一例豬血凝性腦脊髓炎實(shí)驗(yàn)室診斷與防治

李林

（山東省東營市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局山東東營 257091）

豬血凝性腦脊髓炎病毒是冠狀病毒屬的病毒成員，該種病毒主要感染幼齡階段的豬，臨床上主要以嘔吐、采食停止、便秘、身體逐漸消瘦、中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙為主要特征，因此又被稱為仔豬嘔吐消瘦病，在某些養(yǎng)殖場的發(fā)病率高達(dá)20%～100%，嚴(yán)重影響了生豬繁育，給養(yǎng)殖戶造成了大量的經(jīng)濟(jì)損失。上世紀(jì)50 年代末起，該類疾病在加拿大的安大略省首次暴發(fā)，隨后向著世界各地的生豬養(yǎng)殖主產(chǎn)區(qū)廣泛傳播流行。我國于上世紀(jì)80 年代中期在北京地區(qū)的種豬場首次暴發(fā)流行。自從該病在世界范圍內(nèi)暴發(fā)流行以來，科研工作者對該種病毒的實(shí)驗(yàn)室診斷方法進(jìn)行了有效的研究，并取得了突出的成效，給豬血凝性腦脊髓炎的診斷和防治工作帶來了極大的便利。

1 發(fā)病經(jīng)過

2018 年4 月13 日，某規(guī)模化養(yǎng)豬場養(yǎng)殖的2 周齡豬群出現(xiàn)集體癥狀，患病豬主要表現(xiàn)為停止采食，身體消瘦，生長發(fā)育不良，并表現(xiàn)出明顯的神經(jīng)癥狀。出現(xiàn)發(fā)病情況之后，養(yǎng)殖戶立即采取封鎖，隔離，衛(wèi)生消毒等措施，但病情沒有得到有效控制，并迅速向著整個(gè)豬群擴(kuò)散，表現(xiàn)出嚴(yán)重的嘔吐腹瀉，造成仔豬大量死亡。發(fā)病期間，養(yǎng)殖戶嘗試使用青霉素鏈霉素進(jìn)行治療，但并沒有抑制住疫情的進(jìn)一步擴(kuò)散。筆者和飼主溝通得知，因該養(yǎng)殖場豬群分群不合理，不同年齡的豬群混圈混養(yǎng)，衛(wèi)生消毒不規(guī)范，養(yǎng)殖密度較大，圈舍地面潮濕，糞便堆積嚴(yán)重，周邊養(yǎng)殖環(huán)境中也存在大量蚊蟲鼠蠅。雖然構(gòu)建了比較完善的免疫程序，但養(yǎng)殖戶在疫苗免疫接種時(shí)存在極大的隨意性。

2 流行特點(diǎn)

豬是血凝性腦脊髓炎病毒的易感群體，養(yǎng)殖場的患病豬和隱性感染豬是最主要的傳染源，病毒會(huì)通過豬的呼吸道分泌物或者消化道排泄物排出體外，污染周圍環(huán)境之后，直接或間接傳播整個(gè)種群。已知豬血凝性腦脊髓炎病毒可感染全年齡段和大部分品種的生豬，其中對1～3 周齡的仔豬造成的危害最為嚴(yán)重，成年豬感染該種病毒之后，大多呈現(xiàn)隱性發(fā)病，表現(xiàn)為亞臨床癥狀，成為該病在養(yǎng)殖場的主要傳染源，如果沒有進(jìn)行有效的病毒凈化處理，很容易造成同豬群的反復(fù)流行。血凝性腦脊髓炎病毒在豬群中傳播流行，主要是因?yàn)轲B(yǎng)殖戶的不科學(xué)引種行為，新引進(jìn)的豬群到達(dá)養(yǎng)殖場后，沒有進(jìn)行嚴(yán)格的隔離觀察就混群養(yǎng)殖，再加上養(yǎng)殖場缺乏針對性的免疫接種措施，造成了該病的大范圍流行傳播。通過對養(yǎng)殖主產(chǎn)區(qū)的血清學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，豬血凝性腦脊髓炎病毒的感染陽性率普遍較高，但臨床癥狀較少。

3 臨床癥狀

1～3 周齡的仔豬發(fā)生豬血凝性腦脊髓炎后，主要表現(xiàn)為采食欲望下降，昏睡嘔吐便秘，少數(shù)患病豬體溫升高，生長發(fā)育不良，經(jīng)常扎堆取暖，被毛逆向生長，打噴嚏，咳嗽，磨牙。發(fā)病1～3d 之后，大多數(shù)患病豬會(huì)表現(xiàn)出神經(jīng)癥狀，對外界刺激十分敏感，觸摸體表時(shí)會(huì)發(fā)出尖叫聲，共濟(jì)失調(diào)，呈現(xiàn)犬坐姿勢呼吸，后軀肢體麻痹，不能正常行走或者四肢滑動(dòng)成游泳狀，呼吸極度困難。部分患病豬在發(fā)病后期失明，眼球震顫，臨死前昏迷不醒，病死率可達(dá)到100%。耐過急性期的患病豬表現(xiàn)為生長發(fā)育不良，乃至成為僵豬。有的患病豬嘔吐癥狀不明顯，但會(huì)停止采食，出現(xiàn)便秘癥狀，飲水欲望增加，咽喉肌麻痹不能正常吞咽[1]，發(fā)病初期患病豬體溫升高到39℃，體重下降，身體逐漸消瘦，嚴(yán)重的在發(fā)病1～2 周后死亡，大多數(shù)患病豬在轉(zhuǎn)變成慢性發(fā)病過程中因?yàn)閲?yán)重饑餓、身體消耗或者繼發(fā)其他疾病死亡。

