大黃及單體對(duì)金黃色葡萄球菌的體外抑菌作用及作用機(jī)制研究*

徐令清,莫艷梅,簡(jiǎn)永歡，黎梓楠，何倩君,溫偉洪,湯英賢,劉加偉,劉麗忠

廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第六醫(yī)院檢驗(yàn)科/清遠(yuǎn)市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,廣東清遠(yuǎn) 511518

金黃色葡萄球菌是臨床化膿性感染的重要病原菌之一，金黃色葡萄球菌是臨床感染中最為常見(jiàn)的致病菌，可導(dǎo)致皮膚膿腫、肺炎、心膜炎、化膿性關(guān)節(jié)炎及菌血癥等[1]。在細(xì)菌感染性疾病的治療中，抗菌藥物的應(yīng)用一方面使許多嚴(yán)重的細(xì)菌感染性疾病得到有效控制；另一方面也使細(xì)菌的耐藥性增強(qiáng)，臨床上出現(xiàn)了大量多重耐藥菌株。耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)具有致病力強(qiáng)、傳播速度快、常表現(xiàn)為多重耐藥等特點(diǎn),其耐藥機(jī)制復(fù)雜，治療難度大，病死率高。MRSA對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物耐藥，并且對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類、氨基糖苷類、氟喹諾酮類等抗菌藥物多數(shù)耐藥，導(dǎo)致抗MRSA感染藥物的品種選擇有限。因此，尋找新的抗MRSA的藥物顯得十分重要和迫切。相關(guān)報(bào)道顯示，大黃對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌作用較強(qiáng)，大黃來(lái)源廣泛，價(jià)格低廉，含有多種活性成分，對(duì)人體不良反應(yīng)小，不僅能抗菌消炎，而且對(duì)金黃色葡萄球菌不易產(chǎn)生耐藥性，這在臨床上有很大的價(jià)值[2]。因此，大黃具有研究和開(kāi)發(fā)的潛力，有廣闊的應(yīng)用前景，對(duì)改善多重耐藥菌感染性疾病的治療及有效對(duì)抗 MRSA 感染的藥物有重要臨床意義。

1 材料與方法

1.1菌株來(lái)源 選取廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第六醫(yī)院(清遠(yuǎn)市人民醫(yī)院)2019年檢驗(yàn)科微生物室分離的80株金黃色葡萄球菌，包括MRSA 40株，甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌(MSSA)40株。標(biāo)準(zhǔn)菌株為金黃色葡萄球菌 ATCC 29213(微生物室保存菌株)。

1.2試劑與儀器 大黃(康美藥業(yè)股份有限公司)；大黃單體：大黃酸-8-0-β-D-葡萄糖苷、大黃素-8-0-β-D-吡喃葡萄糖苷、大黃酚、蘆薈大黃素、沒(méi)食子酸、大黃酸、大黃素和大黃素甲醚(成都曼斯特生物科技有限公司)；血平板(江門(mén)市凱林貿(mào)易有限公司)；肉湯培養(yǎng)基與M-H瓊脂平板(廣州市迪景生物科技有限公司)；二甲基亞楓(DMSO)(天津市富宇精細(xì)化工有限公司)；96孔板(北京欣興強(qiáng)森生物科技有限公司)；IFA-110T-8型微生物培養(yǎng)箱(藝思高科技有限公司)；DHP-9145A電熱鼓風(fēng)干燥箱(上海一恒科學(xué)儀器有限公司)；DensiCHEK Plus電子比濁儀(生物梅里埃美國(guó)股份有限公司)；VITEK2 Compact全自動(dòng)微生物分析儀(法國(guó)生物梅里埃公司)；uLtiMate 3000型高效液相色譜儀(賽默飛世爾科技有限公司)；DTT-A型電子天平(福州華志科學(xué)儀器有限公司)；酶標(biāo)儀(德國(guó)BMG Spectrostar Namo全波長(zhǎng))。

