慢性乙型肝炎患者HIF-1α水平與肝纖維化相關(guān)性探討

師麗娟 趙東煥

乙肝病毒可在患者體內(nèi)不斷的復(fù)制及增殖導(dǎo)致肝細(xì)胞的損傷，且隨著肝臟的反復(fù)損傷可導(dǎo)致肝纖維化的形成，隨后發(fā)展成為肝硬化甚至是原發(fā)性肝癌、肝衰竭。可以認(rèn)為，肝纖維化是發(fā)展成為肝硬化的一個必要階段。報道[1]指出，早期發(fā)現(xiàn)并阻礙肝纖維化的進(jìn)展能夠在一定程度上延緩甚至是避免肝纖維化的發(fā)生及發(fā)展。外周血缺氧誘導(dǎo)因子-1（hypoxia-inducible factor 1，HIF-1）作為目前臨床工作中能夠作用于機(jī)體先天性免疫反應(yīng)以及炎癥性疾病的一類重要調(diào)節(jié)因子，主要由HIF-1α以及HIF-1β所構(gòu)成，前者在細(xì)胞內(nèi)的含量與氧濃度相關(guān)，被認(rèn)為是一種可以對HIF-1功能造成直接影響的亞基[2]。因此，在目前的臨床工作中，多對HIF-1α引起足夠的重視。現(xiàn)針對慢性乙型肝炎患者中的外周血HIF-1α水平與肝纖維化狀態(tài)的相關(guān)性探討，旨在探討其在肝纖維化中的診斷價值，結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取醫(yī)院自2019年5月—2021年5月收治的慢性乙型肝炎患者96例作為觀察組，全部患者均接受了肝穿刺活檢，并將結(jié)合其病理結(jié)果判斷患者的肝纖維化分期，參考肝纖維化分期標(biāo)準(zhǔn)將患者分為S1組（n=25）、S2組（n=22）、S3組（n=28）、S4組（n=21）。四組患者的臨床資料見表1。對比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

表1 四組人員的一般資料對比

診斷標(biāo)準(zhǔn)：慢性乙型肝炎及肝纖維化分期標(biāo)準(zhǔn)符合《慢性乙型肝炎防治指南（2019年版）》[3]、《肝硬化診治指南》[4]中相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。肝纖維化診斷標(biāo)準(zhǔn)參考《慢性病毒性肝炎纖維化分期計分標(biāo)準(zhǔn)》[5]，纖維化S0～S4計分標(biāo)準(zhǔn)，其中S0期為健康，尚未出現(xiàn)纖維化；S1期為匯管區(qū)出現(xiàn)了纖維化擴(kuò)大的情況，同時能夠觀察到局部竇周以及小葉內(nèi)纖維化的表現(xiàn)；S2期匯管區(qū)內(nèi)出現(xiàn)了纖維化擴(kuò)大的表現(xiàn)，同時可觀察到已經(jīng)形成了纖維間隔，但小葉結(jié)構(gòu)仍然被保留；S3期可以觀察到纖維間隔內(nèi)伴隨著小葉結(jié)構(gòu)紊亂的情況，尚未出現(xiàn)肝硬化；S4期為已經(jīng)發(fā)生了早期肝硬化。

納入標(biāo)準(zhǔn)：慢性乙型肝炎患者均符合上述診斷標(biāo)準(zhǔn)；在進(jìn)入研究前表面抗原的陽性已經(jīng)持續(xù)了6個月以上；尚未接受任何抗病毒相關(guān)治療；全部人員均簽署了關(guān)于本次實(shí)驗的知情權(quán)同意書。

排除標(biāo)準(zhǔn)：合并嚴(yán)心血管疾病以及腎功能障礙性疾病者；失代償性肝硬化患者；肝細(xì)胞癌患者；接受了肝移植患者；合并感染了其他肝臟病毒并接受了免疫抑制療法治療者。

1.2 方法

全部人員均接受了酶聯(lián)免疫吸附法對外周血中的HIF-1α水平進(jìn)行測量，同時采用了化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)對患者肝纖維化血清學(xué)標(biāo)志物進(jìn)行測量，并結(jié)合其檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。

1.2.1 外周血中的HIF-1α水平測量 收集全部人員的10 mL肘部空腹靜脈血，將其放置在肝素鈉試管中，放入室溫環(huán)境中30 min后，給予離心處理，離心半徑為6 cm，離心速度為2000 r/min，共離心10 min，取得血漿中，保存在零下80℃的環(huán)境中，測量前復(fù)溶0.5 h，使用酶聯(lián)免疫吸附法對外周血中的HIF-1α水平進(jìn)行測量。

1.2.2 肝纖維化血清學(xué)標(biāo)志物指標(biāo)測量 收集患者的血清操作方法同上，之后采用化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)對患者肝纖維化血清學(xué)標(biāo)志物血清中透明質(zhì)酸（hyaluronic acid，HA）、Ⅲ型前膠原氨端肽（Precollagen Ⅲ N-terminal peptide，P Ⅲ NP）、Ⅳ型膠原（Collage Type IV，C - Ⅳ）及層黏連蛋白（laminin，LN）的水平進(jìn)行測量。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS 18.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)分析。計量資料以（±s）表示，采取t檢驗，計數(shù)資料表示為（n，%），采用χ2檢驗。外周血中的HIF-1α水平及肝纖維化血清學(xué)標(biāo)志物的相關(guān)性采用Spearman分析。以P＜0.05代表差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 四組人員的外周血中的HIF-1α水平及肝纖維化血清學(xué)標(biāo)志物對比

