2019—2020年某院血培養(yǎng)病原菌分布及耐藥性分析

張莉莉，王妍妍，朱輝，趙永新

(新鄉(xiāng)醫(yī)學院第三附屬醫(yī)院 檢驗科，河南 新鄉(xiāng) 453003)

血流感染是全身感染性疾病，指細菌、真菌等病原微生物入侵血流所致的一種全身感染性疾病。全球每年平均發(fā)生約3 100萬例血流感染[1]，我國每年約發(fā)生486萬例血流感染[2]。血培養(yǎng)是對血流感染進行診斷的最重要的病原學方法[3]。臨床及時送檢血培養(yǎng)，及早發(fā)現血流感染接受適當抗感染治療，不僅可以降低病死率，還可以縮短患者的住院時間，節(jié)省住院成本。本研究旨在分析新鄉(xiāng)醫(yī)學院第三附屬醫(yī)院近2 a內血培養(yǎng)陽性病原菌分布及耐藥情況，為臨床合理用藥提供理論依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2019年、2020年臨床送檢的血培養(yǎng)標本5 348套，成人每套包括1瓶需氧瓶和1瓶厭氧瓶，兒童瓶1瓶為1套。如需氧、厭氧同時報陽且鑒定為同一病原菌的只計算1例陽性標本，共分離408株病原菌。

1.2 試劑和儀器全自動血培養(yǎng)儀Bact/ALERT 3D60及其配套培養(yǎng)瓶購自法國生物梅里埃公司，自動微生物鑒定/藥敏分析儀PHOENIX100購自美國BD公司。M-H平板、血平板、嗜血型巧克力平板、麥康凱平板均購自鄭州博賽生物技術公司。所需藥敏紙片均為英國OXOD公司產品。質控菌株大腸埃希菌 (ATCC25922)、銅綠假單胞菌(ATCC27853)、金黃色葡萄球菌 (ATCC25923)、金黃色葡萄球菌(ATCC29213)及糞腸球菌(ATCC29212)均購自國家衛(wèi)計委臨床檢驗中心。

1.3 研究方法

1.3.1臨床標本采集 臨床根據血培養(yǎng)采集指征嚴格遵循無菌操作技術，成人采集8～10 mL，兒童采集3～5 mL注入血瓶，混勻后及時送檢。

1.3.2細菌培養(yǎng)鑒定與藥物敏感試驗 血培養(yǎng)瓶放入Bact/ ALERT 3D60全自動血培養(yǎng)儀培養(yǎng)，血瓶報陽后取出進行涂片革蘭染色觀察并報臨床危急值，然后接種至血平板、巧克力平板、麥康凱平板上。采用美國BD公司 PHOENIX100自動微生物鑒定/藥敏分析儀對分離的病原菌進行微生物鑒定及藥敏試驗。

1.4 統(tǒng)計學方法所有數據均來自WHONET 5.6 軟件。

2 結果

2.1 送檢血培養(yǎng)前5位科室及陽性率兒科送檢血培養(yǎng)最多，但陽性率較低僅為4.4%，其次為呼吸內科、重癥醫(yī)學科、神經外科、新生兒科，其中重癥醫(yī)學科的陽性率最高為18.8%。見表1。

表1 不同科室送檢血培養(yǎng)標本量及陽性率

2.2 主要病原菌及其構成比分析全院2 a內共送血培養(yǎng)5 348套，報陽408套，陽性率為7.6%。其中革蘭陽性球菌181株，陰性桿菌222株，真菌5株。分離的病原菌前5位依次是大腸埃希菌占比24.3%、凝固酶陰性葡萄球菌19.6%、肺炎克雷伯菌14.0%、金黃色葡萄球菌9.3%、鮑曼不動桿菌3.4%。見表2。

表2 血培養(yǎng)陽性標本病原菌分布

2.3 常見病原菌對不同種類抗菌藥物的耐藥性分析

2.3.1常見革蘭陰性桿菌耐藥情況 大腸埃希菌對氨芐西林、哌拉西林耐藥率較高，分別為81.8%、84.8%，對頭孢他啶、阿莫西林/克拉維酸、哌拉西林/他唑巴坦耐藥率低，未發(fā)現耐碳青霉烯類抗菌藥物耐藥菌株；肺炎克雷伯菌對氨芐西林/舒巴坦耐藥率高達94.7%，但是對頭孢類抗菌藥物、阿莫西林/克拉維酸、哌拉西林/他唑巴坦及喹諾酮類耐藥率低，對碳青霉烯類抗菌藥物耐藥率為7.0%；非發(fā)酵菌細菌鮑曼不動桿菌對頭孢類抗菌藥物率高，對碳青霉烯類抗菌藥物耐藥率為42.9%；銅綠假單胞菌對哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦耐藥率較高超過40.0%，但對阿米卡星、頭孢他啶、頭孢吡肟、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星耐藥率較低，對碳青霉烯類抗菌藥物耐藥率為15.4%。見表3。

