LTB4、SP-A及PA聯合檢測對新生兒肺炎的診斷價值及對危重度評價的意義

王杰杰

江蘇省南通市第一人民醫院兒科，江蘇南通 226000

肺炎是新生兒常見病，主要由病毒或細菌引起，新生兒剛脫離母體不久，免疫系統不完善，清除支原體、病毒、細菌等病原體的能力弱，很容易被病原體侵入，引發肺炎，嚴重威脅其身心健康，是導致新生兒住院的常見原因[1]。近年來，新生兒肺炎發病率有升高趨勢，因此，早期診斷有重要意義。目前，新生兒肺炎病原體檢測較為滯后，亟需選擇新型診斷標志物。白三烯B4(LTB4)是一種白三烯類物質，作為強有力的中性粒細胞趨化因子，在多種慢性氣道炎癥中發揮重要作用[2]。表面活性物質相關蛋白A(SP-A)為肺表面活性物質的重要組分，可調節免疫應答和炎癥，提升機體免疫功能。前清蛋白(PA)是一種急性負時相反應蛋白，能反映機體炎癥和營養狀態，目前研究證實，其與多種感染性疾病相關[3]。本研究對新生兒肺炎患兒血清LTB4、SP-A、PA水平變化進行分析，探討其對病情危重度的評價意義及對肺炎的診斷價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取本院2018年1月至2019年1月收治的98例新生兒肺炎作為肺炎組，其中男53例，女45例；年齡8～25 d，平均(15.42±4.65)d；體質量2.70～4.30 kg，平均(3.22±0.43)kg；其中輕度肺炎40例，中度肺炎35例，重度肺炎23例。納入標準：(1)符合《諸福棠實用兒科學》[4]肺炎診斷標準，有發熱、呼吸困難、氣促、咳嗽等癥狀和肺實變體征或肺部固定中、細濕啰音，影像學檢查存在炎性浸潤影；(2)患兒家屬知情同意并簽署知情同意書；(3)臨床資料完整；(4)無先天性疾病；(5)無營養不良。排除標準：(1)結核感染；(2)混合感染所致肺炎；(3)支氣管哮喘；(4)免疫缺陷；(5)支氣管異物繼發肺炎；(6)吸入性肺炎。另選取同期50例健康新生兒作為對照組，其中男27例，女23例；年齡5～27 d，平均(16.02±4.77)d；體質量2.80～4.50 kg，平均(3.28±0.51)kg。兩組研究對象性別、年齡、體質量等一般資料比較，差異均無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經本院倫理委員會批準。

1.2方法

1.2.1病情嚴重程度評價 采用重癥患兒肺炎的定義和診斷標準評價：腋溫≥38.5 ℃；除哭鬧、發熱等因素外，呼吸頻率≥70次/分[5]；存在拒食、呼吸呻吟、間歇性呼吸暫停、發紺、鼻扇、胸壁吸氣性凹陷等癥狀。根據病情嚴重程度將肺炎組分為重度肺炎組(44例)和普通肺炎組(54例)。

1.2.2重癥肺炎危重度評價 采用兒科危重疾病評分(PCIS)[6]評估重度肺炎組病情危重度，包括心率、呼吸、胃腸、血液(血紅蛋白、紅細胞比容)、血尿素氮、血肌酐、血鈉、血鉀、pH值、動脈血氧分壓、收縮壓共11個項目，分值4、6、10分，總分44～110分，得分越低表示病情越危重。根據PCIS將重度肺炎組分為極危重組(<70分，13例)、危重組(70～90分，14例)、非危重組(>90分，17例)。

1.2.3血清LTB4、SP-A、PA水平測定 采集肺炎組發病24 h內和對照組5 mL靜脈血，3 000 r/min離心10 min(離心半徑8 cm)，取上清液，采用酶聯免疫吸附試驗測定LTB4[上海晶抗生物工程有限公司，貨號：JK-(a)-2152，規格：48T]、SP-A(上海晶抗生物工程有限公司，貨號：JLC7015-48T，規格：48T)、PA(北京中科質檢生物技術有限公司，貨號：DECO1683，規格：48T)水平，所有操作嚴格按照試劑盒說明書執行。