S2組、S3組、S4組分別與S1組相比HIF-1α、HA、PIIINP、C-IV、LN水平較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=2.224、3.125、2.665、3.254、2.324；3.226、2.954、3.214、2.550、2.451；3.335、3.011、3.254、2.668、2.665，P＜0.05）。S3組、S4組分別與S2組相比HIF-1α、HA、PIIINP、C-IV、LN水平較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=3.815、4.005、2.055、3.845、2.125；4.341、4.215、2.224、4.125、2.154，P＜0.05）S4組與S3組相比HIF-1α、HA、PIIINP、C-IV、LN水平較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=2.491、3.088、2.349、3.196、2.109，P＜0.05）。見表2。

表2 四組人員的外周血中的HIF-1α水平及肝纖維化血清學(xué)標(biāo)志物對比 （±s）

表2 四組人員的外周血中的HIF-1α水平及肝纖維化血清學(xué)標(biāo)志物對比 （±s）

組別 例數(shù) HIF-1α（pg/mL） HA（ng/mL） PIIINP（ng/mL） C-Ⅳ（ng/mL） LN（ng/mL）S1組 25614．58±287．2430．25±55．7410．41±8．4550．35±25．7752．45±24．51 S2組 22657．21±240．1170．14±30．6610．05±2．1488．69±40．1260．95±33．41 S3組 28985．22±326．87135．69±69．5412．55±5．22162．87±80．4182．67±35．44 S4組 211457．58±815．66236．56±135．4716．69±5．72236．54±75．69110．68±51．47

2.2 外周血中的HIF-1α水平及肝纖維化血清學(xué)標(biāo)志物相關(guān)性

經(jīng)過Spearman分析可見，外周血中的HIF-1α分別與HIF-1α、HA、PIIINP、C - IV、LN水平呈現(xiàn)出明顯的正相關(guān)性（r=1.225、0.987、0.998、1.758，P＜0.05）。

3 討論

大量臨床研究報道顯示，肝纖維化作為慢性乙型肝炎進(jìn)展成為肝硬化的一個必須的途徑及階段，由于肝纖維化具有較強(qiáng)的可逆性，而肝硬化則難以逆轉(zhuǎn)，因此，對于肝纖維化進(jìn)行早期診斷至關(guān)重要，在預(yù)防肝硬化甚至是肝功能衰竭上具有突出的臨床意義[6-7]。

在目前臨床工作中，肝穿刺活檢被認(rèn)為是診斷早期肝纖維化的一個“金標(biāo)準(zhǔn)”，不過由于此類操作具有一定的創(chuàng)傷性，無法被一部分的患者所接受，甚至存在著依從性較差的表現(xiàn)，限制了其臨床工作中的廣泛應(yīng)用[8]。同時，肝纖維化血清標(biāo)志物作為一類無創(chuàng)傷性的檢測指標(biāo)，能夠反復(fù)操作且安全性較高，在臨床工作中得到了廣泛的應(yīng)用，但在近年來的研究中有報道開始認(rèn)為這類指標(biāo)仍然缺乏著特異性[9]。因此，尋找一種特異性及診斷性均較強(qiáng)的指標(biāo)至關(guān)重要。

有報道[10]指出，慢性乙型肝炎的發(fā)生發(fā)展與外周血HIF-1α水平具有一定的相關(guān)性，并可反應(yīng)出肝纖維化狀態(tài)所處于的階段。其中HIF-1α本身作為一種氧依賴性轉(zhuǎn)錄激活因子，在缺氧介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡以及增殖、甚至是腫瘤發(fā)生過程中起到著重要的作用。同時在某些慢性感染性疾病當(dāng)中，外周血HIF-1α的表達(dá)容易使得機(jī)體無法正常的清除體內(nèi)過多的病毒，甚至可加速疾病的進(jìn)展[11-13]。因此，在本次研究中，就慢性乙型肝炎患者中的外周血HIF-1α水平與肝纖維化狀態(tài)的相關(guān)性探討，結(jié)果顯示，S2組、S3組、S4組分別與S1組相比，S3組、S4組分別與S2組相比，S4組與S3組相比，HIF-1α、HA、PIIINP、C - IV、LN水平較高，之后經(jīng)過Spearman分析可見，外周血中的HIF-1α分別與HIF-1α、HA、PIIINP、C - IV、LN水平呈現(xiàn)出明顯的正相關(guān)性，證實(shí)了慢性乙型肝炎患者中的外周血HIF-1α水平與肝纖維化具有一定的相關(guān)性，可能參與到了肝纖維化的進(jìn)展，但具體作用機(jī)制仍然需要進(jìn)一步的研究。

綜上所述，慢性乙型肝炎患者中的外周血HIF-1α水平與肝纖維化處于的階段密切相關(guān)，該病指標(biāo)的變化在預(yù)測肝硬化上具有較高的早期應(yīng)用價值。