難治性腎病綜合征遺傳背景檢測及其臨床應(yīng)用

于春杰

（吉林省四平市中心人民醫(yī)院，吉林 四平 136000）

0 引言

難治性腎病綜合征屬于腎臟疾病類型，臨床多表現(xiàn)為大量尿蛋白、低血漿白蛋白等，實(shí)施藥物治療效果相對較差。根據(jù)患者表現(xiàn)出的特征分型為：激素耐藥型、依賴型及頻復(fù)發(fā)，由于難治性患者難以及時治療，導(dǎo)致患者的腎臟損害進(jìn)展較快，從而進(jìn)展為終末期腎病。臨床有關(guān)研究證實(shí)遺傳變異屬于難治性腎病綜合征患者發(fā)生的關(guān)鍵因素之一，多個基因變異均容易造成功能及療效的影響。本研究將對難治性腎病綜合征患者應(yīng)用遺傳背景檢測及價值進(jìn)行分析，實(shí)驗(yàn)內(nèi)容如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選擇2019 年4 月至2020 年4 月本院腎臟內(nèi)科收治的25 例難治性腎病綜合征患者為觀察組，選擇同期住院的25例普通腎病綜合征患者為對照組，均進(jìn)行基因檢測。對照組男15 例，女10 例，年齡為15～72 歲，平均（28.43±2.56）歲。觀察組男16 例，女9 例，年齡為12～70 歲，平均（48.32±8.56）歲，兩組研究對象的資料無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

診斷標(biāo)準(zhǔn)：患病兒童符合《兒童常見腎臟疾病診治循證指南（一）（三）》[2-3]中關(guān)于原發(fā)性難治性腎病綜合征的診斷標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)臨床檢測出大量蛋白尿>50 mg/kg，血漿白蛋白<25 g/L 且表現(xiàn)為高度水腫、高血脂癥；激素耐藥型患者表現(xiàn)出應(yīng)用潑尼松治療4 周進(jìn)行尿蛋白檢測呈陽性；激素依賴型患者表現(xiàn)出連續(xù)性的2 次藥物停用或減量出現(xiàn)復(fù)發(fā)跡象；頻復(fù)發(fā)患者表現(xiàn)出治療病程中6 個月內(nèi)出現(xiàn)復(fù)發(fā)次數(shù)高于2 次。患病成人符合《中國成人腎病綜合征免疫抑制治療專家共識》[4]中的診斷：經(jīng)臨床檢測出大量蛋白尿>3.5 g/d，血漿白蛋白<30 g/L 且表現(xiàn)為高度水腫、高血脂癥。

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合上述原發(fā)性難治性腎病綜合征診斷標(biāo)準(zhǔn)及分類標(biāo)準(zhǔn)；（2）患者年齡10～75 歲；（3）患者或監(jiān)護(hù)人對本研究知情且清楚檢測過程。

排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）患者為近親結(jié)婚；（2）合并乙型相關(guān)性、狼瘡腎炎、骨髓瘤性等繼發(fā)性因素導(dǎo)致難治性腎病綜合征患者；（3）患者或監(jiān)護(hù)人的依從性較差。

1.2 檢測方法

采集患者的3 mL 外周血，置于EDTA 抗凝管中靜置備用。應(yīng)用DNA 提取試劑盒（型號：天根生化科技有限公司）進(jìn)行基因組DNA 的提取，按照說明書進(jìn)行嚴(yán)格操作，加入緩沖液、漂洗液等物質(zhì)后待測。應(yīng)用PCR 擴(kuò)增和DNA 二代測序法檢測兩組的基因，所用PCR 儀、LA Taq 酶、dNTPs 混合物均來源于日本TaKaRa 公司。選擇24 例患者對腎病綜合征的相關(guān)目的基因（NPHS1、NPHS2、WT1 等）進(jìn)行腎病Panel 檢測，1 例患者行全外顯子基因測序。

1.3 觀察指標(biāo)

基因突變檢測：對比兩組的基因檢測結(jié)果。

預(yù)后質(zhì)量：兩組均根據(jù)基因檢測結(jié)果進(jìn)行個性化治療，觀察兩組的預(yù)后質(zhì)量。

臨床療效標(biāo)準(zhǔn)：完全緩解（CR）-24 h 尿蛋白定性為陰性，血生化檢測處于正常，腎功能正常；部分緩解（PR）-24 h 尿蛋白水平有明顯改善，但未完全恢復(fù)正常；未緩解（NR）-4 h 尿蛋白水平未得到改善，下降幅度低于基線水平的50%；復(fù)發(fā)：經(jīng)過治療后又出現(xiàn)明顯癥狀。預(yù)后質(zhì)量=（CR+PR）/ 總例數(shù)×100%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 治療結(jié)果

2.1 對比兩組患者的基因檢測情況

觀察組的基因突變率（36.00%）明顯高于對照組（8.00%），P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表1。

表1 對比兩組患者的基因突變檢測情況[n(%)]

2.2 對比兩組患者的預(yù)后質(zhì)量情況

對照組的預(yù)后質(zhì)量與觀察組差異較小，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），如表2。

表2 兩組的預(yù)后質(zhì)量情況對比[n(%)]

3 討論

腎病綜合征患者臨床主要治療以激素用藥為主，可以有效緩解臨床高尿蛋白、低血漿白蛋白等相關(guān)癥狀，但是部分患者存在特異性表現(xiàn)，經(jīng)過長期治療仍然未得到緩解，或?qū)に禺a(chǎn)生依賴，停藥或降低劑量出現(xiàn)復(fù)發(fā)或已經(jīng)產(chǎn)生明顯療效但隨后半年內(nèi)出現(xiàn)2 次及以上高頻復(fù)發(fā)[5-6]。由于該病癥久治不愈容易產(chǎn)生嚴(yán)重感染或其他嚴(yán)重并發(fā)癥，導(dǎo)致患者進(jìn)展為終末期腎病的概率大大增加。因此有必要對腎病綜合征患者的發(fā)病機(jī)制進(jìn)一步研究，本研究顯示難治性腎病綜合征患者出現(xiàn)多個遺傳基因的變異，且預(yù)后質(zhì)量效果較差。

通過基因診斷結(jié)果采用對癥的個性化治療方案，阻斷患者的終末期腎病進(jìn)展，減少頻繁更換藥物或服用不對癥的藥物，從而引發(fā)患者的耐藥性或強(qiáng)烈的不良反應(yīng)。此外基因檢測可以有效預(yù)測疾病預(yù)后，提前做好腎臟移植的準(zhǔn)備。本研究結(jié)果顯示，相較于對照組，觀察組的基因突變情況明顯更高（P<0.05），但預(yù)后質(zhì)量明顯無明顯差異（P>0.05），可能是由于難治性患者經(jīng)過基因Panel、全外顯子組測序等方式可以有效檢測出致病基因以及新致病基因，從而進(jìn)行特異性對癥治療，降低患者的進(jìn)展風(fēng)險，與一般患者的預(yù)后質(zhì)量相差不大[7-8]。

綜上所述，難治性腎病綜合征患者進(jìn)行遺傳背景檢測，可以了解患者的發(fā)病機(jī)制，從而制定對癥的治療方案，提高臨床治療效果，臨床應(yīng)用價值高。