革蘭染色鏡檢在微生物標(biāo)本培養(yǎng)前涂片的臨床意義

馮佼 張曉瓊

【摘 要】目的：培養(yǎng)微生物標(biāo)本前，觀察涂片革蘭染色鏡檢的應(yīng)用價(jià)值。方法：選擇我院檢驗(yàn)科的120例微生物標(biāo)本進(jìn)行研究，先開(kāi)展標(biāo)本革蘭染色鏡檢，然后培養(yǎng)微生物標(biāo)本；對(duì)照組只開(kāi)展微生物標(biāo)本培養(yǎng)，比較兩組的微生物標(biāo)本結(jié)果。結(jié)果：研究組進(jìn)行涂片革蘭染色，結(jié)果表明陽(yáng)性標(biāo)本33例，陽(yáng)性率27.50%，對(duì)照組直接進(jìn)行微生物培養(yǎng)，陽(yáng)性標(biāo)本38例，陽(yáng)性率31.67%，組間差異顯著（P<0.05）。結(jié)論：進(jìn)行微生物培養(yǎng)前，先開(kāi)展革蘭染色鏡檢，可以避免假陽(yáng)性出現(xiàn)，提升培養(yǎng)水平，具有很好的檢驗(yàn)效果。

【關(guān)鍵詞】標(biāo)本培養(yǎng)；涂片革蘭染色鏡檢；微生物

對(duì)于傳染病，微生物培養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)果和藥敏結(jié)果已成為傳染病診斷和治療的重要參考。微生物培養(yǎng)結(jié)果對(duì)于藥物的選擇和治療都有直接影響，和患者能否取得很好的療效都有相關(guān)性。但是及時(shí)有效地篩選不合格樣品，避免產(chǎn)生污染，可以有效地減少資源浪費(fèi)和產(chǎn)生誤差。因此，本次研究對(duì)于微生物革蘭染色鏡檢結(jié)果進(jìn)行分析報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

對(duì)我院2020年1月至12月檢驗(yàn)科的120例微生物標(biāo)本進(jìn)行分析，全部樣本均采取無(wú)菌操作。其中，收集的痰液標(biāo)本有70例，尿液標(biāo)本30例，分泌物標(biāo)本20例。全部標(biāo)本分別采取培養(yǎng)前革蘭染色鏡檢和微生物標(biāo)本培養(yǎng)，設(shè)為研究組、對(duì)照組，兩組標(biāo)本的基本資料沒(méi)有顯著差異，可以進(jìn)行對(duì)比（P>0.05）。

1.2 檢驗(yàn)方法

涂片革蘭氏染色：用無(wú)菌棉拭子拭取標(biāo)本的痰液、分泌物和尿液樣本；尿液采集：將新鮮的尿液中位數(shù)樣本放入無(wú)菌離心管，低速（1500r / min）離心10 min～15min。沉淀后，選擇干凈的載玻片，在中間滴0.9%NaCl溶液，使用無(wú)菌棉簽選擇適量標(biāo)本，進(jìn)行混合后晾干處理。然后把標(biāo)本放在酒精燈上面固定，進(jìn)行革蘭氏染色和顯微鏡觀察。標(biāo)本培養(yǎng)鑒定：痰標(biāo)本在無(wú)菌環(huán)境下，在血平板、巧克力板上進(jìn)行接種，在血平板、麥康基平板上接種分泌物、尿液標(biāo)本。接種后，將標(biāo)本置于37℃，5.0%培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。24h～48 h后，觀察細(xì)菌菌落和首選病原菌、使用涂片、革蘭染色鏡檢菌落，使用梅里埃全自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀VITEK 2 Compact 進(jìn)行鑒定。

