血清白細(xì)胞介素-10、白細(xì)胞介素-1β與慢性乙型肝炎肝纖維化程度的關(guān)系

陳艷

(商丘市第四人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，河南 商丘 476100)

慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B，CHB)患者因肝功能損傷，多存在不同程度炎癥反應(yīng)與肝纖維化(hepatic fibrosis，HF)，隨著HF的不斷發(fā)展，可進(jìn)展為肝硬化、肝癌，而早期HF是可逆的，因此早期對(duì)HF嚴(yán)重程度進(jìn)行評(píng)估具有積極的意義[1]。目前，肝活檢是評(píng)估HF程度的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但屬于有創(chuàng)檢查，存在出血、感染等風(fēng)險(xiǎn)，臨床使用受限。因此，需尋找更有效的方法評(píng)估CHB患者HF程度。研究發(fā)現(xiàn)，持續(xù)性炎癥反應(yīng)是慢性肝病發(fā)展為HF的重要病因機(jī)制，而白細(xì)胞介素(interleukin，IL)-10為抑炎因子，IL-1β為促炎因子，均參與炎癥反應(yīng)與免疫反應(yīng)[2]。由此可見，血清IL-10、IL-1β參與CHB患者HF發(fā)生、發(fā)展進(jìn)程，但關(guān)于二者在CHB患者HF病變程度中的研究較少。鑒于此，本研究旨在分析血清IL-10、IL-1β與CHB患者HF程度的關(guān)系。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取商丘市第四人民醫(yī)院2019年3月至2021年3月收治的100例CHB患者作為研究對(duì)象。 100例CHB患者中，男59例，女41例；年齡40～62歲，平均(49.23±2.06)歲；病程0.7～3.0 a，平均(1.62±0.28)a。本研究經(jīng)商丘市第四人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)通過。

1.2 選取標(biāo)準(zhǔn)(1)納入標(biāo)準(zhǔn)：①CHB符合相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]，且乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen，HBsAg)和(或)乙型肝炎病毒脫氧核苷酸(hepatitis B virus DNA，HBV-DNA)陽性>6個(gè)月；②肝相關(guān)生化指標(biāo)檢測(cè)異常；③依從性良好，可配合肝穿刺活檢；④患者及家屬簽署知情同意書。(2)排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他類型肝炎病毒；②合并嚴(yán)重心腦血管疾病；③伴有自身免疫性肝炎；④合并惡性腫瘤；⑤合并風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。

1.3 評(píng)估方法

1.3.1穿刺活檢及HF程度評(píng)估方法 患者取左側(cè)臥位，常規(guī)消毒鋪巾，實(shí)施局部麻醉，于超聲引導(dǎo)下進(jìn)行穿刺活檢，活檢針為16 G，方法為行經(jīng)皮肝臟穿刺活檢術(shù)，取約1.5～2.0 cm肝組織(鏡下至少包含個(gè)6個(gè)以上匯管區(qū))，送入病理科進(jìn)行檢驗(yàn)，常規(guī)甲醛固定，石蠟包埋，連續(xù)切片后進(jìn)行常規(guī)HE染色和Masson三重染色。病理切片結(jié)果由病理科2名經(jīng)驗(yàn)豐富的醫(yī)生參照《病毒性肝炎防治方案》[4]中相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)評(píng)估HF程度。S0期：無纖維化；S1期：包括匯管區(qū)、匯管區(qū)周圍纖維化和局限竇周及小葉內(nèi)纖維化；S2期：匯管區(qū)周圍纖維化且間隔形成，小葉結(jié)構(gòu)保留；S3期：纖維間隔伴小葉結(jié)構(gòu)紊亂，無肝硬化；S4期：形成肝硬化，且出現(xiàn)假小葉。將S0期患者納入無纖維化組，S1～S2期患者納入輕度組，S3～S4期患者納入中重度組。

1.3.2血清IL-10、IL-1β水平檢測(cè)方法 入院時(shí)，采集患者空腹外周肘靜脈血3 mL，以3 500 r·min-1速率離心15 min，取上清液，保存于-70 ℃環(huán)境中待檢測(cè)。采用化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)血清IL-10、IL-1β水平，試劑盒選自化學(xué)發(fā)光免疫分析法；相關(guān)操作需嚴(yán)格遵照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3.3一般資料采集分析方法 詢問并記錄患者一般資料，內(nèi)容主要包括性別、年齡、CHB病程等，同時(shí)記錄相關(guān)實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)，包括丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(alanine aminotransferase，ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(aspartate a minotransferase，AST)水平(患者入院時(shí)，取患者空腹?fàn)顟B(tài)下外周肘靜脈血3 mL，以3 500 r·min-1速率離心15 min，取上清液，采用羅氏Cobas e601全自動(dòng)生化儀檢測(cè)ALT、AST水平)等。

2 結(jié)果

2.1 穿刺活檢結(jié)果100例CHB患者經(jīng)穿刺活檢病理評(píng)估，S0期8例，S1期32例，S2期22例，S3期29例，S4期9例。無纖維化組8例，占8.00%(8/100)；輕度組54例，占54.00%(54/100)；中重度組38例，占38.00%(38/100)。

2.2 不同HF程度CHB患者入院時(shí)血清IL-10、IL-1β水平及一般資料中重度組入院時(shí)血清ALT、AST、IL-1β水平均高于輕度組、無纖維化組，IL-10水平均低于輕度組、無纖維化組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；無纖維化組與輕度組入院時(shí)血清ALT、AST、IL-10、IL-1β水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；3組其他一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 不同HF程度CHB患者入院時(shí)血清IL-10、IL-1β水平及一般資料比較

