藏藥唐古特青蘭的化學成分和生物活性研究進展

羅建萍，劉文星,,，周 敏，趙 平 ，釧永明

(1.云南民族大學 化學與環境學院 云南省高校智能超分子化學重點實驗室 生物基材料綠色制備技術國家地方聯合工程中心，云南 昆明 650500;2.云南民族大學 民族藥資源化學國家民族事務委員會-教育部共建重點實驗室，云南 昆明 650500;3.西南林業大學 西南地區林業生物質資源高效利用國家林業與草原局重點實驗室，云南 昆明 650224)

藏藥唐古特青蘭(DracocephalumtanguticumMaxim)屬于唇形科(Labiatae)青蘭屬(Dracocephalum)的多年生草本植物，又稱為甘青青蘭，有臭味，高35～55 cm，產甘肅西南，青海東部，四川西部及西藏東南部，生于海拔1 900～4 000 m 干燥河谷的河岸、田野、草灘或松林邊緣，全草可入藥，能治療胃炎、肝炎、頭暈、神疲、關節炎及癤瘡[1].根據文獻的報道，該植物有顯著的抗缺氧、抗心肌缺血、抗糖尿病、預防心臟毒性和抗癌等活性，到目前為止，從該植物中分離得到了55個化合物，文中就藏藥唐古特青蘭的化學成分和生物活性研究進行綜述.

1 唐古特青蘭的化學成分

文獻報道唐古特青蘭(D.tanguticum，簡寫為DtM)含有黃酮、酚類或鞣質、香豆素與內酯、蒽醌、甾體、三萜、強心苷、揮發油、有機酸、蛋白質、氨基酸與多肽、皂苷、多糖及苷等化學成分[2-3].主要對唐古特青蘭的化學成分研究做簡要的綜述.

1) 黃酮 DtM中的總黃酮含量約為5.66%[2]，目前已有多種黃酮提取分離和含量測定方法，如采用微波提取，在微波時間 7 min，溫度 59 ℃，乙醇體積分數27%，液料比 25∶1(mL/g)時總黃酮實際得率為29.68%[4]，義西求吉等[5]用優化的磁固相萃取-高效液相色譜法(MSPE-HPLC)同時測定了甘青青蘭中5種黃酮化合物的含量.目前從該植物中發現了22個黃酮類天然產物.其中Wang等[6]從DtM全草的乙醇提取物中分離得到了17個黃酮(ladanetin-6-O-β-(6″-O-acetyl)glucoside (1)、pedalitin-3′-O-β-glucoside (2)、eriodictyol-7-O-β-D-glucopyranoside (3)、5,7,3′,5′-tetrahydroxyflavanone-7-O-β-D-glucopyranoside (4)、naringenin-7-O-β-D-glucopyranoside (5)、apigenin-7-O-β-D-glucopyranoside (6)、luteolin-7-O-β-D-glucopyranoside (7)、tilianin (8)、luteolin-7-O-β-D-glucuronide ethyl ester (9)、pedaliin-6″-acetate (10)、pedalitin-6-O-glucoside (11)、ladanetin-6-O-β-D-glucopyranoside (12)、eriodictyol (13)、naringenin (14)、3′,5,5′,7-tetrahydroxyflavanone (15)、luteolin (16)和7-O-methyl-seutellarein (17)；張曉峰等[7]從DtM中得到大波斯菊苷(6)、胡麻素(18)、胡麻苷(11)、胡麻苷-6″-乙酸酯(10)；Zeng等[8]從DtM中得到pectolarigenin (19)和luteolin-7-methoxy-3′-O-(3″-O-acetyl)-β-D-glucopyranuronic acid-6″-methyl ester (20)；Ma等[9]從其中得到了5-hydroxy-4′-methoxyflavone-7-O-rutinoside (21)和narirutin (22)，見圖1.

圖1 唐古特青蘭中的黃酮類化合物

2) 三萜和甾體類化合物 李霽昕等[10]從DtM中得到了10個三萜類化合物，分別為羽扇豆烷-20(29)-烯-28-酸-3-醇 (23)、羽扇豆烷-20(29)-烯-3,28-二醇 (24)、齊墩果酸(25)、齊墩果烷-12-烯-28-酸-3-酮 (26)、烏蘇烷-12-烯-28-酸-2α,3β-二醇 (27)、烏蘇烷-12-烯-28-酸-3β,24醇 (28)、豆甾-3-酮 (29)、β-谷甾醇-3-O-葡萄糖基(6→1)-十六烷酸苷 (30)、β-谷甾醇 (31)、β-胡蘿卜苷 (32)；張曉峰等[7]分離得到了齊墩果酸 (25)、熊果酸 (33)、β-胡蘿卜苷 (32)；周雪杉等[11]從DtM中得到了β-谷甾醇 (31)、α-香樹脂醇 (34)和羽扇豆醇 (35)；鄭洪婷等[12]發現了齊墩果酸 (25)、熊果酸 (33)、白樺酯醇 (24)和3β,20α-二羥基烏蘇烷-21(22)-烯-28-酸 (36)；夏青等[13]得到了β-谷甾醇 (31)、齊墩果酸 (25)和β-胡蘿卜苷 (32)，見圖2.

