百日咳患兒免疫水平及其危重因素分析

鄒春山 鄭銘城 謝楠楠 林秀芝 莊姍姍 方金涌

（廣東省揭陽(yáng)市人民醫(yī)院，廣東 揭陽(yáng) 522000）

百日咳是一種由百日咳桿菌引起的急性呼吸道傳染病，其臨床癥狀主要表現(xiàn)為咳嗽逐漸加重，呈典型的陣發(fā)性、痙攣性咳嗽，咳嗽終末出現(xiàn)深長(zhǎng)的雞啼樣吸氣性吼聲，若不及時(shí)干預(yù)，患兒可能導(dǎo)致呼吸衰竭、心力衰竭、甚至窒息死亡[1,2]。該病的病程可長(zhǎng)達(dá)3個(gè)月，故有百日咳之稱[3]。百日咳作為當(dāng)前內(nèi)兒科咳嗽就醫(yī)主要原因之一，近年來(lái)其發(fā)病率呈現(xiàn)上升趨勢(shì)[4]。既往有研究表明，淋巴細(xì)胞及其亞群數(shù)量和功能的異常，有可能導(dǎo)致機(jī)體細(xì)胞免疫功能紊亂，并發(fā)生一系列的病理生理改變[5]。故基于此，筆者通過(guò)系統(tǒng)的文獻(xiàn)調(diào)研，并基于多年百日咳診療臨床實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的積累，系統(tǒng)對(duì)比不同病情嚴(yán)重程度患兒免疫水平表達(dá)的差異，并明確與病程嚴(yán)重程度相關(guān)的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，以期為監(jiān)控疾病的發(fā)生發(fā)展、了解疾病的機(jī)制、指導(dǎo)臨床治療提供理論基礎(chǔ)，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年9月至2021年3月收治于我院的百日咳患兒150例作為研究對(duì)象，按照病情嚴(yán)重程度進(jìn)行分組，分為重癥百日咳組（n=65）及普通型百日咳組（n=85）。其中，重癥百日咳組患兒男患兒38例，女患兒27例，患兒年齡1個(gè)月～17歲，平均年齡（6.40±0.40）歲，體質(zhì)量（28.20±11.30）kg；普通型百日咳患兒男患兒49例，女患兒36例，患兒年齡1個(gè)月～16歲，平均年齡（6.60±1.50）歲，體質(zhì)量（28.90±12.20）kg。兩組患兒性別、年齡等一般資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。所有納入對(duì)象家屬均明確研究意義，并自愿簽署知情同意書(shū)。本研究的開(kāi)展通過(guò)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)同意。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①臨床確診為百日咳的患兒。②臨床資料完整，隨訪數(shù)據(jù)全面的患兒。③患兒家屬依從性較好，且自愿簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①存在嚴(yán)重先天性疾病的患兒。②合并其他嚴(yán)重器質(zhì)性疾病的患兒。③中途退出研究的患兒。④患兒家屬依從性差，不自愿簽署知情同意書(shū)的患者。

1.3 方法

1.3.1 免疫水平檢測(cè)方法 入院第2天清晨采研究對(duì)象空腹靜脈血3 mL，乙二胺四乙酸二鉀（EDTA-K2）抗凝。在樣品測(cè)定管中加入50 μL抗凝全血，加入20 μLTritest CD4-FITC、CD8-PE、CD3-PerCP抗體，振蕩混勻后，室溫避光放置20 min。隨后取出后再加入450 μL溶血素，振蕩混勻，室溫避光放置15 min后采用流式細(xì)胞儀進(jìn)行T淋巴細(xì)胞及其亞群的檢測(cè)，試劑由美國(guó)BD公司提供，操作嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)。剩余血離心后取出血漿置于-20 ℃冰箱保存，采用快速免疫透射比濁法檢測(cè)IgG、IgM、IgA及補(bǔ)體C3、C4，試劑盒購(gòu)自上海基恩科技有限公司，嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)操作。

1.3.2 研究方法 通過(guò)門(mén)診、住院病例回顧以及電話隨訪，收集患兒的信息，包括性別、母乳喂養(yǎng)、年齡、咳嗽時(shí)間、發(fā)熱、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、住院天數(shù)、包產(chǎn)史（早產(chǎn)與足月）、體質(zhì)量、年齡、血小板（PLT）、炎性反應(yīng)指標(biāo)（外周血白細(xì)胞以及C反應(yīng)蛋白）、過(guò)敏指標(biāo)（IgE、嗜酸性細(xì)胞等）、免疫功能（體液免疫IgA、G、M、補(bǔ)體C3/4等、T淋巴細(xì)胞亞群等）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 本研究亦SPSS 24.0統(tǒng)計(jì)分析軟件行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料用（）表示，采用t檢驗(yàn)法則，計(jì)數(shù)資料用百分?jǐn)?shù)表示，采用χ2檢驗(yàn)法則。重癥化的危險(xiǎn)因素分析采用多因素Logistic回歸分析，P＜0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患兒間免疫相關(guān)指標(biāo)對(duì)比 從兩組患兒免疫指標(biāo)情況來(lái)來(lái)看，重癥百日咳組IgA、IgG、IgM、顯著低于普通型百日咳組，而補(bǔ)體C3及C4水平均顯著高于普通型百日咳組（P＜0.05）。見(jiàn)表1。相關(guān)研究結(jié)果提示，病情嚴(yán)重程度不同的患兒之間免疫指標(biāo)存在顯著差異。