1.3方法

1.3.1大黃混懸液和大黃單體溶液制備 稱取大黃5 g置于離心管中，加入無(wú)水乙醇30 mL，進(jìn)行萃取48 h，再將萃取液過(guò)濾揮干后，用無(wú)菌蒸餾水配制成256、128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25和0.125 mg/mL共12種質(zhì)量濃度。將8種大黃單體用DMSO分別配制成128、64、32、16、8、4、2、1、0.5和0.25 mg/mL 共10種質(zhì)量濃度。均置于4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2菌液制備 將菌株接種于血平板，37 ℃培養(yǎng)18 h，抑菌試驗(yàn)法(用生理鹽水配制成0.5麥?zhǔn)蠞岫?；最小抑菌濃度(MIC)測(cè)定法(用肉湯培養(yǎng)基配制成0.5麥?zhǔn)蠞岫?，菌液濃度均為1.5×108cfu/mL。

1.3.3高效液相檢測(cè)大黃組分 (1)樣品提取：取5個(gè)錐形瓶，稱取大黃各5 g置于5個(gè)錐形瓶中，分別加入丙酮、無(wú)菌蒸餾水、乙腈、甲醇和乙醇各100 mL，用封口膜把瓶口封好。超聲提取30 min，用0.22 μm有機(jī)膜濾膜過(guò)濾到樣品瓶中。(2)標(biāo)準(zhǔn)品溶液制備:分別精密稱取8種單體1 mg，置于8個(gè)滅菌EP管中，各加入1 mL 的乙醇進(jìn)行溶解。(3)高效液相色譜法檢測(cè)：采用C18(5 μm，4.6 mm×250.0 mm)色譜柱，流速為1.0 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)254 nm，柱溫35 ℃，進(jìn)樣量2 μL。流動(dòng)相為乙腈水(50∶50)。分別對(duì)提取溶液和標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)行檢測(cè)。

1.3.4大黃對(duì)3株金黃色葡萄球菌的抑菌作用 每種菌株取2個(gè)M-H瓊脂平板，用無(wú)菌棉簽蘸取0.5麥?zhǔn)蠞岫染河谄桨迳线M(jìn)行均勻涂布后，用無(wú)菌槍頭扎7個(gè)孔。將12種質(zhì)量濃度的大黃混懸液各10 μL加在平板周?chē)?個(gè)孔中，平板中間孔加無(wú)菌蒸餾水作為對(duì)照。將平板置于37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)18 h。

1.3.5大黃8種單體對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株的抑菌作用 每種單體取2個(gè)M-H瓊脂平板，用無(wú)菌棉簽蘸取菌液于平板上進(jìn)行均勻涂布后，用槍頭扎6個(gè)孔。將10種質(zhì)量濃度的大黃單體溶液各10 μL加在平板周?chē)?個(gè)孔中，平板中間孔加DMSO作為對(duì)照。將平板置于37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)18 h。

1.3.6大黃對(duì)80株金黃色葡萄球菌的MIC測(cè)定 于無(wú)菌96孔板中每孔加入肉湯菌液50 μL，第1個(gè)孔加入512 mg/mL大黃混懸液50 μL，采用微量倍比稀釋法，使大黃混懸液質(zhì)量終濃度分別為256、128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25和0.125 mg/mL共12種質(zhì)量濃度。將96孔板置于37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)18 h。

1.3.7大黃8種單體對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株的MIC測(cè)定 于無(wú)菌96孔板中每孔加入肉湯菌液45 μL后加入10種質(zhì)量濃度的單體溶液各5 μL(單體質(zhì)量終濃度分別為12.8、6.4、3.2、1.6、0.8、0.4、0.2、0.1、0.05和0.025 mg/mL)，取肉湯菌液45 μL+DMSO溶液5 μL作為陽(yáng)性對(duì)照，肉湯培養(yǎng)基50 μL作為陰性對(duì)照。將96孔板置于37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)18 h。

