生物制品常用輔料及限量檢測的研究進展

馬祎涵 李錦茂

摘要：生物制品是疾病診斷、治療、預防等環節中的常見藥物種類，這種藥物區別于中藥、化藥。我國在管理內容中，強調對生物制品的控制要從原材料、原輔料、包裝材料到成品的全程質量控制監督管理。隨著藥品生產研發人員的研究越來越深入，生物制品生產過程時中涉及的原輔料種類越來越多，這些輔料直接影響到藥品質量、藥品有效性、毒副作用等。在這種情況下輔料的選擇必須慎重考慮，在符合國家藥品標準的相關規定情況下，還需要充分考慮藥效發揮的影響因素。

關鍵詞：生物制品;輔料;限量;檢測;研究

生物制品的輔料應用是目前生物藥劑研究中的重要部分，在基因工程、細胞工程、蛋白質與發酵工程等生物技術獲中起到比較關鍵的作用，其中各種動物和人源藥品組織、細胞等生物材料，作為制備材料，常用來預防疾病、治療和診斷疾病等。在生物制劑的生產過程中應用了多種原材料、輔料。輔料就是在生產環節的輔助材料，輔助材料選擇是否合理直接關系到藥物含有的藥效、毒副作用等。International Pharmaceutical Excipients Committe——IPEC中對其有明確規定。

1.對生物制品輔料運用的認識

International Pharmaceutical Excipients Committe為國際藥用輔料協會，對輔料功能的定位是給藥系統中，生產過程中起到輔助作用，對藥物制劑起到的保護、支持、加強作用，對生物利用度和患者的依從性很強，能夠幫助藥物鑒別，保證藥物安全等。在藥物的使用過程中具備很強的特性。國家和政府對輔料選用作出了嚴格規定，強調符合國家標準的同時確保對藥物的穩定性方面的影響，保證與藥物工藝加工后安全、可控，不會增加藥品風險。國家法律對這個方面作出了詳細地解釋。生物制品內的常用輔料包括防腐劑、佐劑、保護劑、助溶劑等[1]。

2.生物制品常用輔料及限量檢測的研究進展

2.1 防腐劑的研究

生物制品在生產與運輸、存放過程中都存在污染的現象，產品的無菌檢查一般是抽檢進行，因此無法全面保證無外源微生物對其造成污染，進而有可能存在影響藥品質量因素。在生物制劑生產過程中依據產品特性、工藝特性來考慮抑制 抑制微生物的生長與繁殖輔料。?中國藥典?三部凡例中對防腐劑的使用作出了明確規定，針對注射劑、單劑量、成品當中防腐劑的含量都有明確的規定。

（1）硫柳汞，該物質也叫作C9H9HgNaO2S，該物質含汞量為50%，是一種有機化合物，進入機體之后代謝分解成為乙基汞和硫代水楊酸鹽。該物質的使用源于上個世紀的三十年代，是廣譜抗菌劑，對革蘭陽性菌或陰性菌、真菌都有很強的抑制作用，也是我國目前使用最廣泛的防腐劑之一，而且廣泛運用在百日咳、白喉、乙肝疫苗等中。但是有機汞的神經毒性應引起重視，該物質的運用可能會引起自閉癥譜系障礙，人體吸收之后不容易排出到體外，而甲基汞和乙基汞都是有機汞。作為防腐劑該物質在生物制品中使用的安全性理應受到重視。在國際上針對該物質是否能作為防腐劑使用一直存在爭議，人們針對該問題進行了詳細研究，結果存在一定差異，WHO與美國FDA支持降低或者是取消該物質在嬰兒疫苗當中使用。我國規定生物制品中使用的最大量為0.01%，超過即違法。因此現階段人們應不斷抑菌性更好、毒性更低的代替品，同時也應積極探索該物質的毒副作用，嚴格監控和管理[2]。硫柳汞 的檢測方式有滴定法和原子吸收分光光度法、色譜柱法、高效液相色譜-電感耦合等離子體質譜法。這幾種檢測方式當中只有高效液相色譜-電感耦合等離子體質譜法是最新的技術，檢測結果精準方便可行。

（2）甲醛，該物質是重要的化工原料，廣泛運用在木材、工業、紡織產業內。食品和 化妝品當中也是常見的防腐劑。生物制品中啟用甲醛溶劑是滅活劑作用，能夠破壞微生物的生物學活性、繁殖能力、致病能力等，而且不影響藥劑本身的免疫性，因此該物質也被廣泛運用，作為常用的防腐劑，在狂犬疫苗、破傷風疫苗中都有使用。但是甲醛是細胞原生質毒物，被WHO確認為是致癌、致畸物質，是公認的變態反應源，可以與蛋白質結合。在實際中高濃度吸入會出現嚴重的呼吸道疾病，出現眼刺激、頭痛、誘發性哮喘等。實際上甲醛嚴重威脅了人們的生產生活，必須嚴格控制。現有檢測方式有分光光度法、電化學法、色譜法、熒光法、化學發光法等[3]。

