探討支氣管肺泡灌洗液抗酸桿菌涂片及細(xì)菌培養(yǎng)在肺部感染性疾病診斷中的應(yīng)用價(jià)值

高靜，曹立新

（內(nèi)蒙古呼倫貝爾市第四人民醫(yī)院，內(nèi)蒙古 呼倫貝爾 021000）

0 引言

肺部感染性疾病主要是由細(xì)菌或者病原體引起，中老年是患此類疾病的主要群體，主要的臨床癥狀有咳嗽、發(fā)熱、咳痰，是呼吸內(nèi)科中常見的疾病之一。由于肺部感染性疾病中不同的病原體所表現(xiàn)出臨床癥狀以及影像學(xué)的特征不具備單一性，所以只依靠臨床癥狀、檢驗(yàn)結(jié)果以及影像學(xué)特征來判斷是不準(zhǔn)確的。若患者沒有及時(shí)被診斷和治療，則會(huì)加重病情，嚴(yán)重的則會(huì)危及患者的生命。快速準(zhǔn)確的診斷則是對(duì)患者治療以及后期恢復(fù)起著重要作用。研究表明：BALF（支氣管肺泡灌洗液）中可以獲取細(xì)胞學(xué)、生物活性介質(zhì)、細(xì)胞因子等多種有用信息，引起B(yǎng)AL（肺泡灌洗液）成為診斷一些肺部疾病如：支氣管結(jié)核、肺結(jié)核、肺真菌病、肺部感染性疾病的重要手段[1]。本次對(duì)60 例肺部感染的患者進(jìn)行支氣管鏡檢查，留取BALF 涂片找抗酸桿菌、細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)核桿菌、PCR 法檢測(cè)結(jié)核DNA，探討對(duì)其相關(guān)肺部感染性疾病的診斷價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020 年1～6 月在我院住院的60 例肺部疾病患者作為研究對(duì)象。隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。其中實(shí)驗(yàn)組女性13 例，男性17 例，年齡25～60 歲，平均（43.3±9.6）歲。對(duì)照組女性16 例，男性14 例，年齡24～62 歲，平均（44.1±9.5）歲。對(duì)照組進(jìn)行傳統(tǒng)的痰培養(yǎng)以及痰找抗酸桿菌培養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)組則進(jìn)行纖維支氣管鏡檢查并在病變的部位取支氣管肺泡灌洗液送痰培養(yǎng)、抗酸桿菌以及PCR 檢測(cè)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：研究對(duì)象的胸部影像學(xué)顯示肺部明確病變，但診斷不明確，痰找抗酸桿菌涂片三次結(jié)果都為陰性，咳嗽、發(fā)熱癥狀在經(jīng)過常規(guī)治療后沒有得到緩解。患者在經(jīng)過抗感染治療后，效果不顯著，臨床癥狀沒有得到緩解，持續(xù)性咳嗽、發(fā)熱、咳痰等。

排除標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)過常規(guī)治療后患病癥狀得到明顯改善；痰找抗酸桿菌涂片均呈現(xiàn)陽(yáng)性。患者的痰涂片檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性，并且患者還伴隨有支氣管哮喘、氣胸等其他疾病。禁止手術(shù)的標(biāo)準(zhǔn)：患者有嚴(yán)重的換氣功能障礙；高血壓以及惡性心律失常的患者；主動(dòng)脈瘤有破裂的危險(xiǎn)；食管靜脈曲張；多發(fā)性出血傾向；肺大皰伴有破裂的風(fēng)險(xiǎn)不予以電子支氣管鏡檢查。