表1 兩組患兒免疫相關(guān)指標(biāo)對(duì)比

2.2 嚴(yán)重程度不同的百日咳患兒的單因素分析 單因素分析表明，外周血白細(xì)胞、C反應(yīng)蛋白、補(bǔ)體C3及C4水平、IgE、嗜酸性細(xì)胞過(guò)高，IgA、IgG、IgM、水平過(guò)低以及血小板過(guò)少等均是誘發(fā)百日咳病情加重的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 嚴(yán)重程度不同的百日咳患兒的單因素分析[n（%）]

2.3 嚴(yán)重程度不同的百日咳患兒的多因素回歸分析 本研究將單因素有顯著差異的指標(biāo)納入多元回歸分析，Logistic多元回歸分析表明，補(bǔ)體C3及C4水平與百日咳病情嚴(yán)重程度呈顯著正相關(guān)關(guān)系（OR=1.263，P=0.002；OR=1.482，P=0.001；OR=1.663，P=0.001）；IgA、IgG以及與百日咳病情嚴(yán)重程度呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系（OR=-1.011，P=0.002；OR=-1.326，P=0.001；OR=-1.620，P=0.002）。見(jiàn)表3。

表3 嚴(yán)重程度不同的百日咳Logistic的多因素回歸分析

3 討論

近年來(lái)，受益于醫(yī)學(xué)技術(shù)的迅猛發(fā)展，百日咳的發(fā)病率及病死率呈現(xiàn)顯著下降趨勢(shì)。但與此同時(shí)，隨著百日咳桿菌耐藥性的增強(qiáng)，疫苗接種普及度不高等原因，百日咳患病率較之前有一定程度復(fù)燃趨勢(shì)，若不及時(shí)干預(yù)，可能會(huì)導(dǎo)致顱內(nèi)出血、窒息等嚴(yán)重并發(fā)癥，對(duì)患兒的生命健康安全造成較大威脅。因此，為進(jìn)一步探究百日咳患兒的免疫特點(diǎn)，筆者以 150例患兒為研究對(duì)象，通過(guò)對(duì)比重癥組及普通組兩組患兒間免疫指標(biāo)差異，探究病情嚴(yán)重程度的危險(xiǎn)因素，以期為臨床緩解病情提供新思路。

研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，百日咳患兒的免疫水平與健康對(duì)照存在顯著差異，免疫相關(guān)指標(biāo)的變化與病情嚴(yán)重程度息息相關(guān)。有研究表明，百日咳桿菌能產(chǎn)生百日咳毒素（PT），抗 PT 特異性IgG抗體（PT-IgG）檢測(cè)常作為百日咳重要的免疫力評(píng)價(jià)指標(biāo)[6]。百日咳患兒病情嚴(yán)重程度與免疫水平間具有緊密關(guān)系，人體的免疫系統(tǒng)包括細(xì)胞免疫和體液免疫，T淋巴細(xì)胞（即）是人體的主要特異性免疫細(xì)胞，其亞群包括輔助/誘導(dǎo)細(xì)胞亞群和抑制/細(xì)胞毒細(xì)胞亞群）可介導(dǎo)機(jī)體的細(xì)胞免疫，其數(shù)量和功能與機(jī)體的細(xì)胞免疫狀態(tài)及抗病菌能力密切相關(guān)[7]，這可能是重癥組患兒顯著低于普通型百日咳組的重要原因。另一方面，B 淋巴細(xì)胞亦在免疫中發(fā)揮重大作用，其分泌的IgA、IgG、IgM則是機(jī)體體液免疫應(yīng)答的關(guān)鍵指標(biāo)[7]，本研究結(jié)果亦證實(shí)IgA、IgG、IgM偏低是百日咳病情嚴(yán)重程度增加的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。此外，有研究發(fā)現(xiàn)大部分患兒出現(xiàn)白細(xì)胞增多，且白細(xì)胞增多與預(yù)后不良相關(guān)[8]，這亦與本研究結(jié)果類似。當(dāng)百日咳患兒IgE以及嗜酸性細(xì)胞增加時(shí)，會(huì)出現(xiàn)氣管高反應(yīng)癥狀，如陣發(fā)性痙攣性咳嗽、氣促、氣喘加劇，發(fā)紺等缺氧癥加劇，出現(xiàn)反流、嘔吐、窒息等概率亦增加。

綜上所述，本研究系統(tǒng)證實(shí)了免疫指標(biāo)在百日咳發(fā)病過(guò)程中的重要作用，且明確了導(dǎo)致百日咳病情加重的危險(xiǎn)因素。為臨床對(duì)百日咳治療提供方向，減少危重癥發(fā)生。最后，本研究不足之處在于鑒于納入對(duì)象數(shù)量有限，導(dǎo)致結(jié)果嚴(yán)謹(jǐn)性可能存在一定的局限，后續(xù)建議納入更多的研究對(duì)象，以期為研究結(jié)果的進(jìn)一步證實(shí)奠定數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。