1.3 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

合格標(biāo)本及污染標(biāo)本的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)如下：合格標(biāo)準(zhǔn)：痰標(biāo)本膿性，血液陽(yáng)性，具有粘稠性，白細(xì)胞超過(guò)25個(gè)，鱗狀上皮細(xì)胞小于10個(gè)。某些樣本中白細(xì)胞數(shù)量低于25個(gè)，但使用低倍鏡能夠觀察到致病菌形態(tài)，要求實(shí)驗(yàn)人員馬上做好記錄，會(huì)上報(bào)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。對(duì)尿液標(biāo)本使用油鏡觀察，并計(jì)算10個(gè)平均值。如果高倍鏡中的細(xì)菌超出1個(gè)，說(shuō)明存在感染，需要將標(biāo)本送檢。還要使用顯微鏡觀察細(xì)菌類型，如果細(xì)菌種類超過(guò)3個(gè)，說(shuō)明標(biāo)本出現(xiàn)污染，要求實(shí)驗(yàn)人員留取標(biāo)本觀察。對(duì)于分泌物標(biāo)本，采集標(biāo)本要無(wú)菌操作，如果觀察為鱗狀上皮細(xì)胞，說(shuō)明采集標(biāo)本的時(shí)候存在污染，或鏡檢觀察到2種～3種細(xì)菌，也說(shuō)明標(biāo)本被污染。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

研究組在開(kāi)展微生物培養(yǎng)前進(jìn)行涂片革蘭染色，結(jié)果表明：陽(yáng)性標(biāo)本33例，陽(yáng)性率27.50%，對(duì)照組直接進(jìn)行微生物培養(yǎng)，陽(yáng)性標(biāo)本38例，陽(yáng)性率為31.67%，組間差異顯著（P<0.05）。

3 討論

目前，臨床普遍選擇革蘭氏染色法用于微生物標(biāo)本的檢測(cè)，然后用顯微鏡觀察微生物標(biāo)本，觀察形態(tài)和染色特性可以用來(lái)確定樣品是否含有病原體，從而進(jìn)行臨床識(shí)別和確定病原體，具有重要的價(jià)值[1]。由于醫(yī)院人口多，細(xì)菌增多，在留樣過(guò)程中可能會(huì)出現(xiàn)樣品污染，如不及時(shí)取樣，可能會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果[2]。對(duì)于一個(gè)培養(yǎng)前的微生物標(biāo)本涂片，革蘭氏染色鏡檢能及時(shí)發(fā)現(xiàn)標(biāo)本中的異常，特別是當(dāng)不合格標(biāo)本被提前選擇時(shí)，提高了微生物標(biāo)本的培養(yǎng)質(zhì)量，減少了患者的經(jīng)濟(jì)損失，有效減少了標(biāo)本的浪費(fèi)[3]。

本次研究結(jié)果表明，研究組：陽(yáng)性標(biāo)本33例，陽(yáng)性率為27.50%，對(duì)照組：陽(yáng)性標(biāo)本38例，陽(yáng)性率為31.67%，組間差異顯著（P<0.05）。需要在微生物培養(yǎng)前做好革蘭染色鏡檢，直接關(guān)系到培養(yǎng)結(jié)果準(zhǔn)確性，從而為準(zhǔn)確用藥提供參考。組間差異明顯說(shuō)明，先進(jìn)行革蘭染色鏡檢然后再進(jìn)行培養(yǎng)，可以降低微生物陽(yáng)性率，這和目前的研究結(jié)果是相同的[4，5]。

綜上分析，微生物標(biāo)本培養(yǎng)前先進(jìn)行涂片鏡檢，可以提高培養(yǎng)質(zhì)量，避免假陽(yáng)性的出現(xiàn)，值得進(jìn)行推廣。

參考文獻(xiàn)

[1] 黃芳，林佩玲，蔡媛媛，等.創(chuàng)面分泌物培養(yǎng)前涂片鏡檢的臨床意義[J].臨床軍醫(yī)雜志，2015，43（4）：406-408.

[2] 張國(guó)英，夏學(xué)紅.微生物標(biāo)本培養(yǎng)前涂片革蘭染色鏡檢的臨床意義[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2015，30（3）：258-261.

[3] 陳險(xiǎn)峰，周庭銀.痰標(biāo)本涂片革蘭染色鏡檢的臨床意義[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2013，28（6）：499-502.

[4] XU JL，CHEN X B，XIAO X H，et al.Correlation between direct smear of positive blood culture and the results of Gram staining microscopy [J].Chinese Journal of Health Laboratory Technology，2015，25（13）：2120-2122.

[5] NING D.The clinical significance of Gram staining microscopic examination of microorganism specimens before culture[J].Journal of Clinical Laboratory Medicine，2018，7（1）：160-161.