2.2 佐劑

佐劑也叫作免疫佐劑immunological adjuvant，這種稱呼在免疫學和生物制品上比較廣泛，佐劑的特征是可以增強抗原特異性。佐劑可以明顯增加多糖、多肽等抗原性微弱物質，誘導機體產生特異性免疫應答，如果自身無免疫原性不能引起免疫應答反應，使用最少量的抗原和最少的接種刺激機體就可以產生足夠的抗體，可以在血液和黏膜位置維持較長時間，發揮良好效果。佐劑具備特征是：無毒、無致癌性、純度高、有吸附能力，能夠被機體吸收、降解。佐劑還不含有與動物發生交叉反應的抗原。具備優良的穩定性質，存儲一年上不會發生分解、變質。佐劑主要有幾種：礦物質佐劑、有機、微生物佐劑、可降解顆粒性佐劑、含脂類、免疫類等。這里簡單進行列舉：

（1）鋁鹽佐劑，該物質是目前運用在臨床的免疫佐劑，而氫氧化鋁是最常用佐劑，免疫增強作用非常明顯，通過鋁鹽佐劑和抗原的吸附作用實現免疫增強，因此鋁鹽含量是免疫增強的重要指標。但是鋁會損害人的腦細胞，人使用之后會在人體內慢慢沉積，毒性緩慢但是不易察覺，一旦發生毒性反應后就會造成非常嚴重人體傷害，因此需要嚴格控制人體各種途徑的鋁攝入量。在?中國藥典?三部中要求使用滴定法來檢測含量，能夠得到控制用量的效果。在相關報道中，微波消解-石墨爐原子吸收法檢測也可以取得理想效果，該方式快捷，檢測精密度、靈敏度都可以達到要求。

2.3 保護劑

冷凍干燥是目前保持微生物和動物組織、細胞活性方面最普遍的使用的藥品生產方式，該方式是在真空條件下升華冰晶達到低溫脫水。但是在凍干過程中會造成細胞微生物的部分損傷、死亡等，因此需要添加凍干保護劑來防止被破壞。保護劑可以防止I類生物活性物質在冷凍真空干燥的時候遭到破壞，改變生物樣品在凍干環境下的物理化學環境，降低細胞損傷，保持生物的原本活性。根據保護劑作用機制可以將其劃分為滲透型、非滲透型，滲透型可以結合溶液中的水分子減弱水的結晶過程。非滲透型不能進入細胞，可以在一定條件下降低溶質濃度來保護目標，如多羥基化合物、糖、氨基酸、聚合物、蛋白質等[4]。如甘油，甘油可以保護菌種，但是甘油濃度超過0.8%，就會導致過氧化氫酶完全復性，對紅細胞有溶血作用，因此產品的質量控制中需要嚴格控制甘油含量。可使用甘油激酶-甘油磷酸酶氧化酶-過氧化物酶偶聯法來對其檢測。

結束語：

綜上，生物制品輔料種類非常多，文章篇幅有限，僅僅針對部分進行簡單分析。在我國生物制劑發展的過程中，國家法規標準對制劑中使用輔料有嚴格用法用量控制要求，在使用中必須符合國家標準。目前我國標準記錄的輔料品種有限，檢測方式也存在一定誤差。在這種情況下專業人員還應不斷研究、創新，對其進行分析，創新研究方式，為生物制品的研制、研發提供參考意見。

參考文獻：

[1]王喆. 生物制品無菌檢查試驗方法及其應用發展[J]. 華東科技（綜合），2020，000（003）：1-1.

[2]胡雪，張志偉，梁建英，等. 食品接觸材料中幾種有害物質限量標準和檢測方法的研究進展[J]. 食品安全質量檢測學報，2020（13）：4158-4164.

[3]張海霞. 水產品中常見酚類化合物及其檢測方法研究進展[J]. 食品安全導刊，2020，283（24）：104-104.

[4]郭笑語，潘東，陳曉旭，等. 狂犬病病毒糖蛋白抗原含量雙抗體夾心ELISA檢測方法的建立及驗證[J]. 中國生物制品學雜志，2020，33（04）：79-82+89.