血清維生素A、淀粉樣蛋白A、EB病毒IgM聯(lián)合檢測對兒童呼吸道感染診斷價值

余先云， 冉彩萍， 何琛璐， 張曉慧， 張忠剛， 孫 勁， 周生元， 段令兄, 郭慧慧

1.青海省婦幼保健院 新生兒科，青海 西寧 810000；2.青海省婦女兒童醫(yī)院 急診科，青海 西寧 810000；3.聯(lián)勤保障部隊第九六七醫(yī)院 婦產科，遼寧 大連 116000

呼吸系統(tǒng)感染是臨床較常見的兒童多發(fā)性疾病，在兒科收治患者中約占3/4，嚴重影響患兒健康[1]。此外，呼吸系統(tǒng)感染復發(fā)性高，病程長，對患兒的學習和生活造成影響，也對其家庭造成嚴重的經(jīng)濟負擔[2]。兒童呼吸道感染發(fā)病原因一方面與其自身的生理解剖特點有關，另一方面與患兒免疫功能缺陷或低下、營養(yǎng)不良或維生素缺乏有關。維生素A、D、E是兒童生長發(fā)育中不可缺少的微量營養(yǎng)素，可增強免疫抵抗力，維持人體生長發(fā)育與正常生理功能[3]。有研究表明，感染性疾病患者血清淀粉樣蛋白A(serum amyloid A，SAA)水平明顯增加，增加時間早且迅速[4]。因此，該指標在感染性疾病中可能具有重要的診斷價值。機體免疫功能低下時，體內隱藏的EB病毒活化并引起機體一個甚至多個系統(tǒng)發(fā)生感染，其中，呼吸系統(tǒng)是最常見受累系統(tǒng)之一[5]。本研究旨在探討血清維生素A、SAA、EB病毒IgM(EB-IgM)聯(lián)合檢測在兒童呼吸道感染診斷中的診斷價值?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取自2017年1月至2019年12月于青海省婦幼保健院確診為呼吸道感染的100例患兒納入B組。所有患兒均根據(jù)呼吸道感染診斷標準(衛(wèi)生部制定)診斷確認[6]。排除標準：肝、腎等方面疾病及惡性腫瘤者；發(fā)病前服用免疫調節(jié)藥或腎上腺皮質激素等藥物者；患有其他肺部疾病者。另選取同期于我院接受健康體檢的98例正常兒童納入A組。A組中，男性44例，女性54例；平均年齡(6.17±1.23)歲。B組中，男性48例，女性52例；平均年齡(6.12±1.34)歲；上呼吸道感染58例，支氣管肺炎22例，支氣管炎16例，扁桃體炎4例。兩組研究對象性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準。所有研究對象家屬均簽署知情同意書。

1.2 研究方法 于清晨采集所有研究對象空腹10 ml靜脈血，3 500 r/min離心15 min取上清。采用免疫比濁法檢測C反應蛋白(C-reaction protein，CRP)；使用電阻抗法檢測白細胞計數(shù)(white blood cell count，WBC)水平；使用膠體金法檢測SAA；使用高效液相色譜檢測維生素A、維生素E；使用化學發(fā)光免疫技術檢測維生素D，試劑盒來自武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司。EB-IgM、EB-IgG、EB-IgA檢測：對分離的血清樣品給予如下操作，包括溫育、清洗、添加酶結合物進一步溫育、清洗、底物溫育、終止反應、比色等。待測樣品吸光度/標準品吸光度之比≥1.1，則判斷為陽性。EB-DNA檢測：提取DNA、擴增、加UNG酶反應、酶活化、變性、退火、延伸(循環(huán)數(shù)：45)。當達到熒光強度閾值的循環(huán)數(shù)<39時，則判斷為陽性。

2 結果

2.1 兩組研究對象臨床指標比較 B組EB-IgM、EB-IgG、EB-IgA、EB-DNA陽性率明顯高于A組，CRP、WBC、SAA水平均顯著高于A組，維生素A、維生素D、維生素E水平顯著低于A組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組研究對象臨床指標比較

2.2 多元Logistic回歸分析 多元Logistic回歸分析結果顯示，血清維生素A、SAA、EB-IgM是兒童呼吸道感染發(fā)生的獨立影響因素(P<0.05)。見表2。

表2 多元Logistic回歸分析結果

2.3 EB-IgM、SAA、維生素A單獨與聯(lián)合檢測兒童呼吸道感染診斷價值 EB-IgM+SAA+維生素A檢測的ROC曲線下面積、敏感度、特異度、準確度、陽性預測值、陰性預測值高于EB-IgM、SAA、維生素A單獨檢測，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。EB-IgM檢測敏感度、特異度、準確度、陽性預測值、陰性預測值高于SAA及維生素A單獨檢測，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表3、圖1。