1.3.880株金黃色葡萄球菌藥敏試驗(yàn) 采用VITEK 2 Compact全自動(dòng)微生物分析儀，使用配套的鑒定卡和藥物敏感性卡進(jìn)行細(xì)菌鑒定和藥敏試驗(yàn)。

1.3.9標(biāo)準(zhǔn)菌株的生長(zhǎng)曲線和DNA、RNA等大分子物質(zhì)外滲水平檢測(cè) 取培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的標(biāo)準(zhǔn)菌株，用無(wú)菌生理鹽水配制成0.5 麥?zhǔn)蠞岫龋尤氲胶写簏S的肉湯培養(yǎng)基，使大黃質(zhì)量終濃度為256 mg/mL。置于37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)。每隔2 h進(jìn)行取樣，取樣時(shí)充分振蕩，用酶標(biāo)儀檢測(cè)580 nm處的A值，以不加藥作為對(duì)照，繪制生長(zhǎng)曲線。DNA、RNA等大分子物質(zhì)的檢測(cè)每隔2 h進(jìn)行取樣，4 500 r/min離心10 min后，吸取上清液，用酶標(biāo)儀檢測(cè)260 nm處的A值，以不加藥作為對(duì)照，繪制曲線。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用Excel 2010進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。

2 結(jié) 果

2.1大黃組分的檢測(cè)結(jié)果 與標(biāo)準(zhǔn)品圖譜比對(duì)后發(fā)現(xiàn)，大黃用丙酮萃取的色譜圖出現(xiàn)5個(gè)色譜峰，表明有5種已知有效的成分被萃取出來(lái)。用無(wú)菌蒸餾水和乙腈萃取效果不明顯，用甲醇和乙醇萃取的色譜圖都出現(xiàn)9個(gè)色譜峰，表明都有9種已知有效成分被萃取出來(lái)，而且組分相似，由于甲醇有毒性作用，因此，選擇乙醇作為溶劑對(duì)大黃進(jìn)行萃取。大黃單體中大黃酸-8-0-β-D-葡萄糖苷和沒(méi)食子酸的色譜圖都沒(méi)有出現(xiàn)色譜峰，可能是因?yàn)闆](méi)有完全溶解，影響檢測(cè)結(jié)果。大黃素-8-0-β-D-吡喃葡萄糖苷、大黃酚、蘆薈大黃素、大黃素和大黃素甲醚都只出現(xiàn)一個(gè)色譜峰，說(shuō)明溶解效果好，單體提取率高，大黃酸出現(xiàn)很相近的2個(gè)色譜峰，可能是同分異構(gòu)體，說(shuō)明純度不是很高。

2.2大黃對(duì)3株金黃色葡萄球菌的抑菌作用 從培養(yǎng)箱取出平板，測(cè)量抑菌圈直徑。大黃對(duì)3株金黃色葡萄球菌均有不同程度的抑菌作用，大黃在質(zhì)量濃度為8 mg/mL開(kāi)始對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株有抑菌作用，在質(zhì)量濃度為32 mg/mL對(duì)MRSA和MSSA開(kāi)始有抑菌作用。自32 mg/mL質(zhì)量濃度起，大黃對(duì)MRSA的抑菌作用更明顯，抑菌圈直徑為19 mm。結(jié)果重復(fù)3次，取平均值。見(jiàn)表1。

表1 大黃對(duì)3株金黃色葡萄球菌的抑制圈直徑測(cè)定結(jié)果(mm)

2.3大黃8種單體對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株的抑菌作用 從培養(yǎng)箱取出平板，用尺子測(cè)量抑菌圈直徑。8種單體中大黃酸-8-0-β-D-葡萄糖苷、大黃素-8-0-β-D-吡喃葡萄糖苷、大黃酚和大黃素甲醚對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株沒(méi)有抑菌作用，而蘆薈大黃素、沒(méi)食子酸、大黃酸和大黃素對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株均有不同程度的抑菌作用，其中大黃素對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株的抑菌效果最明顯，抑菌圈直徑最大，為20 mm,MIC為0.025 mg/mL。并且抑菌圈的直徑還與單體濃度呈正相關(guān)，濃度越高，抑菌圈直徑越大，抑菌效果越好。結(jié)果重復(fù)3次，取平均值，見(jiàn)表2。