圖2 唐古特青蘭中的三萜和甾體等類型化合物

3) 苯乙酰胺糖苷 Wang等[14]從DtM中分離了4個精胺糖苷類化合物dracotanosides A～D (37～40)，Ma等[9]分離得到了4個苯乙酰胺糖苷類化合物dratanguticumide B (41)、dratanguticumide C (42)、(E)4-O-[β-D-glucopyranosyl-(1→3)-α-L-rhamnopyranosyl]phenylethylcinnamamide (43)以及dratanguticumide A (44)，見圖3.

圖3 唐古特青蘭中的苯乙酰胺(糖苷)類化合物

4) 其他化合物 左馬怡等[15]從DtM全草中分離得到了4個苯丙素類化合物(迷迭香酸(45)、迷迭香酸甲酯 (46)、2,3-2H-3-羥基-咖啡酸甲酯 (47)和咖啡酸 (48))、對羥基苯甲酸 (49)和原兒茶酸 (50)；Zeng等[8]還從該植物中得到的5個苯系物，它們分別是benzyl-6-[(2E)-2-butenoate]-β-D-glucopyranoside (51)、2-methoxy-4-(2-propen-1-yl)penyl-6-acetate-β-D-glucopyranoside (52)、2-methoxy-4-(2-propen-1-yl)penyl-6-[(2E)-2-butenoate]-β-D-glucopyranoside(53)、 benzyl-β-D-glucopyranoside (54)和2-methoxy-4-(2-propen-1-yl)penyl-β-D-glucopyranoside (55)，見圖4.

圖4 唐古特青蘭中的其他類型化合物

5) 揮發油 肖遠燦等[16]對產自青海的DtM鮮花和新鮮枝葉的精油分析結果表明，新鮮枝葉精油含有44種成分，而鮮花精油比新鮮枝葉精油多15種成分；乙酸芳樟酯在鮮花和新鮮枝葉中含量最高，相對含量分別為31.67%和36.16%，作者認為不同的產地，干燥的DtM會損失精油等原因會導致精油的含量不一樣.

6) 多糖 慶易微等[17]用回流、浸漬、超聲提取法提取DtM中的多糖，得到的多糖含量分別為15.6%、10.4%和4.2%；子巴等[18]采用L9(34)正交實驗對確定了用超聲法提取DtM多糖的最佳工藝條件是把藥材切成段狀，料液比為 1∶16，提取時間 5 h.高生英等[19]發現青海大通縣的DtM多糖含量最高，適宜采集期為7月中旬，他們還發現DtM中的多糖提取中，各提取因素對多糖提取率的影響大小為：料液比>提取時間>提取溫度.

7) 無機元素 文獻報道唐古特青蘭中的無機元素主要含有Ni、Cr、V、Mn、Cu、Zn、Co、Se、Fe、As、Pb、Al、Ba、Mg、K 和Ca等元素[20].

2 唐古特青蘭的活性研究

國內外學者對DtM的藥理活性作了一系列的研究，如抗缺氧、抗菌、抗病毒、抗心肌缺血、抗氧化、抗腫瘤、抗糖尿病等活性，本部分對唐古特青蘭的活性研究做簡要的綜述.

1) 抗缺氧活性 DtM的抗缺氧活性研究較多，如李永芳等[21]報道DtM能顯著降低低氧性肺動脈高壓大鼠mPAP、RVHI 及肺組織MDA的含量，改善肺小動脈管壁增厚和管腔狹窄，顯著升高肺組織GSH-Px和SOD活性，對低氧性肺動脈高壓具有一定的防治作用；DtM還可通過降低ET-1(肺組織中內皮素)的含量促進eNOS(內皮型一氧化氮合酶)的表達，增加NO含量，調節NO/ET-1的平衡，從而防治低氧性肺動脈高壓[22]；DtM還可通過抑制脂質的過氧化反應，從而防治高原低氧所引起的肝臟損傷[23].