表3 EB-IgM、SAA、維生素A單獨與聯(lián)合檢測兒童呼吸道感染ROC曲線分析

圖1 ROC曲線分析

3 討論

流行病學研究結果表明，兒童感染性疾病在小兒疾病中占據(jù)前列，而兒童呼吸道感染在其中具有重要位置，發(fā)病率高達40%[7]。上呼吸道感染未給予及時治療，病情易進展為下呼吸道感染，甚至造成腎炎、心肌炎、敗血癥、風濕熱等[8]。然而，病原學細菌培養(yǎng)檢查周期長，且陽性診斷率低，臨床診斷價值較低。因此，尋找更具準確性與特異性的檢測指標對于疾病的早期精準有效治療具有重要的臨床意義。此外，早期診斷疾病對判斷感染類型，避免抗菌藥物濫用，減少耐藥發(fā)生同樣具有重要作用。

作為載脂蛋白族中高度異類蛋白質之一，SAA主要表達于泡沫細胞、肝細胞及脂肪細胞中，在體內生物學過程發(fā)揮著重要作用。當機體受到炎性刺激并發(fā)生急性炎癥反應時，單核巨噬細胞活化并釋放大量炎性因子，如腫瘤壞死因子、白細胞介素等，并進一步刺激肝細胞合成SAA。有研究表明，正常人體內血清中SAA水平很低，當患兒發(fā)生呼吸道感染時，機體發(fā)生急性相反應，此時肝內合成SAA蛋白明顯增加，6 h后血清中含量可升高1 000倍[9]。本研究發(fā)現(xiàn)，相比于A組，B組血清中SAA水平明顯增加。這提示，檢測體內血清中SAA水平是否增加及其程度可為兒童呼吸道感染的診斷能提供重要的參考依據(jù)。

維生素A、D、E屬于脂溶性的微量營養(yǎng)素，是人體物質代謝必不可少的維生素，在兒童生長發(fā)育、維持機體正常生理功能等過程中具有重要作用。維生素A是保持正常視覺功能并維持細胞生長、上皮完整性、免疫力和生殖功能的必需營養(yǎng)素。維生素D對保持骨骼的健康至關重要，在肌肉功能和免疫系統(tǒng)中發(fā)揮重要作用。維生素E作為主要的脂溶性抗氧化劑可保護細胞膜免受自由基的氧化損傷，預防與氧化應激相關的慢性疾病。維生素缺乏癥是兒童發(fā)生呼吸道感染的重要因素之一。本研究結果顯示，上述維生素中僅維生素A是兒童呼吸道感染發(fā)生的獨立危險因素，B組患兒血清中維生素A水平較正常兒童低。維生素A具有抗感染作用。有研究發(fā)現(xiàn)，機體維生素A缺乏時，呼吸道纖毛柱狀上皮細胞纖毛消失，導致其鱗狀上皮發(fā)生化生，降低呼吸道黏膜密集性，進而降低呼吸道黏膜屏障功能，引起腺體細胞正常功能喪失，機體免疫功能降低，增加病原體入侵機體的可能性，最終導致呼吸道感染[10]。另有研究表明，血清中維生素A水平與免疫球蛋白、淋巴細胞轉化率正相關[11]。

有研究表明，在90%的兒童血清中可檢查出EB-IgG[12]。由于取材樣品的局限性，早期檢查結果EB-IgG假陽性結果較多。同時，由于EB-IgG被作為病毒感染的遠期指標，其早期診斷意義遠低于EB-IgM。EB-IgM含量與機體組織、器官損傷程度、疾病嚴重程度呈正相關，因此，臨床上可以根據(jù)EB-IgM含量對患兒感染性疾病嚴重程度給予準確判斷，準確給予藥量，以達到最佳的治療效果[13]。本研究中，檢測EB-IgM診斷兒童呼吸道感染的敏感度、特異度、準確度分別為74.74%、78.34%、76.12%，高于維生素A、SAA單獨檢測；同時，B組EB-IgM陽性率明顯高于A組，提示EB-IgM水平檢測可為兒童呼吸道感染的診斷提供重要的參考和判斷依據(jù)。

本研究結果表明，B組患兒EB-IgM陽性率、SAA均顯著高于A組，而維生素A水平顯著低于A組；多元回歸分析結果顯示，維生素A+SAA+EB-IgM聯(lián)合檢測的敏感度為96.09%、特異度為97.54%、準確度為95.02%，且此時ROC曲線下面積達到0.939。這提示，聯(lián)合檢測血清中維生素A、SAA、EB-IgM有利于臨床上兒童呼吸道感染的診斷、治療及預后判斷。

綜上所述，聯(lián)合檢測血清中維生素A、SAA、EB-IgM可明顯提高兒童呼吸道感染診斷的準確度、敏感度及特異度，三者聯(lián)合檢測效能優(yōu)于單獨檢測。