2 結 果

2.1肺炎組和對照組血清LTB4、SP-A、PA水平比較 肺炎組血清LTB4、SP-A水平均明顯高于對照組，PA水平明顯低于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 肺炎組和對照組血清LTB4、SP-A、PA水平比較[M(P25,P75)]

2.2重度肺炎組和普通肺炎組血清LTB4、SP-A、PA水平比較 重度肺炎組血清LTB4、SP-A水平均明顯高于普通肺炎組，PA水平明顯低于普通肺炎組，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 重度肺炎組和普通肺炎組血清LTB4、SP-A、PA水平比較

2.3非危重組、危重組與極危重組血清LTB4、SP-A、PA水平及PCIS比較 非危重組、危重組、極危重組血清LTB4、SP-A水平均逐漸提升，PA水平及PCIS逐漸降低，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表3。

表3 不同危重度重癥肺炎新生兒血清LTB4、SP-A、PA水平及PCIS比較

2.4重度肺炎組血清LTB4、SP-A、PA水平與PCIS的相關性 Spearman相關分析結果顯示，重度肺炎組PCIS與血清LTB4、SP-A水平均呈負相關(r=-0.634、-0.695,P<0.05)，與PA水平呈正相關(r=0.797，P<0.05)。見圖1。

圖1 重度肺炎組血清LTB4、SP-A、PA水平與PCIS的線性散點圖

2.5血清LTB4、SP-A、PA水平對新生兒肺炎的診斷價值 ROC曲線分析結果顯示，LTB4、SP-A、PA聯合檢測診斷新生兒肺炎的ROC曲線下面積(AUC)明顯大于LTB4、SP-A、PA單獨檢測(Z=3.776、3.976、4.948，P<0.05)，靈敏度和特異度也高于LTB4、SP-A、PA單獨檢測。見表4、圖2。

表4 血清LTB4、SP-A、PA水平對新生兒肺炎的診斷價值

圖2 血清LTB4、SP-A、PA水平診斷新生兒肺炎的ROC曲線

3 討 論

新生兒肺炎是兒科常見的感染性疾病，是導致新生兒死亡的主要原因之一，四季均可發病，病原菌一旦附著于宿主上、下呼吸道黏膜，可通過吸取細胞內營養物質不斷生長、繁殖，引起發熱、咳嗽、肺部啰音、呼吸困難、氣喘等，隨著病情進展還會威脅新生兒的生命安全。目前，臨床常用白細胞計數判斷是否發生感染，但影響白細胞計數的因素較多，故診斷新生兒肺炎的準確度不高，還需開發新的標志物。

LTB4為白三烯家族成員，主要由活化的中性粒細胞、巨噬細胞等產生，此外，氣道上皮細胞、肥大細胞、血小板也可少量生成。有研究發現，多種氣道炎癥性疾病患者局部或全身LTB4水平明顯升高，由此推測LTB4可能與氣道炎癥的發生有密切關系[7]。后續有研究發現，LTB4是強有力的中性粒細胞趨化因子，能通過結合中性粒細胞，促進細胞內鈣離子流動，加速細胞顆粒脫落，釋放氧自由基和彈性蛋白酶、溶菌酶等多種酶類[8]。體外研究發現，LTB4可協同細菌脂多糖，通過水平與時間依賴方式，促進肺泡巨噬細胞和外周血中性粒細胞合成白細胞介素-6、白細胞介素-8等炎癥因子，參與炎癥[9]。本研究結果顯示，肺炎組血清LTB4水平明顯高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，其原因是肺炎患者存在大量炎癥細胞浸潤，導致大量中性粒細胞、巨噬細胞活化產生LTB4。進一步分析顯示，重度肺炎組血清LTB4水平明顯高于普通肺炎組，且隨著危重程度增加而提升，差異有統計學意義(P<0.05)，其原因是LTB4可釋放大量氧自由基和炎癥因子，加重肺組織損傷，影響患兒病情。

