內壁沉積方面也有重要的作用。維生素C廣泛存在于植物組織中，新鮮的水果和蔬菜中含量較為豐富，尤其是花菜、青辣椒、橙子、獼猴桃等果蔬。人體缺乏維生素C會引起相關疾病，但其攝入量只需滿足機體正常需求即可，無需過量攝入。人體自身無法合成維生素C，只能從食物或腸外營養供給，但其容易氧化，且在體內儲存時間短。一些特殊的人群，如孕產婦，除正常的飲食攝取以外，可適當補充一些添加維生素C的特殊營養物質。

研究建立快速準確測定特殊配方食品中維生素C含量的方法具有重要意義，可為保障生命體健康和安全提供有力的技術支撐。對于維生素C的檢測方法研究較多，有高效液相色譜法[1-2]、紫外分光光度法[3]、熒光比色法[4-5]及光學快速檢測卡法[6]等。《食品安全國家標準 嬰幼兒食品和乳品中維生素C的測定》（GB 5413.18—2010）[4]中的熒光法，是目前檢驗機構和乳粉企業普遍采用的方法，該方法具有操作簡便高效、重復性好、靈敏度高、檢出限低和線性關系好等優點。本研究擬采用質控樣品、精密度實驗、加標實驗和實際樣本測試等方法研究熒光法用于檢測特殊醫學用途配方食品中（孕產婦營養補充劑）維生素C含量的適用性。

1 材料與方法

1.1 樣本與試劑

不同批次的孕產婦營養配方谷粉（2個不同廠家各3批次），總計6個樣本，均由企業提供。本實驗方法中所涉及到的常規試劑除活性炭（化學純）外均為分析純，質控樣購買于中國檢驗檢疫科學研究院測試評價中心。

1.2 儀器與設備

溫度可調節的烘箱；培養箱；ATL-224電子天平；RF-6000熒光分光光度計。

1.3 樣本的前處理與標準溶液的配制

樣本的前處理過程和維生素C標準溶液（濃度0.1 mg/mL） 的配制方法參照國家標準《食品安全國家標準 嬰幼兒食品和乳品中維生素C的測定》（GB 5413.18—2010）中的方法 進行。

1.4 方法

1.4.1 樣本的測定

樣本的測定中，用樣本溶液熒光值減去樣本空白溶液熒光值后，可在標準曲線上查找對應的維生素C的質量濃度。

1.4.2 待測液的制備

按照GB 5413.18—2010中的方法繪制標準曲線，試劑添加量按表1進行，分別移取不同體積的標準溶液于10 mL試管中，1到4編號備用，用蒸餾水補充至2 mL，同時吸取2 mL空白溶液于另一個10 mL試管中，標記為5號。定容到2 mL后繼續添加鄰苯二胺溶液，搖勻，在避光條件下靜置1 h后待測。

表1 標準曲線制備時的試劑添加量

1.4.3 加標回收率實驗

在相同的實驗操作下，將質控樣與6個樣本進行測定，得到其維生素C的含量。質控樣的維生素C含量測定后，與該理論值進行比較，對實驗結果的可靠性進行驗證。加標回收實驗：對已測得維生素C含量的樣本，加入一定量的維生素C標準溶液（其質量濃度為0.1 mg/mL）。測定樣本、加標樣本、質控樣和加標質控樣，對實驗測定結果進行比對，考察回收率的情況。

1.4.4 精密度實驗

3號孕婦配方谷粉為精密度測試實驗的研究對象。分別稱取3號樣本6份，在相同的實驗條件下，平行測定6份產品中的維生素C含量，研究本實驗方法的精密度情況。

1.4.5 數據處理

采用常用軟件Excel軟件進行數據分析處理。

2 結果與分析

2.1 樣本測定結果

取質控樣品和6個不同批次的樣本2.5 g，同一種樣品均取平行樣，分別測定維生素C含量，結果見表2（該方法的檢出限為0.1 mg/100 g）。

表2 質控樣和6個樣本的維生素C含量

2.2 標準曲線的繪制

參照國家標準GB 5413.18—2010中維生素C的測定方法，將熒光分光光度計激發波長設定為350 nm，發射波長為430 nm，測定標準系列溶液的熒光值，標準曲線的橫坐標為維生素C標準溶液的質量濃度（μg/mL），標準曲線的縱坐標為相應的凈熒光值（標準系列熒光值減去標準空白熒光值），繪制標準曲線圖（圖1），所擬合的標準曲線線性方程為y=10.921 3x+0.630 3（R2=0.999 2），線性良好。

圖1 維生素C的標準曲線圖

2.3 加標回收驗證實驗結果

在表3中，前4組數據是3號樣本的加標回收實驗，最后一組是質控樣本（樣品質量為2.500 6 g）的加標回收實驗。由表3可知，特殊醫學用途配方食品樣本和質控樣的加標回收率均較高，樣本的回收率結果為90.0%～93.5%，質控樣為92.5%，相對標準偏差為1.25%，值相對較小。熒光法適合檢測特殊醫學用途配方食品中的維生素C含量，且本方法可靠性高，具有較好的準確度。

表3 加標回收率實驗

2.4 精密度實驗結果

由表4可知，對3號樣本測定6次平行實驗，維生素C含量平均值為155.1 mg/100 g，相對標準偏差為4.64%，在國標規定的范圍內，表明該方法的精密度較好，可以滿足檢測要求。

表4 3號樣本精密度實驗結果

3 結論

本研究中質控樣維生素C含量理論值與測定值在允許誤差范圍內，證明測定結果是可靠的。質控樣和3號樣本的加標回收率為90.0%～93.5%，相對標準偏差為4.64%，表明熒光法準確度較高，精密度較好，測定結果準確、可信。6批次市售的特殊醫學用途配方食品中維生素C含量均符合國家標準中對維生素C含量添加量的要求，表明熒光法適合檢測特殊醫學用途配方食品中的維生素C含量，具有實際參考 價值。