表2 大黃8種單體對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株的抑制圈直徑測(cè)定結(jié)果(mm)

2.4大黃對(duì)80株金黃色葡萄球菌的MIC測(cè)定 大黃對(duì)40株MRSA 的最小抑菌濃度范圍為16～128 mg/mL，MIC 50為32 mg/mL，MIC 90為64 mg/mL；大黃對(duì)40株MSSA的最小抑菌濃度范圍為16～64 mg/mL，MIC 50為32 mg/mL，MIC 90為64 mg/mL。見(jiàn)表3、表4。

表3 大黃對(duì)80株金黃色葡萄球菌的MIC測(cè)定結(jié)果(株)

表4 大黃對(duì)40株MRSA和40株MSSA的MIC 50、MIC 90結(jié)果(mg/mL)

2.5大黃單體對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株的MIC測(cè)定 經(jīng)培養(yǎng)后，肉湯培養(yǎng)基澄清透明為無(wú)菌生長(zhǎng)，混濁則為有菌生長(zhǎng)，無(wú)菌生長(zhǎng)的最低濃度稱為MIC。大黃單體對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株均有不同程度的抑菌作用，其中大黃素對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株的抑菌作用最強(qiáng)，MIC為0.025 mg/mL，大黃酸抑菌效果次之。見(jiàn)表5。

表5 8種單體對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株MIC測(cè)定結(jié)果(mg/mL)

2.680株金黃色葡萄球菌對(duì)抗菌藥物的耐藥情況 鑒定結(jié)果均為金黃色葡萄球菌，記錄80株金黃色葡萄球菌的藥物敏感性數(shù)據(jù)并計(jì)算耐藥率，40株MRSA抗菌藥物中青霉素、苯唑西林、阿莫西林/克拉維酸的耐藥率均為100.0%，見(jiàn)表6；40株MSSA抗菌藥物中青霉素的耐藥率(90.0%)最高，見(jiàn)表7。

表6 40株MRSA對(duì)10種抗菌藥物的耐藥情況[n(%)]

表7 40株MSSA對(duì)11種抗菌藥物的耐藥情況[n(%)]

2.7標(biāo)準(zhǔn)菌株的生長(zhǎng)曲線和DNA、RNA等大分子物質(zhì)外滲濃度 標(biāo)準(zhǔn)菌株金黃色葡萄球菌經(jīng)過(guò)一定時(shí)間的遲緩期，開(kāi)始迅速生長(zhǎng)，在12 h進(jìn)入平緩期，從4 h開(kāi)始，大黃作用組的A值始終明顯低于對(duì)照組，說(shuō)明金黃色葡萄球菌生長(zhǎng)明顯受到抑制，見(jiàn)圖1。大黃作用組的A值隨著作用時(shí)間而升高，且大黃作用組的A值始終高于對(duì)照組，說(shuō)明大黃作用后的金黃色葡萄球菌中 DNA、RNA 等大分子物質(zhì)大量外滲，使培養(yǎng)基中的核酸等大分子物質(zhì)濃度升高,見(jiàn)圖2。