表3 革蘭陰性桿菌對抗菌藥物耐藥率

2.3.2常見革蘭陽性球菌耐藥情況 凝固酶陰性葡萄球菌對青霉素、紅霉素具有較高的耐藥性分別為87.0%和84.4%，耐苯唑西林的凝固酶陰性葡萄球菌檢出率為70.1%，對萬古霉素、利奈唑胺的敏感性為100%；金黃色葡萄球菌同樣對青霉素和紅霉素具有較高的耐藥率分別是94.1%、79.4%，耐苯唑西林的金黃色葡萄球菌檢出率為41.2%，未發(fā)現耐萬古霉素、利奈唑胺的金黃色葡萄球菌。見表4。

表4 革蘭陽性球菌對抗菌藥物耐藥率

3 討論

近年來隨著侵襲性操作不斷的增加及廣譜抗生素、皮質激素的不合理應用，血流感染的發(fā)生率及死亡率呈現逐年上升趨勢[4]。目前血培養(yǎng)仍是診斷血流感染的金標準。新鄉(xiāng)醫(yī)學院第三附屬醫(yī)院2019—2020年共送檢血培養(yǎng)5 348套，送檢最多的科室為兒科，可能與兒科醫(yī)生重視血流感染有關，但陽性率不高僅4.4%；重癥醫(yī)學科陽性率最高18.8%，重癥醫(yī)學科患者病情嚴重，免疫功能差，自身免疫力低下，如機械通氣、中心靜脈插管、導尿管等侵襲性操作較多，病原菌可通過自身結構如莢膜、菌毛等形成生物膜黏附在醫(yī)療器械表面進入血流[5]。檢出病原菌中革蘭陰性桿菌高于革蘭陽性球菌，陰性菌位居前2位的分別是大腸埃細菌和肺炎克雷伯菌，陽性球菌檢出前兩位的是凝固酶陰性葡萄球菌和金黃色葡萄球菌，這與李軼等[6]研究報道一致。

對2 a間病原菌的耐藥數據分析后發(fā)現，腸桿菌科細菌大腸埃希菌對青霉素及頭孢類抗菌藥物表現較高的耐藥性，對喹諾酮類藥物的耐藥性超過50%，但是對酶抑制劑復合類藥物哌拉西林/他唑巴坦、阿莫西林/克拉維酸敏感性高。隨著碳青霉烯類抗菌藥物在臨床廣泛使用，碳青霉烯類抗菌藥物耐藥菌日益增多，未發(fā)現耐碳青霉烯類的大腸埃希菌菌株。肺炎克雷伯菌對氨芐西林/舒巴坦耐藥率高為45.6%，對碳青霉烯類抗生素的耐藥率為7.0%，較大腸埃希菌偏高。研究顯示，耐碳青霉烯類的肺炎克雷伯菌感染患者在同一病區(qū)時間≥1周是相互傳播的危險因素[7]。非發(fā)酵細菌檢出率偏低，但是耐藥情況與腸桿菌科細菌明顯不同。鮑曼不動桿菌對頭孢噻肟的耐藥率較高(92.9%)，并且對碳青霉烯類藥物具有較高的耐藥性(42.9%)，除去對部分藥物天然耐藥外，鮑曼不動桿菌對阿米卡星及喹諾酮類抗菌藥物耐藥率低。銅綠假單胞菌對哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦耐藥率略高(超過40%)，但對阿米卡星及喹諾酮類有較高的敏感性，這提示抗非發(fā)酵菌可以選擇阿米卡星、環(huán)丙沙星以及左氧氟沙星。

在檢出的陽性球菌中，凝固酶陰性葡萄球菌位居首位，MRCNS檢出率為70.1%，其作為一種條件致病菌，因其可產生黏質多糖附著于人體皮膚黏膜，操作不規(guī)范易導致污染，一定要結合臨床判斷是致病菌還是污染菌[8]。其次為金黃色葡萄球菌，其致病力相對確切，能產生多種毒素，甚至引起膿毒癥休克，MRSA檢出率為41.2%，與全國趨勢[9]一致。在該研究中發(fā)現，葡萄球菌對青霉素、紅霉素具有較高的耐藥性，但對利福平、環(huán)丙沙星、慶大霉素較敏感，可作為抗葡萄球菌血流感染的選擇。本研究未發(fā)現耐萬古霉素、利奈唑胺的葡萄球菌。

本研究意義在于總結新鄉(xiāng)醫(yī)學院第三附屬醫(yī)院血培養(yǎng)陽性常見病原菌的分布及耐藥情況，通過研究發(fā)現不同種類病原菌耐藥差異很大，多重耐藥菌株檢出較多。本研究不僅可以指導臨床掌握常見病原菌耐藥規(guī)律，還可以為臨床及早合理選擇抗菌藥物提供理論依據，從而改善血流感染患者預后。