2) 抗菌活性 海平等[24]用Kir by-Bauers紙片擴散法對DtM的乙醇粗提物、水煎液和揮發油進行體外抗菌試驗，結果認為DtM沒有抗菌作用；而胡君茹等[25]發現DtM提取物對金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌有抑菌作用，對大腸桿菌和糞腸桿菌沒有抑菌作用.

3) 抗病毒活性 吉守祥等[26]用細胞病變效應法測定32種藏藥提取物的活性，發現DtM具有抗HSV-1(單純皰疹病毒Ⅰ型)的活性.

4) 抗心肌缺血 劉鳳云等[27]發現DtM的水提液能顯著的減少大鼠急性心肌缺血的面積，可以顯著降低T波幅度，降低心肌缺血造成的心電圖ST段位移，并減少血清LDH的釋放量，證實了DtM的水溶液對該模型的急性心肌缺血有明顯的保護作用.

5) 抗氧化活性 謝建鋒等[28]使用超聲波輔助提取DtM總黃酮，發現該方法提取率高，提取物有明顯的抗氧化活性.

6) 抗癌活性 鄭思建等[29]通過對100種常用的藏藥提取物使用MTT法對2個肝癌細胞株HepG2和SMMC-7721進行抗腫瘤活性測試，同時選用L-02細胞來評價其體外毒性，發現DtM的乙酸乙酯提取物能誘導HepG2細胞凋亡，有顯著的抗腫瘤活性.

7) 抗糖尿病活性 顧健等[30]用DtM揮發油灌胃治療Ⅱ型糖尿病大鼠，有顯著治療作用，認為其作用機制可能是DtM能夠改善胰島素受體水平、增加肝細胞膜胰島素受體數量；DtM揮發油和醇提物能明顯降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖水平，有顯著的治療作用，對正常小鼠的血糖水平沒有明顯的影響[31].

8) 藥物代謝研究 廖敬禮等[32]通過HPLC測定DtM醇提取物中的齊墩果酸的藥代動力學規律，發現齊墩果酸在大鼠體內的代謝符合一室模型，吸收快，消除快.

9) 唐古特青蘭中得到的化合物的活性研究 Zeng等[8]對從該植物中得到的7個化合物進行了對LPS誘導原代264.7巨噬細胞產生NO抑制活性研究，發現化合物(19)和(20)對NO產生的抑制率IC50值分別為64.33和 48.02 μmol/L，而化合物51～55沒有明顯的活性.Ma等[9]對從中分離得到的3個苯乙酰胺糖苷類化合物(41～43)進行了抗高血糖和抗真菌(白色念珠菌)活性測試，發現它們對3T3-L1脂肪細胞葡萄糖的消耗率分別為(20.80 ± 1.47)%,(21.48 ± 2.44)%和(21.57 ± 1.35)%，但它們沒有明顯的抗真菌活性.化合物37～40對K562 和 K562/A02細胞株沒有明顯的細胞毒活性[14].Wang等[6]對化合物1～17進行了細胞保護和系統的抗氧化活性研究，并對化合物7進行了對阿霉素(DOX)誘導的細胞損傷的保護作用、對DOX引起Ca2+的濃度的影響和對DOX抗腫瘤活性的影響.他們發現DtM中的黃酮如果B環的3′、4′位含有羥基，C-2和C-3之間有雙鍵(如化合物7、9和16)有很強的細胞保護活性；不同濃度的化合物7預處理后可降低DOX的細胞毒性；化合物7預處理H9c2細胞后，在DOX誘導的形態學變化中得到了明顯保護；化合物7預處理后顯著抑制了細胞內DOX誘發的細胞內活性氧化物(ROS)的濃度；在正常細胞中，Ca2+的含量很低，而DOX會增加Ca2+的含量，經過化合物7預處理后則會抑制DOX引起的Ca2+升高；此外，還發現化合物7預處理后不會降低DOX抗腫瘤活性；研究者認為化合物7很有可能成為一個能預防心臟毒性的藥物.

3 結語

藏藥唐古特青蘭有顯著的生物活性和多種化學成分，具有很好的研究價值和廣闊的應用前景.近年來，隨著天然藥物化學研究手段的發展，對唐古特青蘭的化學成分和生物活性研究也不斷深入.雖然該植物中發現的化合物種類較多，但總數仍然不夠多，還需進一步研究以發現結構更新穎，且具有更好活性的化合物；該植物的部分黃酮已經有了初步的構效關系研究，發現了1個有潛力成為預防心臟毒性藥物的化合物，但仍需深入研究；此外，該植物中其他結構類型的化合物的活性還需要進一步研究，以更好的研究開發藏藥唐古特青蘭.