血清人附睪蛋白4、糖類抗原724、糖類抗原125和羅馬指數在卵巢癌風險評估中的應用分析

吳秋花 蔡云祥

據估計，2018年全球有29萬卵巢癌新病例和18.4萬卵巢癌相關死亡病例［1］，晚期患者的5年生存率只有20%～40%，卵巢癌的有效篩查與盡早發現可影響疾病預后，高靈敏度及高特異性的診斷工具必不可少［2］。血清CA125檢測是卵巢癌篩查中最常用的方法［3］，但CA125水平受各種生理因素及子宮內膜異位癥等良性腫瘤的影響［4］。研究發現，HE4在卵巢癌組織中過度表達［5］，CA724水平在各種卵巢黏液性癌中異常升高［6］。近年來，一項國外多中心研究采用CAl25和HE4的檢測值建立卵巢癌風險預測模型（ROMA），可用于預測絕經前后的卵巢癌風險。CA724鑒別診斷卵巢癌的敏感性雖低于CA125，但不受月經周期或妊娠的影響［7］。本研究旨在評估CA125、HE4和CA724的臨床有用性，以及羅馬（ROMA）指數對卵巢癌的鑒別診斷價值。

1 對象與方法

1.1 研究對象 收集2017年1月至2018年9月于本院住院并擬行手術治療的盆腔腫物患者血清樣本64例，根據術后石蠟切片病理結果分為卵巢癌組（31例）和卵巢良性腫瘤組（33例）。其中，卵巢良性腫瘤組包括子宮肌瘤8例、卵巢囊腫6例、成熟型囊性畸胎瘤4例、未明確分類良性腫瘤15例，患者年齡21～73歲，平均41歲；卵巢癌組患者年齡24～71歲，平均52歲。另收集同期于本院健康體檢女性的血清樣本40例作為對照，健康女性的年齡為18～80歲，平均48歲，體檢時不在月經期，無心、肝、肺、胃等重要臟器的疾患，肝、腎功能正常，無腫瘤家族史及痛經史。絕經標準：年齡≥60歲或年齡<60歲，自然閉經≥12個月且FSH、雌激素水平處于絕經期范圍內。

1.2 研究方法 （1）標本采集：采集所有研究對象空腹靜脈血5 mL，血液樣本置于血清分離管中，送至實驗室后30 min離心，-70 ℃下儲存備用。（2）血清CA125、HE4和CA724水平檢測：使用羅氏電化學發光免疫分析儀（Cobas E602分析儀）及其配套試劑，嚴格按照儀器和試劑的說明書及項目標準操作規程進行檢測。CA125的測量范圍為0.6～5000 IU/mL，HE4的測量范圍為15～1500 pmoL/L，CA724的測量范圍為0.2～300 IU/mL。（3）ROMA指數計算：使用羅氏電化學發光免疫分析儀自帶軟件，根據CA125和HE4的分析結果，計算絕經前和絕經后患者的ROMA值。ROMA值（%）=exp（PI）/［1+exp（PI）］×100%，其中PI計算如下：①絕經前PI=-12.0+2.38×LN（HE4）+0.0626×LN（CA125）；②絕經后PI=-8.09+1.04×LN（HE4）+0.732×LN（CA125）。

1.3 觀察指標 （1）根據說明書建議，CA125的正常參考值為<35 U/mL，HE4的正常參考值為（絕經前）<92.1 pmoL/L、（絕經后）<121 pmoL/L，CA724≤6.9 IU/mL。（2）根據軟件說明書ROMA指數（絕經前）參考值<11.4%，ROMA指數（絕經后）值<29.9%。

1.4 統計學方法 采用SPSS19.0統計軟件。計量資料不符合正態分布，以［M（P25，P75）］表示，多組比較采用Kruskal-Wallis H檢驗，兩組之間比較采用Dunn-Bonferroni檢驗；計數資料以［n（%）］表示，采用χ2檢驗和RXC表χ2檢驗，靈敏度、特異性、陽性預測值以及陰性預測值采用配對χ2檢驗；以病理診斷為金標準繪制ROC曲線。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組的血清學指標及ROMA指數比較 三組的各項指標比較，差異均有統計學意義（P<0.05）；組間兩兩比較，卵巢癌組的各項指標高于其他兩組，差異均有統計學意義（P<0.05）。見表1和圖1。

表1 三組的血清學指標及ROMA指數比較［M（P25，P75）］

圖1 各項血清學指標及ROMA指數組間比較

2.2 血清CA125、HE4、CA724與ROMA指數診斷一致性比較 CA125的檢驗結果與ROMA指數的一致性比較，差異無統計學意義（P>0.05）；CA724和HE4與ROMA指數在檢驗結果一致性上比較，差異均有統計學意義（P<0.05）。見表2。