4 病理學(xué)變化

對該養(yǎng)殖場病死豬進(jìn)行解剖之后，進(jìn)行腦組織組織學(xué)檢查后發(fā)現(xiàn)大多病死豬存在非化膿性的腦炎變化[2]，個(gè)別病死豬還會(huì)出現(xiàn)輕微的卡他性鼻炎。大多數(shù)病死豬的腦血管周圍都有巨噬細(xì)胞增生，淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞浸潤，神經(jīng)細(xì)胞出現(xiàn)變性壞死，甚至呈現(xiàn)星芒狀。病變位置主要集中在腦間、腦橋、延腦和脊髓等部位。將腦部組織解剖之后，能夠發(fā)現(xiàn)腦積水液顯著增多，腦膜充血。胃腸道充滿了大量黃色液體類物質(zhì)。如圖1 所示。

圖1 病理變化解剖圖

5 實(shí)驗(yàn)室診斷

無菌環(huán)境下采集病死豬的淋巴結(jié)、腎臟組織、腦組織和脾臟組織，帶回實(shí)驗(yàn)室之后進(jìn)行染色鏡檢和細(xì)菌分離培養(yǎng)，病料及培養(yǎng)提取物中未檢測出常見致病菌株。進(jìn)一步將采集到的病灶充分粉碎研磨后，用10 倍生理鹽水稀釋放置在低溫高速離心機(jī)離心處理，30min 后取上清液作為代檢抗原進(jìn)行RT-PCR 擴(kuò)增試驗(yàn)，擴(kuò)增產(chǎn)物，經(jīng)1%的瓊脂糖凝膠電泳之后，放置在凝膠成像儀中觀察結(jié)果，擴(kuò)增出與目的片段大小一致的特異性條帶大小為476bp，由此可以證明病料當(dāng)中存在血凝性腦脊髓炎病毒。如圖2 所示。

圖2 RT-PCR 擴(kuò)增試驗(yàn)結(jié)果（其中M 為DLMaker2000，1 為對照組，2 淋巴組織，3 為腎臟組織，4 腦組織，5 脾臟組織，6 陽性對照組）

6 防治措施

目前該種疾病沒有特效藥物和有效的疫苗，但通過群防群控等疫病防控措施可有效降低危害。養(yǎng)殖場母豬多在出產(chǎn)前感染病毒，通過初乳抗體可以有效保護(hù)仔豬。對于新修建的養(yǎng)殖場或者未獲得母源抗體的仔豬，在暴發(fā)流行該種疾病期間可以通過注射超免血清或者通過收集母豬血清進(jìn)行肌肉注射，保證仔豬能夠獲得抗體保護(hù)。為了降低發(fā)病率，日常養(yǎng)殖過程中應(yīng)該做好豬舍的清潔和衛(wèi)生消毒工作，確保整個(gè)環(huán)境干燥整潔衛(wèi)生，避免因消毒不當(dāng)造成病毒傳播。同時(shí)，密切觀察豬群的生長情況，一旦出現(xiàn)疑似發(fā)病，應(yīng)立即實(shí)施隔離措施，防止感染仔豬數(shù)量進(jìn)一步擴(kuò)大。有條件的養(yǎng)殖場應(yīng)該定期采集豬群的血清進(jìn)行血清學(xué)檢測，對檢測隱性感染豬，應(yīng)立即單獨(dú)的隔離并進(jìn)行針對性的處理，防止疫情進(jìn)一步擴(kuò)散。

7 結(jié)語

綜上所述，豬血凝性腦脊髓炎是生豬養(yǎng)殖過程中一種常發(fā)病和高發(fā)病，發(fā)病過程較快，造成的死亡率相對較高，再加上現(xiàn)階段病毒性傳染性疾病沒有針對性藥物，防治難度較大。由于該種病毒疾病發(fā)生在仔豬群體當(dāng)中，會(huì)對生豬養(yǎng)殖業(yè)造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失，因此在對病毒進(jìn)行嚴(yán)格診斷的基礎(chǔ)上，就需要采取積極有效的措施進(jìn)行綜合防治。平時(shí)要加強(qiáng)豬舍的清潔和衛(wèi)生消毒，一旦發(fā)現(xiàn)患病，豬應(yīng)該第一時(shí)間進(jìn)行封鎖隔離，防止病毒進(jìn)一步擴(kuò)散蔓延造成更多的豬發(fā)病。