圖1 標(biāo)準(zhǔn)菌株金黃色葡萄球菌生長(zhǎng)曲線

圖2 標(biāo)準(zhǔn)菌株的DNA、RNA等大分子物質(zhì)外滲濃度檢測(cè)結(jié)果

3 討 論

金黃色葡萄球菌隸屬于葡萄球菌屬，常寄生于人和動(dòng)物的皮膚、鼻腔、咽喉、腸胃、癰、化膿瘡口中，空氣、污水等環(huán)境中也無(wú)處不在，是最常見(jiàn)的醫(yī)院和社區(qū)獲得性致病菌之一，是僅次于沙門(mén)菌和副溶血桿菌的第三大微生物致病菌[3]，近年來(lái)暴發(fā)流行，抗菌治療方案有限，MRSA不僅對(duì)青霉素完全耐藥，而且對(duì)紅霉素、克林霉素、四環(huán)素均有很高(>70.0%)的耐藥率；對(duì)環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、莫西沙星、 慶大霉素、利福平的耐藥株也廣泛存在。多重耐藥菌株的出現(xiàn)使MRSA已經(jīng)成為院內(nèi)感染的重要病原體之一[4-5]。本研究結(jié)果顯示，在40株MRSA抗菌藥物中青霉素、苯唑西林、阿莫西林/克拉維酸的耐藥率均為100.0%，40株MSSA抗菌藥物中青霉素的耐藥率(90.0%)最高。近年來(lái)，眾多國(guó)內(nèi)外學(xué)者嘗試從傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中尋找治療MRSA的新思路。有研究發(fā)現(xiàn)，多種中藥及其單體對(duì)MRSA 均具有良好的抑菌效果[6-10]。因此，尋找有效控制 MRSA 感染的藥物勢(shì)在必行。

大黃作為中國(guó)傳統(tǒng)中藥材，它在預(yù)防和控制細(xì)菌性感染疾病方面均發(fā)揮了積極作用。有研究表明，大黃具有較強(qiáng)的抗感染、抗衰老、抗氧化和增強(qiáng)免疫力等作用，它對(duì)多種革蘭陽(yáng)性和陰性菌均有一定的抑菌作用，其中最敏感的是葡萄球菌和鏈球菌，抗菌譜廣[2]。大黃具備非特異性抗菌作用，并且能調(diào)節(jié)及提高機(jī)體免疫力，對(duì)細(xì)菌較難產(chǎn)生耐藥作用。在初篩試驗(yàn)中，研究5種中藥(大黃、黃連、五味子、連翹、黃芩)對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌作用表明，大黃對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌作用最好。因此，本研究將探討大黃不同成分對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌作用，初步研究大黃不同成分對(duì)金黃色葡萄球菌抑菌的機(jī)制，為解決臨床金葡萄球菌耐藥提供新的依據(jù)，并為中藥抑菌研究提供新的方向。

本研究選用了5種萃取溶劑(丙酮、無(wú)菌蒸餾水、乙腈、甲醇和乙醇)，這5種溶劑常用于大部分中藥進(jìn)行萃取。通過(guò)高效液相色譜儀檢測(cè)，篩選出大黃的5種溶劑萃取物中組分較多的溶劑。5種溶劑中用無(wú)菌蒸餾水萃取的色譜圖沒(méi)有出現(xiàn)色譜峰，說(shuō)明用無(wú)菌蒸餾水萃取效果較差。用丙酮和乙腈萃取的色譜圖出現(xiàn)色譜峰不多，說(shuō)明萃取效果也不是很好。而甲醇和乙醇萃取出較多的色譜峰，說(shuō)明萃取出的物質(zhì)較多，而且組分相似，由于甲醇有毒性作用，因此，選擇乙醇作為溶劑對(duì)大黃進(jìn)行萃取。本研究選用的大黃單體組分檢測(cè)中大黃素-8-0-β-D-吡喃葡萄糖苷、大黃酚、蘆薈大黃素、大黃素和大黃素甲醚都只出現(xiàn)單個(gè)色譜峰，說(shuō)明溶解效果好，單體純度較高。而大黃酸-8-0-β-D-葡萄糖苷和沒(méi)食子酸的色譜圖都沒(méi)有出現(xiàn)色譜峰，可能是因?yàn)闆](méi)有完全溶解，影響檢測(cè)結(jié)果。大黃酸色譜圖出現(xiàn)很相近的2個(gè)色譜峰，可能是同分異構(gòu)體使用抑菌試驗(yàn)平板法篩選出對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株金黃色葡萄球菌抑制效果較強(qiáng)的大黃單體，結(jié)果表明，蘆薈大黃素、沒(méi)食子酸、大黃酸和大黃素對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株均有不同程度的抑菌作用。其中大黃素對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株的抑菌效果最明顯，抑菌圈直徑最大，為20 mm，MIC為0.025 mg/mL。并且抑菌圈的直徑還與單體濃度呈正相關(guān)，濃度越高，抑菌圈直徑越大，抑菌效果越好。