肺表面活性物質為脂蛋白復合體，分布于肺泡液體分子層表面，可通過降低肺泡表面張力，防止肺萎縮，調節肺泡內壓力[10]。SP占肺表面活性物質的10%，分為SP-A、SP-B、SP-C、SP-D，其中SP-A占SP總量的50%，參與調節肺表面活性物質的合成與代謝，并能結合清除病毒、肺炎鏈球菌、肺炎克雷伯菌、金黃色葡萄球菌等致病微生物，在肺部天然免疫等生理功能中發揮重要作用[11]。腹腔注射SP-A發現，肺炎小鼠肺組織結構明顯改善，說明SP-A有積極作用。進一步研究發現，SP-A可通過抑制核因子-κB信號通路抑制炎癥，延緩疾病進展[12]。有研究發現，血清中SP-A異常表達與多種肺部疾病相關，正常情況下，血液中SP-A表達水平較低，但肺部受損后可導致SP-A大量滲漏，增加血液中SP-A水平[13]。本研究結果顯示，肺炎組血清SP-A水平明顯高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，其原因是肺炎可損傷肺泡，降低毛細血管通透性，導致SP-A 滲出。進一步分析顯示，重度肺炎組血清SP-A水平明顯高于普通肺炎組，且隨著危重程度增加而提升，差異有統計學意義(P<0.05)，其原因是血清中SP-A水平越高其肺泡受損越嚴重，同時SP-A大量滲漏會降低肺組織SP-A水平，減弱SP-A清除病原菌和抑制炎癥的積極作用，加重病情。

有研究認為，感染與營養狀態存在雙向聯系，當感染發生后，機體會將大量營養素轉至免疫系統，為免疫系統提供營養和能量，以抵抗病原體入侵，若感染反復發作，則會導致機體營養大量消耗，引起不良營養狀態，增加感染甚至死亡的風險[14]。PA由肝臟合成，為清蛋白合成前體，且半衰期短，因此，相比清蛋白更能精確反映機體蛋白質營養代謝狀態，故引起臨床廣泛關注[15]。1項回顧性分析顯示，社區獲得性肺炎患兒血清PA表達水平明顯降低，與降鈣素原、C反應蛋白水平及病情嚴重程度呈負相關，提示PA還能鑒別肺炎感染和嚴重情況[16]。本研究結果顯示，肺炎組血清PA水平明顯低于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，其原因是肺炎患兒處于疾病狀態，加快了三大營養物質(蛋白質、脂肪、糖)分解代謝的速度，降低了蛋白質水平；同時，患兒在疾病狀態下存在吸收障礙，且食欲不佳、喂養困難，進食量降低，導致營養攝入進一步減少，因此，血清PA水平明顯降低。進一步分析顯示，重度肺炎組血清PA水平明顯低于普通肺炎組，且隨著危重程度增加而降低，差異有統計學意義(P<0.05)，其原因是病情加重后，機體可釋放大量氧自由基、細胞因子、炎癥介質等損傷肝臟，導致肝細胞合成PA減少[17]，因此，血清PA水平能反映肺炎患兒的病情。ROC曲線分析結果顯示，血清LTB4、SP-A、PA水平均對新生兒肺炎有一定的診斷價值，但聯合檢測靈敏度、特異度更高，說明血清LTB4、SP-A、PA聯合檢測有助于早期診斷新生兒肺炎，并指導臨床治療，改善患兒預后。

綜上所述，新生兒肺炎血清LTB4、SP-A水平明顯升高，PA水平明顯降低，與病情嚴重程度密切相關，3項聯合檢測可提升新生兒肺炎的診斷價值。