元寶楓油βCD包合物的制備工藝及質量評價研究

吳麗君 喬天蘭 黃鑫康 馬遠濤

摘?要：目的：本研究優選元寶楓油β環糊精（βCD）包合物的包合方法，為元寶楓油的開發利用提供參考依據。方法：分別采用單因素考察和正交實驗法，以元寶楓油和βCD投料比、包合時間、包合溫度等為考察因素，以制劑外觀、包封率、神經酸含量為評價指標，優選元寶楓油βCD包合物的最佳包合工藝。結果：元寶楓油βCD包合物的最優包合條件：元寶楓油：βCD=1∶8，包合溫度50℃，包合時間80min。優選的最佳元寶楓油βCD包合物包封率均在70%以上，每1g包合物中含神經酸1.60mg左右。經紫外可見分光光譜法驗證、顯微成像觀察，制劑外觀形態符合要求。結論：元寶楓油β環糊精（βCD）包合物的包合工藝設計合理、制劑質量穩定，后期可開發元寶楓油βCD包合物的口服、外用制劑，為臨床應用提供新制劑。

關鍵詞：元寶楓油;βCD包合物;正交實驗;氣相色譜法;神經酸

元寶楓油源自槭樹科槭屬（Acer）植物元寶楓[1]（Acer?truncatumBge）干燥種仁，2011年3月被原衛生部批準作為新資源食品[2，3]。元寶楓油中不飽和脂肪酸含量90%以上，亞油酸含量約37%，其中神經酸含量約5%[47]。β環糊精包合物（βCylodextrin?inclusion）是將藥物包于β環糊精大環形的分子空穴中形成分子包合物，可增加藥物的溶解度、穩定性，掩蓋不良氣味，提高生物利用度。因此，本論文研究制備元寶楓油β環糊精包合物，并對其進行質量評價，發揮神經酸促進受損神經組織修復和再生，提高腦神經的活躍程度，防止腦神經衰老的作用[37]。

1?實驗部分

1.1?試藥與儀器

氣相色譜儀：7890AGC;馬爾文激光粒度儀：ZEN3600;倒置熒光顯微鏡：I×73;紫外可見分光光度計：Cary60;臺式高速離心機：TG1650WS;數控超聲波清洗器：KH7200DB;萬分之一電子天平：ALC210.4。

元寶楓油;神經酸標準品：批號D2450010，純度≥98%;β環糊精（βCD）;無水乙醇、正己烷、丙二醇、甲醇：分析純;濃硫酸;純化水等。

1.2?元寶楓油βCD包合物的制備

稱取一定量βCD，按1∶20（g/mL）比例加入純化水，于恒溫水浴鍋中加熱、攪拌使溶解，制備βCD溶液。將其轉移至超聲儀中，逐滴加入0.5mL元寶楓油，設定超聲溫度、時間、功率，進行超聲。待冷卻后放入置于冰箱冷藏24h，減壓抽濾得白色粉末，烘箱干燥60℃，5h，粉碎，即得元寶楓油βCD包合物。

1.3?含量測定方法

元寶楓油中神經酸藥理活性最強，因此采用氣相色譜法建立元寶楓包合物中神經酸的含量測定方法[8]。色譜柱：DB5（30m×0.25mm×0.25μm），載氣：高純氮氣，進樣器溫度：270℃，氫火焰離子化檢測器（FID）檢測器溫度：320℃，分流比：20∶1，程序升溫：初始溫度為200℃，以2℃/min升至230℃，再以8℃/min升至終溫270℃，保持10min。神經酸標準曲線方程為y=29.1x0.18（r=0.9998），精密度、重復性和穩定性實驗考察結果RSD<2%，加樣回收率95%～105%，RSD<3%，符合要求。

1.4?元寶楓油包合物的質量評價

建立包合物質量評價體系：顯微成像分析觀察元寶楓油包合物的外觀形態;紫外分光光度分析包合情況;氣相色譜法測定元寶楓包合物中神經酸的含量;馬爾文激光粒度儀測定粒徑及Zeta電位;高速離心法考察物理穩定性。

2?結果與討論

2.1?制備工藝的優化

2.1.1?單因素考察實驗

取元寶楓油0.5mL，預設βCD與元寶楓油的配比為8∶1，包合溫度50℃，包合時間60min，超聲功率80W為包合工藝流程中相應的常規量，以元寶楓油與βCD的配比（4∶1、6∶1、8∶1、10∶1、12∶1）、包合溫度（30℃、40℃、50℃、60℃、70℃）、包合時間（20min、40min、60min、80min、100min）及超聲功率（40W、60W、80W、100W、120W）4個單因素變量替換工藝流程中相應的常規量，按照1.2.項下元寶楓油βCD包合物的制備方法制備包合物，并計算其包封率。

由圖1、2、3、4可知，βCD與元寶楓油的配比（g/mL）、包合溫度、包合時間及超聲功率對包合物的包封率均具有一定影響，綜合考慮影響大小、βCD的性質及實驗條件，選用βCD與元寶楓油配比、包合溫度和包合時間為影響因素設計正交實驗，優選元寶楓油βCD包合物的制備工藝。

2.1.2?正交實驗優化元寶楓油包合工藝

以βCD與元寶楓油配比、包合溫度、包合時間為影響因素，以包封率為考察指標設計正交實驗，實驗因素水平見表1，正交實驗結果見表2，方差分析結果見表3。

由表2、表3結果可知，5號包封率最高。βCD：元寶楓油配比對包封率影響顯著（p<0.05），由各因素F值大小可知，各因素影響作用的主次順序為A>B>C，即βCD：元寶楓油>包合溫度>包合時間。

綜上因素及包合物外觀分析，確定元寶楓油βCD包合物最佳包合工藝為A2B2C3，即βCD與元寶楓油配比為8∶1，包合溫度為50℃，包合時間為80min。

2.1.3?元寶楓油最優包合工藝參數的驗證實驗

為檢驗元寶楓油βCD包合物最佳包合工藝的可靠性，進行4組重復實驗。元寶楓油βCD包合物包封率均在70%以上，產率約為75%。采用氣相色譜法測定元寶楓油βCD包合物中神經酸含量，每1g元寶楓油βCD包合物含神經酸1.60mg。4組重復實驗包封率、得率及神經酸含量均與正交實驗最優結果一致，較為穩定。結果表明，正交實驗優化獲得的最佳工藝參數可靠有效。