抗核抗體與抗β2糖蛋白-1抗體水平的相關(guān)性研究*

胡瓊文，田 華，劉春艷，李智杰，宋姍姍，雷胡芯，廖 璞

中國(guó)科學(xué)院大學(xué)重慶醫(yī)院/重慶市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，重慶 400014

抗核抗體(ANA)是一組以自身真核細(xì)胞為靶抗原的自身抗體，是診斷自身免疫性疾病的基礎(chǔ)[1-2]。抗磷脂綜合征(APS)是一組由抗磷脂抗體介導(dǎo)的，以動(dòng)靜脈血栓形成、反復(fù)妊娠失敗及血小板減少為特征的自身免疫性疾病[3]。抗β2糖蛋白-1(β2GP-1)抗體作為APS分類標(biāo)準(zhǔn)中的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)，參與了國(guó)際APS評(píng)分系統(tǒng)血栓風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及病理妊娠風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[4-6]。本研究通過對(duì)ANA核型、滴度與抗β2GP-1抗體水平進(jìn)行相關(guān)性分析，探討了ANA陽性患者是否存在更高的血栓或病理妊娠風(fēng)險(xiǎn)。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2019年5月至2020年8月本院檢驗(yàn)科常規(guī)檢測(cè)ANA譜的125例新鮮血清標(biāo)本，其中ANA陽性患者(ANA陽性組)標(biāo)本80例，ANA陰性患者(ANA陰性組)標(biāo)本45例。

1.2儀器與試劑 儀器：德國(guó)Leica熒光顯微鏡、iFlash3000A全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光分析儀、-80 ℃低溫冰箱、CycleBlot48全自動(dòng)免疫印跡儀、Mk3酶標(biāo)儀、100～1 000 μL加樣槍，5～50 μL加樣槍。試劑：ANA IgG檢測(cè)試劑盒(間接免疫熒光法,歐蒙醫(yī)學(xué))、ANA譜(IgG)檢測(cè)試劑盒(德國(guó)胡曼)、抗β2GP-1抗體檢測(cè)試劑盒(亞輝龍)。

1.3方法 ANA譜檢測(cè)采用化學(xué)發(fā)光免疫分析法進(jìn)行抗β2GP-1抗體水平檢測(cè)，按照試劑說明書，抗β2GP-1抗體水平大于20 AU/mL判為陽性。采用抗β2GP-1抗體陽性非定值質(zhì)控品進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)量控制。繪制Levey-Jennings質(zhì)控圖，質(zhì)控規(guī)則采用12S預(yù)警，13S、22S、R4S失控的規(guī)則，觀察和控制檢測(cè)過程的精密度。

2 結(jié) 果

2.1兩組基線資料比較 兩組年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。ANA陽性組女性占比與ANA陰性組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。兩組抗PM-Scl抗體陽性例數(shù)比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，其余抗體陽性例數(shù)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組基線資料比較

2.2ANA核型與滴度特征分布情況 ANA陽性組中ANA核型以核顆粒型(30例)、核均質(zhì)型(18例)為主，ANA滴度以1∶1 000(32例)、1∶320(27例)為主；抗β2GP-1抗體陽性血清中ANA核型以核顆粒型(6例)、胞漿顆粒型(4例)為主，ANA滴度以1∶100(5例)、1∶1 000(4例)為主。

2.3相關(guān)性分析 ANA陽性組ANA核型、滴度與抗β2GP-1抗體定量相關(guān)性分析結(jié)果表明，ANA核型、滴度與抗β2GP-1抗體定量之間不存在線性相關(guān)性。見圖1。

注：A為ANA滴度與抗β2GP-1抗體定量相關(guān)分析；B為ANA核型與抗β2GP-1抗體定量相關(guān)分析。

3 討 論

APS是以動(dòng)脈和(或)靜脈血栓形成、復(fù)發(fā)性宮內(nèi)胎兒丟失、血小板減少癥、溶血性貧血和神經(jīng)系統(tǒng)疾病與循環(huán)抗磷脂抗體存在為主要特征的系統(tǒng)性自身免疫性疾病[3]。β2GP-1作為一種天然抗凝劑可抑制血液凝固的內(nèi)在途徑及凝血酶原活性，已被鑒定為主要抗原目標(biāo)，這導(dǎo)致了抗β2GP-1抗體干擾天然抗凝劑β2GP-1的穩(wěn)態(tài)特性從而使機(jī)體處于易栓狀態(tài)[7]。

化學(xué)發(fā)光技術(shù)已被應(yīng)用于自身抗體檢測(cè)[8-9]，有研究表明新的化學(xué)發(fā)光免疫分析法對(duì)抗心磷脂抗體和抗β2GP-1抗體的測(cè)定具有較高的診斷性能[10-11]。本研究通過對(duì)80例ANA陽性患者和45例ANA陰性患者的血清進(jìn)行抗β2GP-1抗體定量檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)ANA陽性組比ANA陰性組中抗β2GP-1抗體陽性者所占比例更高，Pearson相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)ANA核型、滴度與抗β2GP-1抗體定量之間不存在線性相關(guān)性。

ANA作為自身免疫性疾病(AID)重要的生物學(xué)標(biāo)志，是臨床應(yīng)用中最廣泛、最基礎(chǔ)的一組自身抗體。臨床上ANA常見于系統(tǒng)性紅斑狼瘡等系統(tǒng)性AID患者，也可以見于器官特異性AID患者，如自身免疫性肝病等，此外，ANA還可以出現(xiàn)于慢性感染性疾病、腫瘤及健康人群中[12]。本研究發(fā)現(xiàn)ANA陽性患者與ANA陰性患者相比有更高的抗β2GP-1抗體陽性例數(shù)，而抗β2GP-1抗體可干擾天然抗凝劑β2GP-1的穩(wěn)態(tài)特性從而使機(jī)體處于易栓狀態(tài)，因此推斷ANA陽性患者存在潛在更高的血栓或不良妊娠風(fēng)險(xiǎn)，臨床上需警惕。

本研究對(duì)患者ANA核型、滴度與抗β2GP-1抗體水平的相關(guān)性進(jìn)行研究，目前國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究報(bào)道較少。但本研究存在一定的局限性，由于總標(biāo)本例數(shù)和抗β2GP-1抗體陽性例數(shù)均較少，統(tǒng)計(jì)學(xué)上存在一定的偏倚，后續(xù)需要增加總標(biāo)本例數(shù)以得出更加信服的結(jié)論。