表2 血清CA125、HE4、CA724與ROMA指數診斷一致性比較

2.3 血清CA125、HE4、CA724及ROMA指數鑒別診斷卵巢癌的應用價值 CA724和HE4的靈敏度最低，均為41.94%；ROMA指數+CA724+CA125和ROMA指數+CA724+CA125+HE4的靈敏度最高，均為87.10%；兩者之間差異有統計學意義（χ2=47.621，P<0.05）。ROMA指數+CA724+CA125和ROMA指數+CA724+CA125+HE4的特異性最低，均為82.19%；HE4的特異性最高（100%）；兩者之間差異有統計學意義（χ2=36.582，P<0.05）。各指標的陽性預測值和陰性預測值比較，差異均無統計學意義（χ2=12.546/22.337，P>0.05）。見表3。

表3 血清CA125、HE4、CA724及ROMA指數鑒別診斷卵巢癌的應用分析［n（%）］

2.4 四項指標鑒別診斷卵巢癌的ROC曲線評價 四項指標的最佳截斷值分別為：ROMA=11.385%，CA125=23.4 IU/mL，CA724=8.65 IU/mL，HE4=58.065 pmoL/L。曲線下面積最大的指標組合是，ROMA指數+CA125（AUC=0.951，95%CI：0.908～0.995），ROMA指數+CA125+HE4（AUC=0.951，95%CI：0.907～0.994），其所對應的靈敏度和特異性分別為97%、83.1%。曲線下面積最小的是，CA724（AUC=0.719，95%CI：0.611～0.826），靈敏度和特異性分別為36.4%、97.2%。見表4和圖2。

表4 基于ROC曲線四項指標最佳截斷值鑒別診斷卵巢癌的應用分析

圖2 各指標單項及聯合檢測的ROC曲線

3 討論

卵巢癌作為婦科惡性腫瘤的一種，在我國的發病率呈逐年上升的趨勢，對女性健康構成了重大威脅，已引起婦科及檢驗領域專家的廣泛關注［8］。由于缺乏有效的篩查手段，70%～75%的患者確診時已處于晚期［9］。血清腫瘤標志物檢測是目前臨床上卵巢癌早期篩查、輔助診斷、病情監測和判斷預后的主要技術手段［10］。受限于某一種腫瘤可能表達多個血清腫瘤標志物，或一個腫瘤標志物可出現于多種腫瘤疾病中，導致單個血清腫瘤標志物用于腫瘤篩查時的靈敏度和特異性降低，因此需要聯合多個指標進行檢測以提高篩查的靈敏度和特異性。

本研究對血清CA125、CA724、HE4及ROMA指數四項指標單項及聯合檢測在卵巢癌鑒別診斷的應用價值進行研究，發現四個指標在卵巢癌中的表達水平高于卵巢良性腫瘤組和健康女性對照組，而卵巢良性腫瘤患者和健康女性中此四項指標的表達水平無明顯差異（P>0.05），間接說明血清CA125、CA724、HE4及ROMA指數用于卵巢癌的鑒別診斷存在理論價值。比較分析四項指標鑒別診斷卵巢癌的效能，差異均有統計學意義（P<0.05）。其中，血清CA125診斷卵巢癌的靈敏度最高（77.42%），特異性最低（41.94%），而HE4的特異性最高（100%），靈敏度最低（41.94），與CA724的靈敏度相近，說明采用單一血清腫瘤標志CA125或CA724或HE4診斷卵巢癌均存在不足。另外，可能是由于本研究的陽性例數較少，致使各指標的陽性預測值和陰性預測值比較無明顯差異（P>0.05）。而采用聯合指標評價可有效提高診斷的靈敏度和特異性，其中ROMA指數+CA724+CA125的診斷靈敏度高達87.10%，CA724+HE4的診斷特異性高達97.26%，充分說明臨床鑒別診斷卵巢癌過程中聯合檢測具有必要性和實用性。

實驗室血清學指標的正常參考范圍通常依據試劑說明書制定，而臨床醫生以此范圍診斷卵巢癌的發生常存在誤區，本研究進一步繪制ROC曲線，研究表明四項指標的最佳截斷值分別為：ROMA=11.385%（由于絕經后的樣本少，所以在此進行區分），CA125=23.4 IU/mL，CA724=8.65 IU/mL，HE4=58.065 pmoL/L；其中CA125的靈敏度最高（90.9%），CA724的特異性最高（97.2%）。由此可見，選擇合適的最佳截斷值對于卵巢癌的鑒別診斷同樣至關重要。另外，還發現曲線下面積最大的是ROMA指數+CA125，ROMA指數+CA125+HE4；曲線下面積最小的是CA724。說明卵巢癌診斷中ROMA指數聯合CA125或CA125聯合HE4均具有較高的應用價值，考慮到ROMA指數是根據CA125和HE4的結果計算所得，因此建議臨床診斷時三者聯合使用。CA724的聯合檢測效能不如另外三項，但可用于鑒別某些患者腫瘤的良惡性和卵巢子宮內膜異位癥［11］，可能是由于本文的病例選擇存在局限性，未對卵巢癌的組織來源進行區分，導致CA724的診斷效能下降，有待進一步的研究與論證。