0～7歲兒童急性上呼吸道感染病原譜及流行特征分析

張慧蕓 張省委 韓冉

急性上呼吸道感染(acute upper respiratory infection，AURI)是鼻腔、咽、喉急性炎癥的一個概稱，發病率在急性傳染病中占首位[1]。在發展中國家所有急性死亡病例中因急性上呼吸道感染導致的死亡占75%，其中80%以上的病例感染源自于病毒感染[2]。據報道，急性上呼吸道感染是學齡前兒童(0～7歲)死亡的第二大主因，成為威脅全球范圍內兒童健康的主要原因[3]。目前國內外醫務人員對急性呼吸道病毒感染的研究主要集中在住院患兒中，對門診就診的患兒研究相對較少[4]。因此，本研究對468例AURI患兒9種常見呼吸道病毒病原體，即甲型呼吸道合胞病毒(spiratory syncytial virus a，RSVA)、乙型呼吸道合胞病毒(spiratory syncytial virus b，RSVB)、腺病毒(denovirus，ADV)、鼻病毒(human rhinovirus，RH)、甲型流感病毒(nfluenza virus a，FluA)、乙型流感病毒(nfluenza virus b，FluB)、冠狀病毒229E(onavirus，COV-229E)、腸道病毒(enterovirus，EV)、副流感病毒1～3型(Parainfluenzavirus，hPIVs)的感染現狀進行回顧性分析，旨在探討我市兒童急性上呼吸道感染的病毒病原體構成及其流行特征，并分析呼吸道感染的病毒病原學在不同人群、不同年齡、不同氣候等因素中的差異[5]。為急性上呼吸道病毒感染早期快速、準確的診斷在實驗室檢查治療上提供依據。

1 對象與方法

1.1 調查對象 選取2018年1月至2019年1月北京中醫藥大學東方醫院門診就診的0～7歲的AURI患兒468例，其中男259例，女209例；年齡(4.95±1.21)歲。

1.2 納入與排除標準 納入標準：(1)符合《諸福棠實用兒科學》(第7版)[6]中關于急性上呼吸道感染的診斷依據；(2)急性就診，病程<3 d；(3)均有不同程度的發熱；(4)就診原因為：噴涕、流涕、咳嗽、咽痛等，部分患兒伴有咽部充血、淋巴結腫大、扁桃體腫大等；(5)肺部聽診無啰音，胸片檢查正常。排除標準：(1)合并心肝腎等重大疾病者；(2)拒絕本次研究者。

1.3 方法 對門診就診的468例AURI患兒的鼻咽拭子采用實時熒光定量PCR法行呼吸道病毒檢測實驗。首先應用德國Qiagen公司生產的Qube核酸提取儀與核酸提取試劑盒Rneasy Mini Kitcat 74014對呼吸道病毒核酸進行提取；其次應用美國thermo公司生產的擴增儀與江蘇默樂生物公司生產的多重核酸呼吸道病毒核酸檢測試劑盒對呼吸道病毒核酸進行檢測。檢測9種病毒包括：RSVA、RSVB、ADV、RH、FluA、FluB、COV-229E、EV、hPIVs。循環條件、反應體系、結果判斷讀均嚴格按照說明書進行。

1.4 統計學分析 應用SPSS 19.0統計軟件，計數資料以百分率表示，采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 單一與多種病原體感染情況 468例學齡前兒童AURI患兒總陽性數為267例，總陽性率為57.05%。單一感染陽性例數230例，陽性率為49.15%；多種感染陽性例數37例，陽性率為7.90%，未檢測到3種以上病毒混合感染。見表1。

表1 AURI患兒急性上呼吸道單一與多種病原體感染情況 n=468

2.2 不同性別陽性檢出結果分析 男患兒陽性檢出率64.48%明顯高于女患兒(47.85%)，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 不同性別陽性檢出結果分析

2.3 不同年齡陽性檢出結果分析 陽性檢出率由高到低依次為4～7歲(占61.68%)、1～3歲(占59.56%)、<1歲(占39.47%)，不同病原體比較差異有統計學意義(P<0.05)。且<1歲RSVA陽性檢出率最高，1～3歲EV陽性檢出率最高，4～7歲FluA陽性檢出率最高，且在各個年齡段均有FluA檢出。見表3。