1.2 研究方法

所有的病人在術(shù)前都需要進(jìn)行詳細(xì)的心肺體檢、凝血功能、血壓以及心肺功能的檢測(cè)，保證患者有承受電子支氣管鏡的檢查的能力。在進(jìn)行檢測(cè)前需對(duì)病人拍攝CT 了解不同患者的病變部位。在檢查前需將支氣管鏡放在2%的防銹戊二醛中浸泡15 min，之后在用蒸餾水沖洗干凈。根據(jù)患者的個(gè)體差異判斷是否需要注射5 mg 的安定以及阿托品0.5 mg。年級(jí)偏大以及缺氧的患者則需要鼻導(dǎo)管輸送氧氣，在進(jìn)行咽喉麻醉后插入鼻腔。囑咐患者在術(shù)前應(yīng)保證禁食8 h 以上，在早晨進(jìn)行纖維支氣管檢查并留取BALF，送灌洗液行找抗酸桿菌涂片、PCR 檢查（TB-DNA）、細(xì)菌培養(yǎng)。支氣管鏡的整個(gè)吸引通道用生理鹽水徹底沖洗，再將支氣管鏡嵌入CT 顯示可以的部位（若患者是彌漫性疾病，則選擇左上頁(yè)或右中葉舌段），支氣管鏡頂端嵌在目標(biāo)支氣管段之后，通過支氣管鏡注入20～30 mL 的生理鹽水之后再用支氣管鏡引入灌洗液收集裝置，回收20 mL 以上的灌洗液經(jīng)離心沉淀后取最底層離心液立即送檢痰找抗菌桿菌涂片，PCR 檢查（TB-DNA）、細(xì)菌培養(yǎng)。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

BALF 涂片找抗酸染色桿菌按照中國(guó)防癆協(xié)會(huì)“結(jié)核病診斷細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)規(guī)程”操作，用萋一尼氏抗酸染色法，油鏡下觀察，1～9 條抗酸染色桿菌/100 視野為陽(yáng)性[2]。培養(yǎng)使用美國(guó)貝克曼全自動(dòng)微生物鑒定儀（MicroScan Walk A way plus 96/40）進(jìn)行臨床標(biāo)本的分離培養(yǎng)。實(shí)時(shí)熒光PCR 檢測(cè)使用美國(guó)ABI 公司ABIPrism7500 儀進(jìn)行熒光定量PCR 檢測(cè)BALF 結(jié)核分枝桿菌DNA。

1.4 觀察指標(biāo)

觀察實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的BALF 涂片找抗酸染色桿菌的陽(yáng)性數(shù)量以及細(xì)菌培養(yǎng)的陽(yáng)性數(shù)量。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

研究數(shù)據(jù)的處理由軟件SPSS 20.0 執(zhí)行，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，計(jì)數(shù)資料用率（%）表示，采用t和χ2檢驗(yàn)，P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

實(shí)驗(yàn)組30 名患者分別進(jìn)行BALF 涂片找抗酸桿菌以及PCR 檢測(cè)、細(xì)菌培養(yǎng)。其中16 例涂片呈現(xiàn)陽(yáng)性，見抗酸桿菌并行PCR 檢測(cè)確診為結(jié)核抗酸桿菌。細(xì)菌培養(yǎng)中有10 例陽(yáng)性，其中鮑曼不動(dòng)桿菌有2 例，肺炎克雷伯菌有4 例，大腸埃希菌有2 例，銅綠假單胞菌2 例；對(duì)照組30 名患者中，7 例涂片陽(yáng)性，見抗酸桿菌并行PCR 檢測(cè)確診結(jié)果為結(jié)核抗酸桿菌。細(xì)菌培養(yǎng)3 例陽(yáng)性，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表1。

表1 比較實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的涂片及PRC 檢測(cè)[n(%)]

3 討論

肺部感染作為呼吸內(nèi)科門診以及住院中最常見的疾病之一，已經(jīng)嚴(yán)重威脅到了人們的健康。這種疾病的發(fā)病沒有特異性群體，無(wú)基礎(chǔ)疾病的健康人或者合并有基礎(chǔ)疾病的患者都可能感染肺部疾病。往往治療非常困難的情況出現(xiàn)在那種有基礎(chǔ)疾病，合并出現(xiàn)肺部感染以及自身免疫力低下的一些危重的患者。當(dāng)臨床醫(yī)師不能準(zhǔn)確判斷出肺部感染性疾病病因時(shí)，則不能準(zhǔn)確診斷，一般的抗生素則沒有針對(duì)性，對(duì)治療的效果則變得不理想。若耽誤了治療，嚴(yán)重者則會(huì)出現(xiàn)各種并發(fā)癥，最后甚至威脅到患者的生命安全。

