特發性少弱精子癥Th1/Th2細胞因子與自身抗體表達水平及臨床意義

王海旭 張建芳 李硯

(空軍軍醫大學西京醫院婦產科生殖中心,陜西 西安 710032)

根據世界衛生組織既有定義，男性不育癥是指育齡夫婦雙方在未采取任何避孕措施下，婚后同居后1年以上，由男方原因導致女性不孕的患者[1]。相關流行病學調查顯示[2]，全球范圍內約有20%的夫妻存在生育困難的問題，其中男性不育癥占比50%左右。特發性少弱精子癥是男性不育癥的常見類型，由于該病發病機制尚未明確，臨床主要采用經驗性治療，缺乏有效的治療手段，因此探討該病的致病因素具有重要意義[3-4]。有研究[5]發現，免疫機制在男性不育癥中發揮著重要作用，輔助T細胞可分化出Th1、Th2兩種亞型，正常情況下，機體Th1/Th2處于動態平衡，一旦兩者失衡，則會出現免疫功能紊亂。因此本研究主要探討特發性少弱精子癥Th1/Th2細胞因子與自身抗體的表達水平及臨床意義，具體報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 于2018年1月至2020年1月期間，選取于我院就診的特發性少弱精子癥患者150例為觀察組，入選標準：(1)符合《人類精液檢查與處理實驗室手冊(第5版)診斷標準》[6]；(2)睪丸體積正常，無精索靜脈曲張等干擾睪丸生精功能的疾病；(3)黃體生成素、卵泡雌激素等生殖激素均在正常范圍內；(4)精子濃度<15×106/mL且存活率<40%，經巴氏染色正常形態精子百分率≥4%；(5)近6個月未使用生精藥物治療，生活作息規律。排除標準：(1)明確其他因素所致不育者；(2)合并嚴重免疫、內分泌系統疾病者；(3)畸形精子癥；(4)極重度、少、弱精子癥；(5)合并生殖系統感染；(6)使用激素、化療等藥物治療者。根據精子濃度分為，輕、中度組(n=95)：精子濃度(5～15)×106/mL；重度組(n=55)：精子濃度(1～5)×106/mL。另選取同期于我院就診的精液檢測正常的男性80名為健康對照組。本研究已通過我院醫學倫理委員會批準。

1.2方法 收集所有受檢者精液標本，約2～6 mL，37℃水浴箱孵育至精液液化，采用彩色精子質量檢測系統分析精液。將精液離心后，直接取上清檢測不同細胞因子水平，Th1細胞因子主要包括白介素-2(IL-2)、腫瘤壞死因子-ɑ(TNF-ɑ)、干擾素-γ(IFN-γ)；Th2細胞因子包括白介素-4(IL-4)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)。采用酶聯免疫吸附法檢測抗人絨毛促性腺素抗體(AhCGAb)、抗精子抗體(AsAb)，操作嚴格遵循試劑盒說明書進行。

2 結 果

2.1三組一般資料比較 三組年齡比較差異無統計學意義(P>0.05)。三組精子濃度、精子總數比較差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 三組一般資料比較

2.2三組細胞因子水平比較 三組IL-2、TNF-ɑ、IFN-γ、IL-4、IL-6、IL-10水平比較差異有統計學意義(P<0.05)，重度組上述細胞因子水平明顯高于輕中度組，輕中度上述細胞因子水平明顯高于對照組(P<0.05)。見表2。

表2 三組細胞因子水平比較

2.3三組自身抗體陽性表達率比較 三組組間AhCGAb、AsAb抗體陽性表達率比較，差異無顯著性(P>0.05)。重度組AhCGAb、AsAb抗體陽性表達率明顯高于輕中度組，輕中度組AhCGAb、AsAb抗體陽性表達率明顯高于對照組(P<0.05)。見表3。

表3 三組自身抗體陽性表達率比較[n(%)]

3 討 論

特發性少弱精子癥患者臨床主要表現為少精、弱精或畸形精子等，多項研究認為該病的發生與長期應激環境、內分泌紊亂、基因缺陷等多種因素有關[7-8]，但具體發病機制尚不明確，臨床以經驗性治療為主，總體療效不甚理想，因此分析特發性少弱精子癥的致病因素具有重要意義。

既往研究[9]發現，某些病理狀態能夠針對生精細胞的自身免疫反應，進而誘導自身免疫性睪丸炎和附睪炎，損傷精子發生，進一步產生抗精子抗體，提示免疫機制在特發性少弱精子癥的發生、發展中發揮著重要作用。P.P?ll?nen等[10]學者指出，Sertoli和Leydig細胞可分泌轉化生長因子β,而轉化生長因子β，可抑制睪丸內移植物的免疫排斥，同時分泌出轉化生長因子β同源物，抑制睪丸免疫應答，不利于維持睪丸免疫豁免環境。目前特發性少弱精子癥與機體免疫應答的相關性研究較少。輔助性T細胞可分化出Th1、Th2兩種亞型[11-12]。其中Th1細胞主要分泌IL-2、TNF-ɑ、IFN-γ等細胞因子，主要參與細胞免疫應答過程，IL-2是機體內功能最為強大有效的T細胞生長因子，可促進幾乎所有亞型的T細胞增殖、活化[13]；IFN-γ與IL-2作用相似，可促進多種細胞表達生物相容復合物體抗原I類和II類分子發揮抑制病毒復制和抑制Th2細胞分化增殖的作用[14]。而Th2細胞以分泌IL-4、IL-6、IL-10為主，其中IL-6在機體免疫調節和抵御外來侵襲中發揮著重要作用。IL-4對于B細胞、T細胞都有免疫調節作用；IL-10是典型的抗炎因子，可通過抑制機體固有免疫和適應性免疫功能進而降低機體免疫反應[15]。有研究[16]發現，機體病理狀態下，高水平IL-6可直接誘導生精細胞的凋亡，而IL-10會通過抑制實驗性自身免疫性睪丸炎進而破壞睪丸組織結構與精子發生。既往研究表明[17]，機體在正常情況，Th1/Th2處于動態平衡，兩者失衡則容易發生免疫功能紊亂。本研究中，重度組、輕中度組精子濃度、精子總數明顯低于對照組，重度組IL-2、TNF-ɑ、IFN-γ、IL-4、IL-6、IL-10明顯高于輕中度組和對照組，提示Th1/Th2細胞因子水平與特發性少弱精子癥的發生發展存在相關性，分析原因可能是過度增加Th1/Th2細胞因子可能會引發慢性隱匿性睪丸炎癥，當病情進展時，炎性多肽會通過刺激內皮細胞進而分泌更多的Th1/Th2細胞因子，大量的白細胞可能會透過受損的血-睪屏障，損害睪丸微環境，進而損害精子功能和精子數量，造成精液質量的下降[18]。

本研究結果顯示，重度組AhCGAb、AsAb抗體陽性表達率明顯高于輕中度組和對照組，提示自身抗體水平與特發性少弱精子癥的發生發展存在相關性，有研究[19]發現，免疫抗體AsAb與多項不育癥關系密切，當免疫抗體AsAb能力較強的狀態下，機體排斥作用增強，影響精子前向運動，進而干擾精子代謝和獲能，是影響患者不育的重要原因。

綜上所述，Th1/Th2細胞因子與自身抗體表達水平與特發性少弱精子癥的發生發展具有相關性，是影響男性不育的重要因素，但本研究納入樣本量較少，具體機制有待進一步探討。