2.4 不同季節陽性檢出結果分析 不同季節病毒總陽性檢出率由高到低依次為夏季、秋季、冬季、春季，不同病原體比較差異有統計學意義(P<0.05)。春季、夏季、秋季均以EV為主，陽性率依次為25.30%、36.00%、39.03%，以秋季最高；冬季以FluA為主，陽性率為36.84%。EV、FluA在不同季節陽性檢出率比較差異有統計學意義(P<0.05)。見表4。

表4 不同季節陽性檢出結果分析 n=468

2.5 不同月份陽性檢出結果分析 上呼吸道總檢出率無差異(P>0.05)，但不同月份檢出的病毒種類不同，1月份FluA含量最多(61例)，9月份EV含量最多(27例)。EV基本每個月份都出現。見表5。

表5 不同月份陽性檢出結果分析 n=468

3 討論

因兒童免疫系統及呼吸道系統生理結構尚不完善，極易發生急性呼吸道感染，病原體主要以病毒為主[7]。臨床檢測病毒感染的方法常見的有：免疫熒光法、血清實驗室診斷、病毒培養、分子生物學方法。Lokida等[8]報道，免疫熒光法與血清實驗室診斷敏感度、特異度差；Hematian[9]報道，病毒培養需要很長的時間而無法滿足快速診斷的臨床需求；而分子生物學方法因操作簡單、快速與準確的特點而受到越來越高醫務工作者的關注與推廣。分子生物學方法包括：RT-PCR、PCR、熒光定量PCR技術與多重PCR技術。本研究采用實時熒光定量PCR方法檢測9種呼吸道感染病毒病原體，為急性上呼吸道病毒感染早期快速、準確的診斷提供了依據。

本研究468例學齡前兒童AURI患兒總陽性數為267例，總陽性率為57.05%。與喬靜等[10]報道的AURI患兒總陽性率為57.8%，但與舒靜等[11]報道的59.3%、齊英等[12]報道的62.1%不一致，可能與環境、氣候、地域有關。本研究單一感染陽性率為49.3%，高于林健生等[13]報道的30.96%，可能與不同研究對象及研究方法有關。本研究混合感染陽性率7.8%，但低于林健生等[13]報道的4.57%，可能與地域及研究方法有關。本研究檢出率結果可以看出，我市學齡前兒童急性上呼吸道感染的病毒病原體主要以FluA、ADV、EV為主。未檢測到3種以上病毒混合感染。由表2結果可知，男患兒陽性檢出率明顯高于女患兒，與林健生等報道不一致，可能與研究樣本量小有關。表3結果可以看出，隨著年齡的增長，陽性檢出率呈升高趨勢，其中<1歲RSVA陽性檢出率最高，1～3歲EV陽性檢出率最高，4～7歲FluA陽性檢出率最高。這與Góes等[14]報道的各年齡組病毒陽性檢出不完全一致，可能與方法因素有關。由表4可知，病毒病原體與季節變化有著密切的聯系。秋季以EV最高，冬季以FluA為主，與Wen 等[15]報道基本相似，而且發現ADV、RH病毒在四季均有檢出，基本呈散發，無明顯季節差異。由表5可知，1月份FluA含量最多，9月份EV含量最多。這提示不同月份檢出的病毒種類不同。本研究雖在一定程度上反映了我市學齡前兒童急性上呼吸道感染病原譜的現狀及流行特征，但也存在著不足，樣本量小，來源單一，檢測病毒病原體方法單一，觀察的時間短，所以日后應進行多中心大樣本，多方法，長時間的流行病學研究調查，使我市的急性上呼吸道感染的流行情況更為準確與可靠。

綜上所述，本次調查發現FluA是學齡前兒童誘發急性上呼吸道感染的主要病毒病原體，女性患兒檢出率高于男性患兒，發病年齡主要集中在4～7歲，冬季以FluA為主，秋季以EV為主。