BAL 被稱作為“液體活檢”，它的運(yùn)作原理是利用支氣管鏡向患者的支氣管肺泡內(nèi)注入生理鹽水并進(jìn)行抽吸，收集肺泡表面的液體來對(duì)患者進(jìn)行診斷，對(duì)一些可溶物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)來達(dá)到臨床醫(yī)師準(zhǔn)確診斷的技術(shù)[3]。肺部感染性疾病變多種多樣，其中主要有細(xì)菌性、真菌性、病毒性以及其他病原菌[4]。在臨床上最常見的則是細(xì)菌性和結(jié)核性，由于很多患者在依據(jù)感染肺部疾病經(jīng)驗(yàn)性進(jìn)行抗感染治療時(shí)，其治療效果并不明顯，所以我們需要明確患者的病原學(xué)證據(jù)，根據(jù)不同的致病菌進(jìn)行針對(duì)治療。與傳統(tǒng)的痰培養(yǎng)及痰找抗酸桿菌，纖維支氣管鏡檢查可以很準(zhǔn)確的觀察到患者的病變部位，在肺部病變處留取支氣管肺泡灌洗液進(jìn)行送痰培養(yǎng)、抗菌桿菌及PRC 檢測(cè)[5]。相關(guān)研究表明，纖維支氣管鏡對(duì)肺部感染性疾病在檢查以及聯(lián)合檢查中對(duì)臨床醫(yī)師都有著重要的診斷價(jià)值。支氣管肺泡灌洗液直接從病灶中取出，這樣的方式可以避免患者的口腔以及咽部受到污染[6]。灌洗前需對(duì)患者進(jìn)行吸氧處理，時(shí)刻監(jiān)測(cè)著患者的血壓、心電圖等是否在檢查過程中出現(xiàn)異常，操作時(shí)應(yīng)該盡量保持溫柔并且在保障質(zhì)量的同時(shí)盡量縮短手術(shù)時(shí)間，減少纖維支氣管鏡在患者體內(nèi)停留的時(shí)間，避免患者的氣道發(fā)生損傷或出現(xiàn)其他的并發(fā)癥。可以采集患者深部的分泌物進(jìn)行藥敏實(shí)驗(yàn)和細(xì)菌培養(yǎng)，為不同患者選用合適的抗生素提供了有力的依據(jù)。BLAF 的病原菌培養(yǎng)診斷的準(zhǔn)確率明顯的高于痰，由于灌洗液量較大，回收較多，標(biāo)本來源于病灶部位，在培養(yǎng)過程中又進(jìn)行了離心處理，所以標(biāo)本中的抗酸桿菌的量比較多，對(duì)于一些沒有痰液的病人或者痰液陰性者，用BALF 檢測(cè)是一種很好的檢測(cè)途徑。此次臨床研究選取的是感染了肺部疾病并且治療效果不佳的患者進(jìn)行纖維支氣管鏡檢查并留取肺泡灌洗液送檢，涂片找抗酸桿菌以及PCR 檢測(cè)、細(xì)菌培養(yǎng)的陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

綜上所述，支氣管肺泡灌洗液以及細(xì)菌培養(yǎng)對(duì)肺部感染性疾病的診斷有著重要的作用，對(duì)于一些治療后效果不明顯或診斷不明確的患者尤為重要，在臨床上有重要的價(jià)值，值得推廣此種方法。常規(guī)的痰液培養(yǎng)、痰找抗酸桿菌的檢查也有著重要的作用。有些患者的耐受性和依從性較差，承受不了侵入性的檢查操作，然而纖維支氣管就屬于侵入性檢查。所以支氣管肺泡灌洗液以及細(xì)菌培養(yǎng)不能完全替代傳統(tǒng)的痰培養(yǎng)，應(yīng)依據(jù)患者的個(gè)體差異而選擇合適的方法。