本研究通過(guò)抑菌試驗(yàn)平板法研究大黃對(duì)3株金黃色葡萄球菌作用強(qiáng)弱，結(jié)果顯示，大黃對(duì)MRSA的抑菌作用較明顯。收集臨床分離的80株金黃色葡萄球菌，檢測(cè)大黃對(duì)80株臨床分離的金黃色葡萄球菌的MIC，均表現(xiàn)出一定程度的體外抑菌作用，MIC值范圍為16～128 mg/mL。本研究結(jié)果顯示，蘆薈大黃素、大黃素和大黃酸對(duì)金黃色葡萄球菌的抗菌效果較明顯，而這3種大黃單體均為蒽醌類化合物，說(shuō)明大黃的有效成分可能為蒽醌衍生物[11]。

本研究通過(guò)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株金黃色葡萄球菌生長(zhǎng)曲線的檢測(cè)說(shuō)明大黃對(duì)金黃色葡萄球菌有抑菌作用，DNA、RNA等大分子物質(zhì)外滲濃度檢測(cè)證實(shí)大黃抑菌作用機(jī)制是能夠破壞金黃色葡萄球菌的細(xì)胞膜，導(dǎo)致菌體中DNA、RNA等大分子物質(zhì)外滲，發(fā)揮抑菌作用。

周磊等[12]報(bào)道顯示，大黃素可抑制金黃色葡萄球菌物質(zhì)代謝中的關(guān)鍵酶(琥珀酸脫氫酶和蘋(píng)果酸脫氫酶)的活性而發(fā)揮殺菌作用。曹峰[13]研究認(rèn)為，大黃素抗MRSA 效果明顯，而且可破壞MRSA的細(xì)胞壁。劉明[14]研究認(rèn)為，大黃素的抗菌機(jī)制與結(jié)合耐藥蛋白、抑制β-內(nèi)酰胺酶活性、增加藥物在菌體內(nèi)積聚無(wú)關(guān)。細(xì)菌的細(xì)胞膜是大黃素的作用部位，通過(guò)破壞細(xì)胞膜的完整性間接影響細(xì)胞壁合成，達(dá)到抗菌效果。

中藥抗菌具有較好的前景，它作用于抗菌的各個(gè)環(huán)節(jié)，可直接作用于微生物本身，如破壞細(xì)菌細(xì)胞壁和細(xì)胞膜的完整性改變細(xì)胞通透性、抑制菌體內(nèi)酶的活性、影響細(xì)胞蛋白質(zhì)核酸的合成、抑制細(xì)菌生物被膜的形成等機(jī)制。

本研究中大黃對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌作用明顯，這為臨床采用大黃治療由金黃色葡萄球菌引發(fā)的感染提供了依據(jù)，作用機(jī)制是通過(guò)破壞細(xì)菌細(xì)胞壁及細(xì)胞膜的完整性，關(guān)于其他的作用機(jī)制還有待進(jìn)一步研究，以便更好地為臨床治療提供理論依據(jù)，將有助于在金黃色葡萄球菌感染中嘗試應(yīng)用大黃進(jìn)行治療，從而解決金黃色葡萄球菌的耐藥問(wèn)題[15]。對(duì)傳統(tǒng)中藥進(jìn)行抗菌藥物的發(fā)掘，將有助于發(fā)揮傳統(tǒng)中藥在臨床抗感染中的應(yīng)用。本研究為大黃的抗菌作用進(jìn)一步研究奠定了基礎(chǔ)，在細(xì)菌感染性疾病的治療中有重要意義。