2.3 入院時(shí)血清IL-10、IL-1β水平與CHB患者HF程度關(guān)系的logistic回歸分析結(jié)果將治療前血清ALT、AST、IL-10、IL-1β水平作為自變量(均為連續(xù)變量)，將CHB患者HF程度作為因變量(1=中重度，0=輕度、無纖維化)，經(jīng)logistic回歸分析結(jié)果顯示，入院時(shí)血清ALT、AST、IL-1β過表達(dá)，IL-10低表達(dá)與CHB患者HF程度相關(guān)，可能作為CHB患者HF加重的風(fēng)險(xiǎn)因子(P<0.05)。見表2。

表2 入院時(shí)血清IL-10、IL-1β水平與CHB患者HF 程度關(guān)系的logistic回歸分析結(jié)果

3 討論

CHB患者若病毒感染、炎癥活動(dòng)持續(xù)性存在可引起細(xì)胞外基質(zhì)沉積，導(dǎo)致匯管區(qū)纖維沉積、纖維間隔形成，早期HF可逆轉(zhuǎn)，但病因持續(xù)存在，HF將逐漸加重，發(fā)展為不可逆轉(zhuǎn)的肝硬化[5]。因而，早期評(píng)估CHB患者HF程度具有必要性。

HF是指肝慢性損傷過程中，肝細(xì)胞炎癥、壞死等引起肝內(nèi)的膠原蛋白合成、降解失衡，導(dǎo)致纖維結(jié)締組織增生，并逐步發(fā)展為肝硬化。可見HF與炎癥密切相關(guān)。血清IL-10是重要的抗炎細(xì)胞因子，通過抑制多種促炎因子分泌來提高機(jī)體免疫力，抑制病毒持續(xù)性感染，減輕肝細(xì)胞損傷，對(duì)肝功能起到保護(hù)作用，可延緩HF進(jìn)程[6]。血清IL-1β可誘導(dǎo)肝發(fā)生炎癥反應(yīng)，激活肝星狀細(xì)胞轉(zhuǎn)為纖維母細(xì)胞，分泌大量膠原，加重HF程度[7]。由此推測(cè)，血清IL-10、IL-1β水平可能與CHB患者HF程度有關(guān)。

本研究結(jié)果顯示，中重度組入院時(shí)血清IL-10低于輕度組、無纖維化組，IL-1β水平均高于輕度組、無纖維化組，進(jìn)一步logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，入院時(shí)血清IL-10低表達(dá)，IL-1β過表達(dá)與CHB患者HF程度相關(guān)，提示HF病變加重。分析其原因可能為，IL類細(xì)胞因子主要由單核細(xì)胞及免疫活性細(xì)胞產(chǎn)生，參與機(jī)體炎癥、免疫調(diào)節(jié)等，炎癥與免疫損傷可破壞肝各細(xì)胞與細(xì)胞外間質(zhì)之間的平衡，引起肝細(xì)胞外基質(zhì)異常沉積，最終形成HF、肝硬化。

IL-10屬于抑炎因子，可降低中性粒細(xì)胞水平，延緩局部肝組織浸潤、活化而出現(xiàn)的病理性改變，并抑制或者減少促炎介質(zhì)的釋放，對(duì)肝起到保護(hù)作用；且IL-10可抑制轉(zhuǎn)化生長因子β1的產(chǎn)生，避免HF加重，并抑制巨噬細(xì)胞分泌腫瘤壞死因子-α，通過抑制腫瘤壞死因子-α下游效應(yīng)物NF-κB達(dá)到重構(gòu)細(xì)胞外基質(zhì)的目的，從而抑制肝內(nèi)纖維結(jié)締組織增生，延緩HF進(jìn)程[8]。因此血清IL-10低表達(dá)多提示CHB患者HF病變加重。但也有研究發(fā)現(xiàn)，在CHB患者中IL-10持續(xù)增高提示患者免疫作用增加，病情較為嚴(yán)重，易出現(xiàn)遷延不愈[9]。因而IL-10與CHB病情及HF程度的關(guān)系還需進(jìn)一步探討。IL-1β過表達(dá)引起相關(guān)炎癥介質(zhì)大量釋放，加重肺損傷，同時(shí)可誘導(dǎo)基質(zhì)金屬蛋白酶的分泌，影響肝細(xì)胞外基質(zhì)代謝，致肝細(xì)胞膜表面大量纖維增生，HF程度不斷加重[10]。但本研究也有局限，如未觀察CHB患者病情改善后其血清IL-10、IL-1β水平變化情況，關(guān)于二者因果關(guān)系還需今后進(jìn)一步研究證實(shí)。除血清IL-10、IL-1β外，本研究還發(fā)現(xiàn)血清ALT、AST也與CHB患者HF程度相關(guān)，但二者已經(jīng)是公認(rèn)影響CHB患者HF程度的影響因子，故在本研究中并未進(jìn)行具體分析，主要觀察血清IL-10、IL-1β與CHB患者HF程度關(guān)系。

綜上所述，血清IL-10低表達(dá)、IL-1β過表達(dá)與CHB患者HF程度密切相關(guān)，IL-10低表達(dá)、IL-1β過表達(dá)提示患者HF病變加重，未來臨床可考慮早期監(jiān)測(cè)血清IL-10、IL-1β水平，可能對(duì)評(píng)估CHB患者HF程度具有積極的意義。